Зачем хранить стволовые клетки
Хранение стволовых клеток
Поскольку пуповинная кровь содержит множество стволовых клеток, они могут быть легко выделены и сохранены (хранение при сверхнизких температурах) в случае, если они понадобятся в будущем. Лечение стволовыми клетками и трансплантации были использованы для широкого спектра заболеваний и, таких как рак (в том числе лимфомы и лейкемии ) и наследственные нарушения обмена веществ. Хранение стволовых клеток имеет большие перспективы на основе текущих результатов исследований стволовых клеток , таких как лечение диабета , болезни Альцгеймера , церебральный паралич, регенерация и восстановление поврежденных органов и тканей. Очень часто возникают проблемы в поиске в государственных банках стволовых клеток подходящий Вам крови, однако, клетки полученные из пуповинной крови Вашего ребенка, идеально подходят для вашего ребенка и Вашей семьи. Кроме того, технологии стволовых клеток развивается быстрыми темпами, можно надеяться, что лечение стволовыми клетками станет неотъемлемой частью поддержания здоровья для будущих поколений.
Статистика показывает, что есть больше шансов на успех в трансплантации стволовых клеток между братьями и сестрами , чем при пересадке неродственных доноров и реципиентов . Существует лишь малая вероятность того что трансплант будет отторгнут организмом хозяина ( РТПХ ), что является основным осложнением при трансплантации стволовых клеток. Стволовые клетки брата или сестры могут также играть важную роль в лечении наследственных генетических заболеваний, таких как серповидно-клеточная анемия, в случаях, когда брат не наследует дефектный ген . В таких случаях , собственные стволовые клетки ребенка не могут быть использованы для трансплантации. Если Вы планируете заводить детей в будущем или же у Вас уже есть дети, мы настоятельно рекомендуем Вам рассмотреть возможность (иногда она может быть только раз в жизни) сохранить стволовые клетки Вашего ребенка для потенциального использования в лечении Вашей семьи, а также для собственных медицинских нужд вашего ребенка.
Хранение пуповинных тканей со стволовыми клетками
Пуповина сама по себе является богатым источником стволовых клеток, называемых мезенхимальные стволовые клетки( МСК ). Мезенхимальные стволовые клетки имеют много уникальные функции, в том числе способностью ингибировать воспаление после повреждения ткани секретируют факторы роста, которые помогают в восстановлении тканей и могут использоваться для выращивания различных типов клеток, включая нервные клетки , костные клетки , жировые клетки и хрящи. МСК все чаще используются в регенеративной медицине для широкого круга заболеваний, включая болезни сердца и почек, ALS, заживление ран и аутоиммунных заболеваний.
Стволовые клетки новорожденных в сравнении со взрослыми
Cryo -Cell рекомендует хранения стволовых клеток пуповинной крови, потому что исследования показали, что в стволовых клетках более взрослых доноров наблюдаются признаки старения , которые снижают их способность функционировать, чем стволовые клетки новорожденных. Некоторые из возрастных изменений, приводят к снижению функции иммунной системы и снижению способности к производству клеток крови
Вся информация, представленная на сайте на русском языке, носит справочный характер и не может быть использована в медицинских или иных целях.
Банк хранения стволовых клеток пуповинной крови
Заведующая Центром клеточных и репродуктивных технологий
Тел врача: 8 (423) 2-277-883
Часы работы: c 8:00 до 16:00
Структура Отделения клеточных технологий:
|
Лаборатория выделения и культивирования стволовых клеток
|
Банк стволовых клеток
|
|
|
|
Банк стволовых клеток
Персональное банкирование стволовых клеток пуповинной крови
Сегодня вы можете сделать бесценный подарок своему малышу. Мы предлагаем воспользоваться единственным шансом, который дарит природа, и сберечь уникальные клетки! Однажды этот вклад может стать спасительным!
Что такое стволовые клетки?
Это прародительницы всех без исключения типов клеток в организме. Они не имеют «специализации», то есть при определённых условиях способны многократно делиться и превращаться в клетки любых органов и тканей. Именно поэтому они являются своего рода экстренной помощью: если где-то в организме возникло нарушение, стволовые клетки направляются туда и способствуют восстановлению повреждённого органа. С возрастом количество стволовых клеток уменьшается и, соответственно, снижаются восстановительные возможности организма.
Для чего нужны стволовые клетки?
Реальность такова, что существует целый ряд тяжёлых заболеваний, в первую очередь лейкозов, при которых единственным спасением для человека является трансплантация кроветворных стволовых клеток костного мозга. Поиск донора костного мозга может тянуться годами и, к несчастью, не всегда заканчивается успешно. На сегодняшний день пуповинная/плацентарная кровь является наиболее доступным и безопасным источником гемопоэтических стволовых клеток, являющихся предшественниками клеток крови и иммунной системы. Несомненным достоинством стволовых клеток пуповинной крови является их доступность. Ведь если при рождении ребёнка собрать, выделить и сохранить стволовые клетки пуповинной/плацентарной крови, то ими можно будет воспользоваться в любой момент. Концентрат стволовых клеток пуповинной крови может храниться неограниченно долго в качестве «биологической» страховки будущего здоровья ребёнка.
Кроме того, стволовые клетки используются в травматологии и ортопедии — способствуют восстановлению костных и хрящевых тканей, при лечении рубцов, ожогов, коррекции возрастных дефектов кожи. Достаточно успешно стволовые клетки применяются в кардиологии — уже сегодня апробируются методики для лечения инфаркта миокарда, ишемической болезни сердца, хронической сердечной недостаточности. Очень широко стволовые клетки пуповинной крови используются при заболеваниях, трудно поддающихся традиционным методам лечения (лекарственная терапия), таких как: инсульты, повреждения головного , спинного мозга, церебральный паралич, детская болезнь Паркинсона и Альцгеймера, боковой амиотрофический и рассеянный склероз, ревматические заболевания, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, генетические нарушения, Научные исследования подтверждают возможность применения стволовых клеток в эндокринологии (сахарный диабет), иммунологии, стоматологии, офтальмологии, гепатологии, гастроэнтерологии и других областях.
Уже сегодня перечень болезней, наиболее перспективных в плане применения клеток пуповинной крови исчисляется десятками. Ни у кого не остаётся сомнений в том, что клеточная терапия — основа медицины будущего.
Как получить стволовые клетки пуповинной крови?
Стволовые клетки содержаться в костном мозге, жировой ткани, но оптимальный источник, где их концентрация максимальна, — это кровь, заполняющая плаценту и пуповину новорождённого. Получить стволовые клетки на пике их потенциала и создать их резерв можно только в момент рождения ребёнка.
Процедура забора пуповинной крови абсолютно безопасна для новорождённого и его матери и может осуществляться как при нормальных физиологических родах, так и при кесаревом сечении. После рождения ребёнка врач, принимающий роды, пунктирует иглой пуповинную вену и получает оттуда самотёком от 50 до 250 мл крови. Эта кровь на 3-5% состоит из стволовых клеток.
После забора пуповинная кровь в течении 4-6 часов доставляется в лабораторию, где образец пуповинной крови обрабатывается. Выделение стволовых клеток проводится в сертифицированном «чистом» помещении, соответствующем Российским и международным стандартам, оснащённом подачей стерильного воздуха, и с применением только одноразовых расходных материалов от ведущих мировых производителей.
Используемые в Центре клеточных и репродуктивных технологий уникальные инновационные методики, разрешённые к применению Росздравнадзором, позволяют выделить 95% стволовых клеток из образца пуповинной крови при 98% их жизнеспособности и эффективно подготовить их к криогенному хранению. Все образцы пуповинной крови и выделенных стволовых клеток подлежат серии лабораторных исследований для подтверждения высокого качества и пригодности для последующего клинического использования. Чтобы исключить риск возможного инфицирования бактериальными или вирусными агентами, ни один образец не попадёт в хранилище, не пройдя тщательного бактериологического контроля. Затем стволовые клетки замораживаются и хранятся в жидком азоте при температуре -1960 С сколь угодно долго.
Что такое банки стволовых клеток?
Персональные (семейные) банки сохраняют стволовые клетки, являющиеся собственностью конкретного человека. Никто, кроме родителей или самого ребёнка не сможет воспользоваться этим «именным» клеточным вкладом. Сам факт наличия клеток пуповинной крови в криогенном хранилище означает, что в случае необходимости их можно использовать незамедлительно, без потерь времени на поиск (не всегда успешный) совместимого донора. Чем раньше начнётся лечение, тем больше шансов победить заболевание или остановить его прогрессирование. К тому же клетки пуповинной крови обладают меньшей иммуногенностью в случае тарсплантации не полностью идентичному реципиенту, что позволяет успешно их использовать для пересадки близким (кровным) родственникам донора. Но стопроцентно ими может воспользоваться сам ребёнок. А насколько пуповинная кровь подойдёт папе, маме, брату, сестре, дедушке, бабушке, покажет исследование, которое называется HLA-типирование.
Некоторые банки, работающие на территории Приморского края, перевозят клетки пуповинной крови на обработку и хранение в Москву. Это очень вредно для образца, так как при длительной транспортировке с каждым часом теряется 10% стволовых клеток и 5% их жизнеспособности. Кроме того, механическая тряска приводит к повреждению мембран клеток пуповинной крови, вызывая их нарушение. Именно поэтому во Владивостоке и был создан свой банк стволовых клеток, чтобы максимально приблизить место обработки и хранения клеток к нашим пациентам. Методики, используемые в Центре клеточных и репродуктивных технологий, отвечают международным требованиям и стандартам, предъявляемым к банкам стволовых клеток крови пуповины.
Для криохранения стволовых клеток используется роботизированная система BioArchive («Thermogenesis», США), осуществляющая полностью автоматизированный процесс закладки, хранения и контроля за всеми процессами. Наличие двух программных замораживателей позволяет предохранить образец стволовых клеток от малейщих температурных колебаний, а также контролировать процесс равномерного поэтапного замораживания образца.
Каждый образец стволовых клеток маркируется уникальным буквенным, цифровым и штриховым кодом. Вся информация заносится в автоматизированную базу данных и дублируется. Риск потери или неверной идентификации образца полностью исключён. Для хранения клеток пуповинной крови используют специально разработанные криоконтейнеры. Дополнительные «спутники» позволяют провести необходимые тесты перед клиническим использованием.
При хранении в жидком азоте при температуре -1960 С клетки полностью защищены от внешних воздействий, сохраняют максимальную жизнеспособность и биологическую активность на протяжении проктически неограниченного периода времени. Таким образом «страховка» может сопровождать своего обладателя на протяжении всей жизни. Используемая методика замораживания позволяет получать после размораживания до 85-88% жизнеспособных стволовых клеток.
Хранилище обеспечено системой бесперебойного электроснабжения и находится под круглосуточной охраной. Электронные датчики контролируют уровень азота 24 часа в сутки 365 дней в году.
Как сдать пуповинную кровь на хранение?
Сегодня родители могут заключить с ГАУЗ «Краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи» договор на индивидуальное хранение стволовых клеток своего ребёнка. Центр клеточных и репродуктивных технологий работает в тесном сотрудничестве со всеми роддомами г. Владивостока. Именной набор для сбора пуповинной крови, содержащий все необходимые материалы в герметичной упаковке будет доставлен непосредственно в родильное отделение. Забор крови проведут специалисты, обученные этой процедуре. В любое время года пуповинная кровь в изотермическом контейнере будет незамедлительно доставлена в специализированную лабораторию центра для выделения стволовых клеток.
Вам необходимо только приехать и оформить договор с Центром. Всё остальное сделают его сотрудники. Образец крови может храниться десятилетиями. И если ребёнку потребуется трансплантация стволовых клеток, родителям не придётся тратить драгоценное время и весьма значительную сумму денег и подбирать образец крови в банке доноров (если такой найдётся).
Конечно, взятие, обработка и хранение стволовых клеток стоят денег. Но эти затраты несопоставимы с теми суммами, которые придётся потратить для подбора и покупки донорского образца крови. К тому же получить и сохранить стволовые клетки такими, какими они были при рождении — молодыми, полными сил и энергии, можно только раз в жизни — во время родов, а новые технологии лечения развиваются очень быстро. Возможно, через несколько лет метод трансплантации клеток пуповинной крови будет использоваться очень широко, и Вы пожалеете, что лишили ребёнка уникальной «биологической» страховки и доступности к самым передовым технологиям. И уж однозначно врачи считают, что особенно важно сохранить стволовые клетки ребёнка, если:
· Среди родственников были случаи онкологических заболеваний, сердечно-сосудистых недугов, болезней крови, тяжёлых генетических заболеваний,
· В семье уже есть больные дети, которых можно будет вылечить с использованием стволовых клеток пуповинной крови новорождённого ребёнка,
· Члены семьи являются представителями разных или редких национальностей, что затрудняет подбор совместимого донора
· Вы являетесь многодетными родителями,
· Беременность возникла в результате ЭКО.
Дорогие мамы и папы, бабушки и дедушки, не упустите шанс сделать будущему ребёнку подарок на всю жизнь!
Созданный на базе ГАУЗ «Краевой клинический центр специализированных видов медицинской помощи» Отделения клеточных технологий является единственным в Дальневосточном регионе учреждением подобного профиля, прошедшим сертификацию и получившим лицензию Росздравнадзора на все виды работ и предоставляемых услуг.
Банк хранения стволовых клеток пуповинной крови:
· Соответствие банка всем международным требованиям
· Новейшее оборудование для выделения и хранения стволовых клеток
· Сертифицированные технологии для работы со стволовыми клетками
· Высокоспециализированная лаборатория выделения стволовых клеток
· Определение количества стволовых клеток методом проточной цитофлуориметрии
· Самая эффективная, максимально сберегающая система забора крови
· Надёжное высокотехнологичное криогенное хранилище стволовых клеток
· Автоматизированная система учёта и хранения стволовых клеток
· Культивирование стволовых клеток
· Определение совместимости образцов между ребёнком и родственниками — HLA-типирование
С уважением, коллектив отделения клеточных технологий!
Лаборатория сепарации и замораживания костного мозга (банк стволовых клеток)
Заведующая
Дрык Светлана Иордановна
тел. +375 (17) 207-45-97
Лаборатория сепарации и замораживания костного мозга осуществляет процессинг (концентрация, выделение) и криозаморозку в автоматическом программном замораживателе клеток костного мозга и стволовых клеток периферической крови. При необходимости выделенные клетки могут храниться длительное время в биохранилище в жидком азоте при температуре минус 196°С.
На базе лаборатории создан и функционирует Банк стволовых клеток пуповинной крови на платной основе. Сбор и хранение стволовых клеток пуповинной крови — это новая медицинская технология, своего рода форма медицинского страхования, поскольку однажды полученные стволовые клетки могут храниться десятилетиями.
Стволовые клетки используются при лечении ряда наследственных и приобретенных заболеваний, таких как заболевания системы кроветворения, при терапии острых и хронических заболеваний сердечно-сосудистой, эндокринной и центральной нервной системы, при генетических нарушениях, болезнях опорно-двигательного аппарата, при тяжелых травмах. Лаборатория осуществляет услуги по заготовке (процессингу) и долговременному (20 лет и более) персональному хранению клеток.
Вас ожидает радостное событие — рождение ребенка? Сделайте ему бесценный подарок! Сохраните стволовые клетки новорожденного, содержащиеся в пуповинной крови! Пуповинная кровь — это та кровь, которая остается в пуповине и плаценте после родов и подлежит уничтожению. А на самом деле она является одним из самых перспективных источников стволовых клеток.
Мы Вам предлагаем уникальную возможность сохранить эти клетки. Они на 100% подойдут Вашему ребенку без риска несовместимости и отторжения в случае необходимости, а именно лечение стволовыми клетками сложных заболеваний.
С высокой вероятностью эти стволовые клетки могут подойти братьям и сестрам Вашего ребенка. Они будут выделены, заморожены и помещены на долговременное хранение в криогенное хранилище Банка Стволовых Клеток.
В будущем эти стволовые клетки могут быть использованы для лечения ряда тяжелых заболеваний в случае их возникновения у ребенка или ближайших родственников.
Что такое стволовые клетки и зачем их нужно сохранять?
Сбор и хранение стволовых клеток пуповинной крови — это новая медицинская технология, своего рода форма страхования здоровья и жизни ребенка. Идея создания индивидуального запаса стволовых клеток появилась давно и с тех пор приобрела много весомых аргументов в свою пользу: список включает более 60 заболеваний, для лечения которых применяются стволовые клетки.
При некоторых болезнях трансплантация стволовых клеток является единственным способом спасения жизни больного. Этот эффект базируется на уникальном качестве стволовых клеток — способности воспроизводить клетки многих других типов, которая была открыта недавно.
Таким образом, стволовые клетки — это стержень жизни, источник, из которого образуются все остальные клетки организма. Сейчас трансплантация человеческих стволовых клеток стала частью современной медицины, и, возможно, терапией будущего. С ее помощью лечат больных с заболеваниями опухолевой, врожденной и наследственной природы.
Стволовые клетки, полученные из пуповинной крови, обладают большим потенциалом и они намного моложе однотипных клеток из костного мозга. Это значит, что их возможность превращаться в нужные организму клетки значительно мощнее. Концентрация полезных клеток в пуповинной крови намного больше, чем в костном мозге и в крови у взрослого человека, а процедура их выделения намного проще, дешевле и безопаснее.
При персональном хранении стволовых клеток пуповинной крови они мгновенно доступны, в отличие от поиска совместимого донора костного мозга, на что иногда уходят годы.
Сохранение заболеваний. У малыша будет свой запас личных стволовых клеток и Вы сможете использовать сохраненную в Банке пуповинную кровь своего ребенка в случае необходимости.
Как собирается пуповинная кровь? Опасно ли это для матери и малыша?
Получение стволовых клеток пуповинной крови абсолютно безопасной безболезненный процесс, не связанный с контактом с ребенком или матерью. Собрать и сохранить стволовые клетки пуповинной крови можно только в момент рождения ребенка.
Сбор проводит врач-акушер, который после рождения малыша пережимает и перерезает пуповину, затем из пуповины, отделенной от новорожденного, собирает в стерильную систему, оставшийся в пуповине и плаценте объем крови. Собранную кровь доставляют в Банк, где проводят процедуру выделения стволовых клеток пуповинной крови. В Банке хранится не сама пуповинная кровь, а выделенные из нее стволовые клетки.
Какие тесты проходит кровь в процессе обработки?
Все образцы пуповинной крови проходят тщательный бактериологический, вирусологический контроль. Определяется группа крови и резус-фактор, стерильность, отсутствие инфекций (гепатит В и С, цитомегаловирус), определяется общее количество клеток и количество стволовых клеток, их жизнеспособность.
Как хранятся стволовые клетки?
Клетки замораживаются и хранятся при температуре -196С? в жидком азоте. Это позволяет сохранять их практически без потерь.
Противопоказания для сохранения стволовых клеток.
Абсолютным противопоказанием для длительного хранения стволовых клеток пуповинной крови являются положительные результаты тестирования на ВИЧ, гепатит В и С, сифилис), а также бактериальное или грибковое инфицирование пуповинной крови.
Относительным — низкое содержание клеток ввиду недостаточного количества пуповинной крови. При ее объеме менее 40 мл дальнейшие процедуры по выделению стволовых клеток, как правило, нецелесообразно.
Первый банк персонального хранения стволовых клеток пуповинной крови появился в 1992 г. в США. Сейчас их существует более 150 во всем мире. Банк персонального хранения осуществляет целевое хранение клеток, направленное на применение в случае возникновения заболевания у самого ребенка или его ближайших родственников. Собственником хранящихся клеток является семья. Услуги по сбору, заготовке, хранению образца оплачивают родители ребенка и соответственно распоряжаются ими по своему усмотрению.
Банк персонального хранения клеток пуповинной крови создан и функционирует в Республике Беларусь на базе ГУ ««Минский научно-практический центр хирургии, трансплантологии и гематологии» г. Минска и у Вас есть возможность воспользоваться его услугами.
МЫ ПРЕДЛАГАЕМ ДВА МЕТОДА ВЫДЕЛЕНИЯ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ИЗ ПУПОВИННОЙ КРОВИ
ПЕРВЫЙ МЕТОД – метод седиментации с использованием 6% гидроксиэтилкрахмала.
ВТОРОЙ МЕТОД – автоматический на сепараторе стволовых клеток пуповинной крови – Sepax (Biosafe, Швейцария). Данный метод является международно-признанным стандартом выделения стволовых клеток.
Автоматический клеточный сепаратор – Sepax
Преимуществами автоматического метода выделения стволовых клеток являются максимальный выход хорошо очищенных стволовых клеток, отсутствие влияния человеческого фактора и риска попадания в пуповинную кровь микробных агентов.
Выбор метода зависит от желания родителей!
ЧТО НЕОБХОДИМО СДЕЛАТЬ ДЛЯ ХРАНЕНИЯ ПУПОВИННОЙ КРОВИ В БАНКЕ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК?
Шаг 1: Ознакомиться с договором и приложениями на сайте www.msth.by/ или в лаборатории сепарации и замораживания костного мозга ГУ «МНПЦХТиГ» (г. Минск, ул. Семашко 8, главный корпус, 1 этаж).
Шаг 2: Все волнующие Вас вопросы задать по телефону: 207-45-97.
Шаг 3: Приехать в ГУ «МНПЦХТиГ» в будние дни с 8.00 до 15.30 ч (пятница и предпраздничные дни: 8.00 -14.30 ч).
Шаг 4: Заключить договор.
Внимание: При заключении договора обязательно присутствие обоих родителей, также необходимо предоставить паспорта и обменную карту, в которой указаны результаты необходимых анализов.
ОБРАЗЕЦ ДОГОВОРА с клиентом
|
прейскурант ПЕРВЫЙ ЭТАП РАБОТЫ: Процессинг пуповинной крови автоматическим методом (процессинг пуповинной крови на аппарате Sepax, криозамораживание, общий анализ крови (х2), определение группы крови и резус-фактора, контроль стерильности (х2), определение количества стволовых клеток) 1193.66 BYN Процессинг пуповинной крови ручным методом (процессинг пуповинной крови, криозамораживание, общий анализ крови (х2), определение группы крови и резус-фактора, контроль стерильности (х2), определение количества стволовых клеток) 523.39 BYN ВТОРОЙ ЭТАП ОПЛАТЫ:
ТРЕТИЙ ЭТАП ОПЛАТЫ: Хранение пуповинной крови 1 год:
Хранение пуповинной крови второго ребенка 1 год:
Стоимость второго пакета 68.67 BYN Возврат разницы методов 670.27 BYN ВСЕГО (АВТОМАТИЧЕСКИЙ ПРОЦЕССИНГ): 1327.62 BYN Всего (ручной процессинг): 708.59 BYN |
Сохранение стволовых клеток пуповинной крови
Пуповинная кровь – это кровь, которая остается в пуповине после рождения ребенка. В среднем объем собранной пуповинной крови составляет от 40 до 100 мл, что зависит от физиологических особенностей пуповины. Забор пуповинной крови может быть осуществлен как при физиологических родах, так и при кесаревом сечении.
Пуповинная кровь поступает в банк стволовых клеток, где из нее выделяются стволовые клетки. Их проверяют на вирусы и бактерии, замораживают по специальной программе и хранят в жидком азоте при температуре –196°С. Доказано, что длительное криохранение не влияет на количественные и качественные характеристики стволовых клеток.
Пуповинная кровь содержит большое количество уникальных гемопоэтических стволовых клеток, находящихся на пике своей активности. Это кроветворные стволовые клетки, которые способны многократно делиться и дифференцироваться в различные популяции клеток – предшественников кроветворения. Последние, в свою очередь, дают начало зрелым клеткам крови – лейкоцитам, эритроцитам, тромбоцитам и др. Трансплантированные стволовые клетки пуповинной крови способны восстанавливать систему кроветворения при ее поражении вследствие болезни (лейкозы) или неблагоприятного внешнего воздействия (химиотерапия и/или лучевая терапия).
Собственная пуповинная кровь всегда на 100% подходит ребенку. С большой вероятностью она подойдет и его братьям и сестрам. Но даже когда клетки пуповинной крови используют как донорские, они вызывают намного меньше осложнений и отторжений, чем клетки костного мозга и периферической крови.
Раньше пуповинную кровь утилизировали вместе с пуповиной сразу же после родов, но сегодня родители во всех странах мира все чаще предпочитают сохранить стволовые клетки пуповинной крови, понимая, что только в момент рождения ребенка у них есть уникальная возможность обеспечить персональный запас для своего малыша.
Сбор пуповинной крови – простая и безболезненная процедура, которая абсолютно безопасна для здоровья как роженицы, так и младенца, исключены также любые риски заражения. Кровь из пуповинной вены вытекает самостоятельно, нужно лишь вставить в нее медицинскую иглу. Если, к примеру, сравнить с процессом получения костного мозга, то потребуется двухчасовая операция под общим наркозом, при которой существует риск дыхательных и сердечно-сосудистых расстройств.
Сбор пуповинной крови проводит специально обученный персонал родильного отделения (акушерка) в родильном зале непосредственно после рождения ребенка до отделения плаценты. После того как ребенок родился, пуповину пережимают специальными зажимами, и оставшуюся внутри пуповинную кровь собирают в стерильный пакет для крови (гемакон) с веществом, которое препятствует сворачиванию крови (антикоагулянтом). К пакету присоединена магистраль (трубка) с иглой для сбора крови. Этой иглой прокалывают пуповинную вену, и через иглу пуповинная кровь поступает в пакет. Весь процесс занимает 2-5 минут и может быть произведен и при естественных родах, и при кесаревом сечении. Пакет обязательно подписывают, помещают в контейнер, заполняют сопроводительные документы и отдают курьеру нашего центра.
Стволовые клетки пуповинной крови при необходимости доступны по первому требованию их владельца, поскольку при сверхнизких температурах (-196°С) сохраняют функциональную активность длительное время. Процесс подготовки к выдаче образца не занимает много времени, тогда как необходимый донорский образец можно искать годами.
Использовать стволовые клетки пуповинной крови очень экономично – сохранив стволовые клетки пуповинной крови новорожденного, родители могут быть уверены: стоимость сбора, выделения и хранения собственных стволовых клеток пуповинной крови даже на протяжении всей жизни как минимум в 10 раз меньше стоимости донорского образца стволовых клеток костного мозга. К тому же процесс поиска подходящего донора костного мозга достаточно дорогой и долгий.
Стволовые клетки можно эффективно получать из тканей пуповины
«Сейчас банкирование пуповинной крови ― распространенная процедура во всем мире, но кроме самой пуповинной крови, можно еще и банкировать клетки, выделенные из Вартонова студня и тканей самого пупочного канатика. По сути, это источник фетальных клеток, но их использование лишено каких-либо этических и законодательных проблем. Учитывая, что мы можем замораживать не культуру клеток, а сразу кусочек ткани, по мере необходимости разморозить его и использовать, например, для получения культуры клеток», — говорит Тимур Фатхудинов, один из авторов исследования, профессор кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии РУДН.
Криоконсервация тканей в 2,5 раза дешевле, чем хранение пуповинной крови. Однако медики РУДН считают, что лучше замораживать отдельно пуповинную кровь как источник гемопоэтических стволовых клеток — предшественников клеток крови, и отдельно — остальные ткани пуповины как источник мезенхимальных стволовых клеток — эффективный инструмент регенеративной медицины.
Медики РУДН проанализировали результаты научных исследований за последние 30 лет и обнаружили, что Вартонов студень используется в двух направлениях. Из его частей выделяют стволовые клетки, которые могут дифференциироваться, то есть превратиться, в клетки костной ткани, в хрящевые или жировые клетки. Такие стволовые клетки называются мезенхимальными стволовые клетками (МСК). Свойства МСК из пуповины во многом превосходят по своим свойствам аналогичные клетки из костного мозга.
Вартонов студень также применяется при лечении ожогов роговицы и ран. Для этого его очищают от всех клеток и оставляют только внеклеточный матрикс — «каркас», который окружает все клетки ткани, удерживает их на своем месте и, в то же время, объединяет в одну систему. Он состоит в основном из белков коллагена и фибрина, а также содержит гиалуроновую кислоту. Далее из этой массы удаляют лишнюю жидкость, накладывают ее на поврежденный участок — это ускоряет восстановление тканей. Медики РУДН описали также и другие примеры применения пуповины. Например, фрагменты сосудов пуповины используются для протезирования кровеносных сосудов, восстановления нервных тканей, тканей ротовой полости, мышечных тканей.
«Долгие годы ткани пупочного канатика считались абсолютно бесполезными — своего рода медицинским мусором. Мы собрали доказательства того, что ткани пупочного канатика могут оказаться полезными для дальнейшего клинического использования. Наше исследование показывает, что в ближайшем будущем следует ожидать рост спроса на эту процедуру», — добавил Тимур Фатхудинов, профессор кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии РУДН.
Понравился материал? Добавьте Indicator.Ru в «Мои источники» Яндекс.Новостей и читайте нас чаще.
Пресс-релизы о научных исследованиях, информацию о последних вышедших научных статьях и анонсы конференций, а также данные о выигранных грантах и премиях присылайте на адрес [email protected].
Хранение стволовых клеток новорожденного. Гемабанк Челябинск
Семейная Клиника «Жемчужина» — официальный представитель Гемабанка в Уральском регионе предлагает заключить договор на забор пуповинной крови новорожденного для последующего хранения. Стволовые клетки пуповинной крови – биологическая страховка здоровья вашего ребенка и всей семьи на долгие годы.
Вы ждете ребенка? Уже сейчас Вы привыкаете заботиться еще об одном члене семьи. Пока он внутри Вас, он находится под Вашей защитой. Но как защитить новорожденного кроху от возможных проблем в будущем?
Сегодня стала доступна услуга биострахования здоровья.
Позаботьтесь о здоровье новорожденного и всей Вашей семьи на долгие годы вперед!
Воспользуйтесь достижениями современной медицины и обеспечьте своему ребенку и всей семье защиту от ряда серьезных заболеваний.
Речь идет о заборе пуповинной крови младенца сразу после рождения. Из этой крови будут выделены и законсервированы стволовые клетки — бесценный строительный материал всего организма. В будущем эти клетки могут спасти жизнь вашему ребенку или кому-то из членов его семьи.
Зачем хранить стволовые клетки?
Уже сегодня стволовые клетки применяются при лечении более 85 опасных заболеваний, в том числе для восстановления кроветворения после химиотерапии, при лечении онкогематолгических заболеваний, болезней крови и иммунной системы и многих других.
Клеточная медицина – весьма перспективное направление. Очевидно, что список болезней, при которых стволовые клетки окажутся одним из основных или даже единственным способом лечения, будет расти. Ученые продолжают работать над расширением областей применения стволовых клеток.
ЧТО ТАКОЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ?
Стволовые клетки – это предшественники всех типов клеток в нашем организме. Стволовые клетки превращаются при определенных условиях в различные типы клеток: клетки крови, печени, костной ткани, сосудистые клетки. Они способны к самообновлению. В нашем организме стволовые клетки есть во всех тканях, именно они обеспечивают восстановление поврежденных тканей. Но с возрастом их количество сокращается, снижая возможности организма к регенерации.
Традиционными источниками стволовых клеток взрослого человека являются костный мозг и периферическая кровь.
Пуповинная кровь, то есть та кровь, которая остается в пуповине после рождения ребенка, — самый перспективный источник стволовых клеток сегодня. Но в большинстве случаев этот ценный материал в наших роддомах утилизируется. А ведь этот уникальный, невосполнимый материал может сохранить жизнь вашему ребенку и с большой вероятностью его близким родственникам..
Пуповинная кровь как источник стволовых клеток имеет по сравнению с костным мозгом много преимуществ:
Количество. Пуповинная кровь является самым насыщенным источником стволовых клеток. В 100 миллилитрах пуповинной крови находится столько же стволовых клеток, сколько в 1 литре костного мозга. Количество и концентрация стволовых клеток в пуповинной крови в 10 раз больше, чем в костном мозге.
Молодость. Стволовые клетки из пуповинной крови намного моложе клеток из костного мозга, они биологически активны, так как они сохранены в самом начале жизни человека. Количество. Как мы отметили выше, в пуповинной крови содержание стволовых клеток в 10 раз больше, чем в костном мозге.
Безопасность. Процесс сбора пуповинной крови занимает 10 минут, не оказывает никакого воздействия на здоровье матери и ребенка (в момент сбора с ними нет контакта). Сбор костного мозга занимает несколько часов и выполняется под общим наркозом.
Имуннотолерантность. Собственные стволовые клетки на 100% подойдут вашему ребенку, и высока вероятность, что они подойдут его близким родственникам. Так как стволовые клетки из пуповинной крови иммунологически не зрелы, то риск отторжения снижается.
Экономичность. Стоимость сбора и хранения пуповинной крови во много раз меньше, чем донорство костного мозга.
Быстрота. Стволовые клетки, сохраненные в Гемабанке доступны в любой момент, в то время как на поиск донора костного мозга уходят месяцы. При лечении онкологических заболеваний фактор времени играет существенную роль.
БАНКИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ИЛИ О ГЕМАБАНКЕ
За рубежом создано около 200 банков хранения пуповинной крови. Есть такой банк и в России. Он создан в 2003 году на базе Российского Онкологического Научного центра им.Н.Н. Блохина РАМН.
О Гемабанке. Часть 1
О Гемабанке. Часть 2
Статистика:
Сегодня во всем мире храниться в донорских банках и частных банках более 1 450 000 образцов пуповинной крови.
Благодаря наличию банков пуповиной крови проведено 20 000 неродственных трансплантаций стволовых клеток пуповинной крови. Доля трансплантаций Стволовых клеток из пуповинной крови составляет 20%.
Взрослые пациенты стали получателями пуповинной крови в 2 раза чаще, чем дети.
Выживаемость пациентов при трансплантации стволовых клеток из пуповинной крови выросла в 2 раза, по сравнению с трансплантацией костного мозга.
Во всем мире проводится около 200 активных исследований применения стволовых клеток пуповинной крови для лечения различных заболеваний.
ПРОЦЕДУРА ЗАБОРА ПУПОВИННОЙ КРОВИ
Процедура сбора пуповинной крови проста, безболезненна, как для матери, так и для ребенка, и занимает не более 10 мин. Забор крови осуществляется сразу после того как пуповина перерезана. Врач вставляет в нее стерильную иглу и перекачивает кровь в специальный герметичный контейнер. Ни грамма крови матери и ребенка в контейнер не попадет.
ОБРАБОТКА, ЗАМОРАЖИВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ
После взятия крови, контейнер доставят в течение суток в Гемабанк. Контейнер специально оборудован для временного хранение крови. В лаборатории Гемобанка по специальной методике из пуповинной крови будут извлечены и заморожены стволовые клетки. Материал помещают в специальные мешки для хранения в условиях сверхнизких температур а так же в 3 криопробирки-спутника.Пробирки позволяют работать с материалом, не размораживая основной контейнер, если необходимо провести исследование. Каждый образец имеет свой уникальный номер. Маркировка гарантирует неприкосновенность стволовых клеток вашего ребенка. Затем контейнер замораживают плавно охлаждая до -80 градусов Цельсия и погружают в жидкий азот.
В течение 3-х месяцев образец находится в карантине. Стволовые клетки проверяют на наличие инфекций, вирусов, на жизнеспособность. Прошедшие строгий контроль образцы помещают в хранилище Гемабанка.
В криохранилище поддерживается температура -176-196 Градусов Цельсия. Хранилище подключено к автоматической системе подачи жидкого азота. Контроль за состоянием системы и подачи азота ведет автоматизированная интеллектуальная система. Доступ сотрудников в хранилище строго ограничен, и контролируется системой безопасности.
ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ:
По Приказу Минздрава РФ от 25.07.2003г. №325 не подлежит для заготовки пуповинная кровь, если была внутриутробная гибель плода, мертворождение, или в пренатальном периоде в крови матери были обнаружены: HbsAg, Anti-HCV, Anti-HCV1
КАК ПРИНЯТЬ РЕШЕНИЕ?
Хранение материала в Гемабанке своего рода медицинская страховка ребенка. Стоит о ней задуматься, если:
-
У родителей есть генетическая предрасположенность к определенным заболеваниям.
-
В семье есть старший ребенок, который нуждается в трансплантации стволовых клеток.
-
В семье есть смешение национальностей.
-
У вас есть желание защитить ребенка от проблем в будущем.
У вас все еще есть вопрос, зачем хранить стволовые клетки? Посмотрите подробный материал об этом на сайте Гемабанка — www.gemabank.ru
Какова вероятность, что вам понадобиться собранный материал?
От 1:10 000 до 1:100, а с учетом роста онкозаболеваний и расширения спектра применения стволовых клеток для лечения других заболеваний, в будущем стволовые клетки из пуповинной крови будет использовать каждый 3 пациент.
Для раздумий не так уж много времени – ведь собрать пуповинную кровь можно только один раз – при рождении ребенка.
Узнать подробнее об услуге или о Гемабанке можно в семейной клинике или на официальном сайте Гемабанка — www.gemabank.ru
Лицензия (Гемабанк) № 99-01-001458 от 12 мая 2005 года на применение новых клеточных технологий в здравоохранении
Семейная Клиника «Жемчужина» — официальный представитель Гемабанка в Уральском регионе предлагает заключить договор на забор пуповинной крови новорожденного для последующего хранения. Стволовые клетки пуповинной крови – биологическая страховка здоровья вашего ребенка и всей семьи на долгие годы.
По вопросам заключения договоров обращайтесь по телефону клиники (351) 200-34-04 или по тел. 8-912-891-48-79 (Людмила Леонидовна)
Сохранять или не сохранять свой собственный запас стволовых клеток пуповинной крови?
Сбор и хранение стволовых клеток пуповинной крови — это новая медицинская технология, своего рода форма медицинского страхования, поскольку однажды полученные стволовые клетки могут храниться десятилетиями. Процедура доступна любой женщине — только мало кто о ней слышал.
Суть процедуры заключается в следующем: сразу после родов из пуповины получают кровь, которая принадлежала плоду. Выделенные из неё клетки замораживают и хранят в специальном банке до тех пор, пока они не потребуются.
Пуповинная кровь, собранная при рождении, может предоставлять ребенку и всей семье возможность восстановить здоровье в случае заболевания. Сегодня стволовыми клетками пуповинной крови лечат более 85 различных болезней. Уже сейчас они применяются при лечении острых и хронических лейкозов, болезней крови и иммунной системы, а именно для восстановления клеток крови после химиотерапии.
У стволовых клеток пуповинной крови есть одно неоспоримое преимущество — абсолютная генетическая идентичность тканям ребенка, из пуповинной крови которого они были получены. С большой вероятностью, эти клетки могут подойти брату, сестре, а также родителям. По медицинским показаниям, сохранить стволовые клетки пуповинной крови необходимо тем, у кого в семье диагностировались болезни крови либо злокачественные образования и если в семье уже есть больные дети.
Надеемся, что вам и вашим близким стволовые клетки никогда не понадобятся, но, если возникнет критическая ситуация, то знайте, что у вас есть возможность им помочь.
Перинатальный центр «ДАР» оказывает услугу сбора крови из пуповины плода. Дополнительно будут расходы на выделения и хранения стволовых клеток, о которых можно узнать в лицензированном банке персонального хранения стволовых клеток пуповинной крови.
За более подробной информацией обращайтесь по телефону: (3852) 56-93-25
Что происходит с клетками пуповинной крови, когда процесс замораживания прерывается?
Октябрь 2015Криобанк пуповинной крови Progenics
Криобанк пуповинной крови Progenics
Рождение ребенка — это единовременная возможность собрать из пуповинной крови те стволовые клетки, которые могут восстанавливать и пополнять кровь пациента. иммунные системы и проводят восстановительную терапию. В отличие от стволовых клеток, поступающих из костного мозга или периферической крови, невозможно вернуться к источнику, если стволовые клетки потеряны или повреждены.Таким образом, правильное замораживание (криоконсервация) и хранение для будущей трансплантации имеют первостепенное значение для клеток пуповинной крови.
Замораживание обычно происходит в приборе, называемом морозильником с контролируемой скоростью, который охлаждает стволовые клетки с оптимальной скоростью 1-2,5 ° C в минуту (слишком низкая скорость вызывает повреждение клеток из-за воздействия раствора; но при слишком высокая скорость внутриклеточного замораживания убивает клетки за счет разрыва клеточных мембран). Тем не менее, в лаборатории что-то может пойти не так, и очень важно знать, что делать, чтобы спасти клетки, если контролируемая скорость замораживания прерывается по какой-либо причине.
В нашем исследовании мы изучили, что происходит с клетками, когда процесс замораживания прерывается при различных температурах: 4 ° C, -10 ° C, -20 ° C, -30 ° C, -40 ° C и -80 ° C. .
При каждой температуре клетки вынимали из морозильника и либо сразу погружали в жидкий азот в паровой фазе (LNVP), либо хранили в течение нескольких часов в механической морозильной камере -80 ° C перед переносом в LNVP. После каждой обработки мы размораживали тестируемый образец и оценивали жизнеспособность всех ядерных клеток (TNC), клеток CD34 +, клеток CD45 + и макрофагов, образующих большие колонии (CFU-GM).
Мы использовали три расчета для определения жизнеспособности клеток в образцах:
- процент извлечения клеток, рассчитанный как отношение общего количества клеток в обработанном образце к размороженному контролю;
- процентная жизнеспособность клеток, рассчитанная как отношение жизнеспособных клеток CD45 + или CD34 + в обработанном образце, деленное на общее количество живых и мертвых клеток в обработанном образце; и
- процент выживаемости , рассчитанный как отношение жизнеспособных клеток в обработанном образце к размороженному контролю.
Наши результаты показывают, что на жизнеспособность после оттаивания влияет не только то, как клетки обрабатываются и какие анализы используются для измерения здоровья клеток, но и то, как определяется успех.
Мы обнаружили, что менее 5% клеток TNC и 10% клеток CD34 + были потеряны, когда процесс замораживания был прерван при любой температуре, независимо от того, был ли образец клеток перенесен непосредственно в LNVP или помещен в механический морозильник -80 ° C. перед переводом в ЛНВП.Однако возможность подсчета клеток не гарантирует, что подсчитываемые клетки живы.
Мы обнаружили, что измерение общего количества клеток ( процент восстановления ) не является полезным параметром для определения того, стоит ли хранить образец, подвергшийся прерыванию замораживания, для последующей трансплантации, поскольку он включает мертвые, а также живые клетки, и другие факторы также порождают вводящие в заблуждение ценности.
процентная жизнеспособность клеток CD34 +, анализ, который используется в большинстве криобанков, к сожалению, неточен, поскольку на него влияет потеря мертвых клеток (меньший знаменатель в соотношении дает ложное значение жизнеспособности).
Процент выживаемости клеток CD34 +, измеренный отношением общего количества жизнеспособных клеток к общему количеству жизнеспособных клеток в необработанном образце, по-видимому, является точным расчетом жизнеспособности для использования. Однако даже здесь были сложности. Когда мы оценивали выживаемость после оттаивания с использованием колоний CFU-GM, было обнаружено, что она была значительно ниже, чем выживаемость клеток CD34 + при всех температурах прерывания. Таким образом, как определение успеха, так и анализ, используемый для его измерения, одинаково важны для оценки жизнеспособности после оттаивания.
Мы пришли к выводу, что выживаемость CFU-GM следует использовать в качестве индикатора жизнеспособности, когда охлаждение прерывается, и что клетки должны быть перенесены в LNVP при температурах выше -40 ° C.
Мы рекомендуем переносить образцы пуповинной крови в морозильную камеру с температурой -80 ° C перед LNVP, когда морозильная камера с контролируемой скоростью недоступна или когда замораживание прерывается. Если необходим прямой перенос в LNVP, ячейки следует сначала охладить до -40 ° C или ниже.
Сообществу пуповинной крови было бы полезно, если бы анализ жизнеспособности был стандартизирован, что позволило бы банкам пуповинной крови и программам аутологичных стволовых клеток обмениваться и надежно сравнивать данные.
Progenics — это аккредитованный AABB центр, специализирующийся на обработке и криоконсервации стволовых клеток пуповинной крови человека. Progenics участвует в исследованиях и вносит свой вклад в публикации в научных журналах под руководством доктора Хунъю Янга, чтобы улучшить качество и стандартизацию обработки и криоконсервации стволовых клеток пуповинной крови.
Ссылки:
- Х. Ян, А. Пидгорна, М. Р. Лутфи, П. Шуен. 2015. Влияние прерывания замораживания с контролируемой скоростью на жизнеспособность стволовых клеток пуповинной крови. Transfusion 2015; 55 (1): 70-76 doi: 10.1111 / trf.12774
Как замораживание клеток пуповины может спасти жизнь вашего ребенка | The Independent
Хотя я понимаю, что это совершенно нормально, когда бабушка и дедушка впервые хотят купить что-то для ребенка, в прошлое воскресенье я чуть не подавился жареным ужином, когда мой отец предложил финансировать замораживание части ее плаценты. и пуповина.Я имел в виду нечто большее, похожее на детскую кроватку или стерилизатор.
Но мой отец решил, что хранение пуповинной крови его внучки — крови ребенка, которая остается в плаценте и пуповине после рождения — будет лучшим подарком. С тех пор я обнаружил, что пуповинная кровь содержит стволовые клетки, которые используются для лечения связанных с кровью заболеваний, таких как лейкемия и серповидноклеточная анемия, а также некоторых иммунных и метаболических нарушений. Некоторые ученые также утверждают, что пуповинная кровь потенциально может быть использована для лечения таких заболеваний, как болезнь Альцгеймера и Паркинсона, и таких состояний, как диабет, а также болезней, поражающих мозг, сердце и позвоночник.«Это подарок, который может спасти ей жизнь», — гордо объявил мой отец.
Если у моей дочери — которая должна родиться в этом месяце — возникнет необходимость в трансплантации стволовых клеток в любой момент ее жизни, она может обратиться к пуповинной крови, хранящейся в общественном банке. Но хранение собственного в частном коммерческом банке обеспечивает гарантированное совпадение не только для вас, но и для вашей большой семьи.
Эмбриональные стволовые клетки могут быть также возможность для нее, но это спорно. Более того, Стивен Стром, доцент кафедры патологии Университета Питтсбурга, обнаружил, что стволовые клетки пуповинной крови не генерируют опухоли, связанные с эмбриональными стволовыми клетками.«Плацента и пуповина, как представляется, является богатым источником стволовых клеток, которые являются непротиворечивыми, и лучше, альтернатива эмбриональные, и которые имеют реальный потенциал для лечения болезни,» говорит он.
Третья возможность — это трансплантация костного мозга, общепринятый и рутинный способ лечения многих заболеваний. Проблема в том, что они с большей вероятностью будут отвергнуты организмом реципиента, чем стволовые клетки.
Практика хранения пуповинной крови уже получила широкое распространение в Штатах — в Пенсильвании, например, этот вопрос даже вошел в законодательный орган штата: акушеры, которые не сообщают молодым матерям, что такая практика возможна, теперь подвергаются риску подали в суд.Тем не менее, реальность такова, что американцы с большей вероятностью переживут это, если они высококлассные жительницы Нью-Йорка, чем женщины рабочего класса из Алабамы — не в последнюю очередь из-за стоимости, которая одинакова по обе стороны Атлантики. , это что-нибудь более 1500 фунтов стерлингов.
В Великобритании популярность тоже растет. Введите «банк стволовых клеток пуповинной крови» в Google или посмотрите рекламу журнала для родителей — вы найдете множество компаний, многие из которых имеют более 10 000 клиентов.
Информационный бюллетень INDY / LIFE
Вдохновляйтесь последними тенденциями образа жизни каждую неделю
Информационный бюллетень INDY / LIFE
Вдохновляйтесь последними тенденциями образа жизни каждую неделю
«Когда родилась наша первая дочь, мы пошли без других вещей, таких как детские коляски.Это было приоритетом. Мы сделаем то же самое с этим ребенком, — говорит 36-летняя Ребекка МакКаллум из Кента. — У нас нет никаких наследственных заболеваний, но зачем упускать возможность собирать клетки моих детей, если это можно сделать так легко? »
«Легко» — это слышать с облегчением. Я достаточно беспокоюсь о родах, не беспокоясь о болезненной хирургии. Но сбор крови неинвазивен и безопасен для ребенка и матери, и для этого требуется всего лишь акушерке, медсестре или акушеру несколько минут для сбора крови.Это обычная процедура, выполняемая, когда у новорожденного желтуха или группа крови матери резус-отрицательная, или для определения группы крови.
Проблема в том, что не все медицинские работники подчиняются. У моего собственного фонда NHS Trust есть особая политика, требующая, чтобы «сотрудники, которые обращаются за помощью в получении таких стволовых клеток, отказывались от этого».
У меня остается два варианта: либо мой муж закатывает рукава и входит (что чаще, чем вы думаете, но не рекомендуется), либо я плачу дополнительно 200 фунтов стерлингов банку стволовых клеток, чтобы он отправил их. это сделает их собственный флеботомист.
Моя следующая дилемма — какой банк стволовых клеток выбрать. Джордж Макридис, управляющий директор Future Health, говорит, что их сильная сторона заключается в том, что они немедленно отсеивают стволовые клетки. «У этого есть два преимущества: он удаляет эритроциты, которые могут оказаться токсичными для реципиента, и он занимает меньше места и, следовательно, его легче хранить», — говорит он.
Но Уэйн Ченнон, председатель Cells4Life, не согласен. «Мы храним цельную кровь. В противном случае вы можете выбросить то, что может пригодиться в дальнейшей жизни», — говорит он.
Затем возникает затруднительное положение: выбрать ли частный банк, в котором хранится пуповинная кровь исключительно для использования вашей собственной семьей, или двойной государственный / частный банк, такой как Virgin Health Bank. «При некоторых заболеваниях крови, таких как лейкемия, трансплантация собственной крови ребенка может быть вредной, — объясняет генеральный директор Эндрю Дэвис. «Сохраненные стволовые клетки могут содержать ту же аномалию, которая в первую очередь стала причиной того, что ребенок заболел. В этом случае лучше было бы пожертвовать из другого источника.В нашей системе 20 процентов образца пуповинной крови хранится в частном порядке для использования семьей, а 80 процентов — публично, что повышает вероятность того, что все наши члены найдут совпадение, и позволяет родителям действовать этично ».
Shamshad Ахмед, управляющий директор Smart Cells International, не убежден: «Модель Virgin может показаться достойной, но экономия 20 процентов пуповинной крови — пустая трата — с ней ничего не поделать», — настаивает он. Еще больше сбитый с толку своими вариантами, я обращаюсь к некоторым ученым, специализирующимся на стволовых клетках, которые, надеюсь, будут более объективными.Доктор Энн Смит, однако, относится к числу тех, кто не станет говорить со мной, пока я не соглашаюсь процитировать их в качестве научных консультантов частных банков шнура. В конце концов, не так уж и беспристрастно.
Наконец-то я добился золота с доктором Марком Тернером, клиническим директором Эдинбургского центра переливания крови и почетным гематологом-консультантом Королевской больницы Эдинбурга. Он сочувствует моему недоумению, но сообщает мне, что хранение стволовых клеток не дает никаких гарантий. Хотя во всем мире было проведено более 6000 успешных трансплантаций стволовых клеток пуповинной крови — и 80 процентов заболеваний крови в настоящее время лечатся стволовыми клетками пуповинной крови — они не являются панацеей.«Остерегайтесь компаний, которые заявляют, что могут вылечить болезнь Паркинсона или Альцгеймера. В будущем это может быть так, но сейчас это не так», — говорит он.
С этим согласен профессор Колин Макгукин, профессор регенеративной медицины Университета Ньюкасла. «Если эти банки действительно хотят, чтобы это стало реальностью, они должны направить часть своей прибыли на исследования стволовых клеток, но многие этого не делают», — говорит он.
Банки также должны честно сказать, как долго живут стволовые клетки, говорит он. «Самой старой пуповинной крови, которую нужно было сохранить и успешно переместить, было 17 лет.Может быть, в следующем году мы получим кровь 18 или 19-летнего возраста, но мы не можем быть уверены ». Бэнкс также должен признать, что стволовые клетки могут быть непригодны, — говорит он. для трансплантации, особенно взрослому.
Макгукин предупреждает, что, хотя большинство британских банков стволовых клеток имеют аккредитацию от Управления по тканям человека, ковбойские отношения существуют. «Я помог закрыть большинство плохих парней, но аккредитация недостаточно строгая. «
Среди больших запретов — компании, которым требуется более 48 часов с момента рождения, чтобы доставить кровь в банк.«Если вы оставите кровь висеть повсюду, она свернется, даже при использовании агентов, препятствующих свертыванию, но некоторые банки по-прежнему отправляют ее на хранение в Америку или Южную Африку», — говорит он.
Всегда проверяйте, кто входит в консультативный совет. «Это люди, которые действительно знают о пуповинной крови, или кучка финансовых людей?» он говорит. «Кроме того, избегайте компаний, которые требуют деньги заранее и не предлагают возмещения в случае, если не будет собрано достаточное количество пуповинной крови, что может произойти».
Что касается частной и государственной модели и хранения цельной крови по сравнению только со стволовыми клетками, Макгукин говорит, что еще рано говорить с уверенностью.«Мы не узнаем еще 10 или более лет, что лучше», — говорит он.
Совет Макгукина оказался полезным при отделении пшеницы от плевел. Наиболее показательной была одна компания, которая отказалась отвечать ни на один из моих вопросов, просто заявив, что все, что мне нужно знать, есть на их веб-сайте — это не так. Но хотя некоторые банки отметили большинство из пунктов Макгукина, я все еще испытываю беспокойство по поводу всей практики. Похоже, что банки используют свою маркетинговую тактику, чтобы рассчитывать на то, что родители будут чувствовать, что защищают будущее своих детей.В итоге, однако, я решил с благодарностью принять этот, в конце концов, невероятно продуманный и значимый подарок от моего отца — в сильной надежде, что его никогда не придется использовать.
Прежде чем делать ставку на лечение …
..получите домашнее задание с банками стволовых клеток:
* Аккредитован ли банк Управлением по тканям человека и Управлением по регулированию лекарственных средств и товаров медицинского назначения?
* Является ли банк полностью честным в отношении того, какие заболевания и недомогания можно лечить стволовыми клетками пуповинной крови, или он делает заявления, основанные на том, что может быть возможно в будущем?
* Что произойдет, если стволовые клетки не будут собраны? Например, в случаях, когда ребенок недоношен, необходимо преждевременно перерезать пуповину на шее, чтобы родить ребенка, или вы родились путем экстренного кесарева сечения.
* Допускает ли банк, что ваши стволовые клетки могут быть непригодными для использования или их может не хватить для трансплантации?
* Где хранятся стволовые клетки и потребуется ли больше двух дней, чтобы добраться до места назначения?
* Являются ли члены консультативного совета банка медицинскими или финансовыми экспертами?
* Предлагает ли банк возмещение в случае, если не удается собрать достаточное количество пуповинной крови?
* Взимает ли банк дополнительную плату за скрининг на бактериальные заболевания?
* Несет ли кто-либо ответственность за скрининг крови, чтобы гарантировать, что кровь, положительная на ВИЧ / гепатит, хранилась отдельно?
* Кто будет владеть пуповинной кровью на законных основаниях?
* Что будет с пуповинной кровью, если банк в будущем перестанет функционировать?
* Возвращает ли банк свою прибыль на исследования стволовых клеток?
Что такое пуповинная кровь и банки пуповинной крови?
Что такое банк пуповинной крови?
Пуповинная кровь (сокращенно от пуповинной крови) — это кровь, которая остается в пуповине и плаценте после родов.В ближайшее время происходит передача клеток от матери к плоду для усиления иммунной системы как матери, так и ребенка при подготовке к родам. Это делает пуповинную кровь во время родов богатым источником стволовых клеток и других клеток иммунной системы. Банки пуповинной крови — это процесс сбора пуповинной крови, извлечения и криогенного замораживания ее стволовых клеток и других клеток иммунной системы для потенциального использования в медицине в будущем.
Поскольку пуповинная кровь взаимосвязана с банками пуповинной крови, это часто общий термин, используемый для различных клеток, которые хранятся.Некоторые родители могут быть удивлены, узнав, что хранимая пуповинная кровь содержит мало того, что люди считают «кровью», поскольку красные кровяные тельца (эритроциты) на самом деле могут быть вредными для лечения пуповинной кровью. (Как мы обсудим позже, одна из главных целей обработки пуповинной крови — значительно уменьшить объем эритроцитов при любом заборе пуповинной крови.)
В Европе и других частях мира банк пуповинной крови чаще называется банком стволовых клеток .Поскольку банк пуповинной крови предназначен больше для сбора кроветворных стволовых клеток, а не самих клеток крови, этот термин может быть более подходящим.
Было время до 1990-х годов, когда пуповина и ее кровь считались медицинскими отходами. Сегодня родители хранят пуповинную кровь своего ребенка в банке, потому что стволовые клетки, которые она содержит, в настоящее время используются или перспективны для лечения опасных для жизни и изнурительных заболеваний.
К счастью для будущих родителей, пуповинную кровь можно легко собрать при рождении ребенка через пуповину без вреда для матери или ребенка.Вот почему беременность — отличное время, чтобы спланировать сбор и хранение пуповинной крови ребенка.
Пуповинная кровь в лечении болезней
Пуповинная кровь в настоящее время одобрена для лечения почти 80 заболеваний крови и иммунной системы.
Пуповинная кровь содержит множество стволовых клеток и клеток иммунной системы, и медицинское использование этих клеток быстро расширяется. Поскольку эти клетки помогают организму восстанавливать ткани и системы, пуповинную кровь часто называют регенеративным средством.
Пуповинная кровь в настоящее время одобрена FDA для лечения почти 80 заболеваний, и лечение пуповинной кровью проводилось более 35000 раз по всему миру для лечения рака (включая лимфому и лейкемию), анемий, наследственных нарушений обмена веществ и некоторых солидных опухолей. и ортопедический ремонт. Исследователи также изучают способность пуповинной крови преодолевать гематоэнцефалический барьер и уменьшать воспаление, что может сыграть важную роль в лечении состояний, которые до сих пор не поддались лечению.Наиболее волнующими из них являются аутизм, церебральный паралич и болезнь Альцгеймера.
В настоящее время шансы перенести любую трансплантацию стволовых клеток к 70 годам составляют один к 217, но с постоянным развитием пуповинной крови и связанных с ней исследований стволовых и иммунных клеток вероятность использования консервированной пуповинной крови для лечения заболеваний будет продолжают расти. Узнайте больше о пуповинной крови как о регенеративном лекарстве здесь.
Льготы для всей семьи
Поскольку иммунная система организма предназначена для поиска и избавления от того, что, по его мнению, является посторонними загрязнителями, стволовые клетки и другие клетки иммунной системы не могут быть переданы кому-либо.При переливании стволовых клеток любого типа иммунная система организма может по ошибке начать атаковать собственное тело пациента. Это известно как болезнь трансплантат против хозяина (РТПХ) и представляет собой большую проблему после трансплантации. РТПХ может быть изолированной и минимальной, но также может быть острой, хронической и даже смертельной.
Чтобы предотвратить болезнь «трансплантат против хозяина» и обеспечить приживление, перелитые стволовые клетки должны полностью или до определенной степени соответствовать клеткам пациента (в зависимости от того, что лечится).Пуповинная кровь, взятая из пуповины ребенка, всегда идеально подходит для ребенка. Кроме того, ближайшие родственники с большей вероятностью также будут соответствовать хранимой в банке пуповинной крови. Братья и сестры имеют 25-процентный шанс быть идеальным совпадением и 50-процентный шанс быть неполным. Родители, каждый из которых предоставляет половину маркеров, используемых при сопоставлении, имеют 100% шанс оказаться неполным совпадением. Даже тети, дяди, бабушки и дедушки и другие члены расширенной семьи имеют более высокую вероятность совпадения и, возможно, могут извлечь выгоду из хранящейся в банке пуповинной крови.Прочтите больше причин, по которым вам следует хранить пуповинную кровь.
Сколько стоит хранение пуповинной крови?
Поскольку большинство родителей хотели бы хранить пуповинную кровь своих младенцев, чтобы защитить свои семьи, часто именно стоимость хранения пуповинной крови является единственной причиной, по которой они этого не делают. Большинство банков пуповинной крови взимают предоплату за сбор, обработку и криоконсервацию пуповинной крови, которая составляет от 1000 до 2000 долларов. Этот авансовый платеж часто также включает стоимость комплекта для сбора и безопасной перевозки пуповинной крови, услуги медицинской курьерской службы, используемой для ускорения безопасной доставки комплекта, тестирование крови матери на любые инфекционные заболевания, анализ крови ребенка. при любом загрязнении и стоимости первого полного года хранения.Затем в день рождения ребенка часто взимается ежегодная плата за постоянное хранение, которая составляет от 100 до 200 долларов в год.
В Cryo-Cell мы стремимся дать всем родителям возможность хранить пуповинную кровь своих младенцев для будущего здоровья их семей. Мы предлагаем специальные скидки и предложения для многоплодных детей, постоянных клиентов, рефералов, семей военнослужащих, медицинских работников, долгосрочных планов с предоплатой хранения и многого другого. Кроме того, у нас есть варианты внутреннего финансирования, которые начинаются всего с нескольких долларов в день, чтобы сделать банк пуповинной крови доступным для всех.Посмотреть, сколько стоит хранение пуповинной крови в Cryo-Cell, можно здесь.
Как работает банк пуповинной крови?
Хотя хранение пуповинной крови — это новый опыт для многих родителей, это очень просто. В конце концов, большинство матерей беспокоятся о том, как пройдут роды, и не хотят также беспокоиться о деталях сбора, обработки и криоконсервации пуповинной крови своего ребенка. К счастью, медицинский работник и банк пуповинной крови делают большую часть работы. Вот шаги, которые можно найти в банке пуповинной крови:
- Банк пуповинной крови отправит вам набор для сбора.Такие наборы, как наш, просто необходимо хранить при комнатной температуре.
- Набор для сбора пуповинной крови отправляется с будущими родителями в родильный дом.
- При поступлении кровь матери собирается для тестирования на наличие инфекционных заболеваний в соответствии с федеральными постановлениями.
- При рождении, но до выхода плаценты врач пережимает и перерезает пуповину как обычно.
- В пуповине и плаценте осталось ок.40–120 миллилитров пуповинной крови. Лечащий врач извлечет пуповинную кровь из пуповины без риска и вреда для ребенка или матери.
- Мешок для сбора пуповинной крови ребенка и флаконы с кровью матери снова помещаются в набор для сбора.
- Родители звонят по бесплатному номеру набора для забора крови, чтобы медицинский курьер в любое время, 24 часа в сутки, семь дней в неделю мог организовать транспортировку этого набора в банк пуповинной крови.
Это упрощенная версия операций по созданию банка пуповинной крови.Для более подробного обзора вы можете прочитать больше о шагах по созданию банка пуповинной крови здесь.
Обработка и криоконсервация
Банковское дело начинается с набора для сбора пуповинной крови и пуповинной ткани.Когда медицинский курьер доставляет набор для сбора пуповинной крови в банк пуповинной крови, он быстро обрабатывается, чтобы обеспечить постоянную жизнеспособность стволовых клеток и клеток иммунной системы, обнаруженных в пуповинной крови. Сначала образец пуповинной крови проверяется на микробиологическое загрязнение, а кровь матери проверяется на инфекционные заболевания.Во время проведения этих тестов пуповинная кровь обрабатывается для уменьшения количества красных кровяных телец и их общего объема, а также для выделения стволовых и иммунных клеток.
Банк пуповинной крови может использовать ряд различных методов обработки, и метод обработки может в конечном итоге повлиять на чистоту конечного продукта, что мы объясним через минуту. После того, как стволовые клетки и клетки иммунной системы были изолированы и извлечены из плазмы и красных кровяных телец, они смешиваются с криопротектором и хранятся в криопакете.Мы оборачиваем наши пакеты для дополнительной защиты и используем метод, называемый «замораживание с контролируемой скоростью», чтобы подготовить клетки к долгосрочному хранению. Обернутый крио-мешок помещается в защитную металлическую кассету и помещается в морозильную камеру с жидким азотом для паровой фазы для длительного хранения.
Как уже отмечалось, существуют разные способы обработки пуповинной крови, и хотя тип метода обработки не всегда входит в разговор о банках пуповинной крови, это большая часть чистоты любого сбора пуповинной крови.Красные кровяные тельца могут оказать негативное влияние на переливание пуповинной крови. Кроме того, для того, чтобы пуповинная кровь была эффективной при лечении заболеваний, необходимо присутствие определенного количества стволовых клеток. Каждый метод обработки позволяет лучше уменьшить количество эритроцитов и захватить больше стволовых клеток. Некоторые методы обработки, такие как AutoXpress и Sepax, автоматизированы для обеспечения согласованности всех коллекций. Некоторые банки предпочитают HES, потому что это был исходный метод обработки, используемый большинством банков, и он имеет подтвержденную репутацию.Вы можете узнать больше о различных методах обработки пуповинной крови здесь.
Обработка пуповинной крови высшего качества: PrepaCyte®-CB
По производительности наш метод обработки PrepaCyte-CB стал лидером. PrepaCyte-CB значительно увеличивает рентабельность инвестиций родителей, поскольку дает наибольшее количество стволовых клеток при наибольшем снижении количества эритроцитов. 1–4 Клинические данные по трансплантации показывают, что пуповинная кровь обрабатывалась с помощью трансплантатов PrepaCyte-CB быстрее, чем другие методы обработки. 7 Это означает, что пациенты могут быстрее почувствовать себя лучше, будут меньше времени проводить в больнице и с меньшей вероятностью будут страдать от инфекции. Возможность более быстрого выздоровления и снижение вероятности заражения могут оказаться жизненно важными в определенных случаях. Узнайте больше о PrepaCyte®-CB здесь.
Что делать, если вы хотите отсрочить пережатие пуповины?
Родители, которые принимают решение хранить пуповинную кровь и ткань своего ребенка, думают о будущем, желая сделать это с самого начала (даже до начала) и предпринимают шаги, чтобы сделать все возможное, чтобы защитить своего ребенка в будущем.Сегодня многие сознательные родители также рассматривают возможность отсроченного пережатия пуповины (DCC), практики, при которой пуповина переживается не сразу, а после того, как она продолжает пульсировать в среднем от 30 до 180 секунд. Многие родители не осознают, что они могут отложить пережатие пуповины и при этом сохранить пуповинную кровь своего ребенка. Как уже отмечалось ранее, наш первоклассный метод обработки PrepaCyte-CB способен захватить больше клеток иммунной системы и уменьшить наибольшее количество контаминантов эритроцитов.Благодаря этому он идет рука об руку с отсроченным зажимом шнура, потому что на него меньше влияет объем, эффективно компенсируя меньшее количество с превосходным качеством. Вы можете узнать больше об отсроченном пережатии пуповинной крови по сравнению с сохранением пуповинной крови здесь.
Что в пуповинной крови?
Стволовая клетка может стать одной из многих различных клеток.Сохраненная пуповинная кровь наиболее богата лейкоцитами и стволовыми клетками. Хотя стволовым клеткам уделяется большое внимание, общее количество ядерных клеток (TNC) примерно в 10 раз превышает количество стволовых клеток в любом заборе пуповинной крови.TNC — это в основном белые кровяные тельца или лейкоциты; они клетки иммунной системы, которые защищают тело. Несмотря на то, что стволовые клетки составляют одну десятую большинства коллекций, пуповинная кровь по-прежнему считается богатым источником гемопоэтических (гемопоэтических) стволовых клеток (HSC). HSC часто обозначают маркером CD34 +. Гематопоэтические стволовые клетки могут делиться на две категории клеток: миелоидные и лимфоидные клетки. Миелоидные клетки продолжают формировать ваши эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови.Лимфоидные клетки становятся В-клетками и Т-клетками и являются основой иммунной системы. Пуповинная кровь также содержит мезенхимальные (мех-сен-ки-мальные) стволовые клетки (МСК), но их гораздо больше в пуповинной ткани, о чем мы поговорим через минуту.
Помимо стволовых клеток, исследователи открывают для себя особые возможности использования других типов клеток при лечении определенных состояний. Treg-клетки пуповинной крови обладают потенциалом для предотвращения реакции «трансплантат против хозяина» при трансплантации стволовых клеток и смягчения последствий аутоиммунных заболеваний, таких как диабет, ревматоидный артрит и рассеянный склероз.Естественные клетки-киллеры пуповинной крови также имеют потенциал в будущем. Эти клетки были запрограммированы на конкретные виды рака и опухоли в клинических испытаниях. Это может сделать их исключительно сильными кандидатами на лечение хронических или устойчивых к лечению случаев рака.
Еще один способ, которым ученые работают со стволовыми клетками, — это технологии распространения, которые стимулируют репликацию стволовых клеток пуповинной крови. Если они будут эффективны и одобрены Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США, эти технологии расширения позволят ученым культивировать множество стволовых клеток из небольшого образца.Это могло бы предоставить врачам и исследователям достаточно стволовых клеток для лечения нескольких членов семьи с помощью одного сбора пуповинной крови или обеспечить ребенку несколько курсов лечения с течением времени. Чтобы лучше подготовиться к тому дню, когда эти технологии расширения станут более доступными, некоторые банки пуповинной крови начали разделять свои коллекции пуповинной крови на отдельные отделения, которые можно легко отделить от остальной коллекции и использовать независимо. Вы можете узнать больше о пятикамерной сумке для хранения Cryo-Cell здесь.
Так как же пуповинная кровь по сравнению с пуповинной тканью?
Пуповинная кровь содержит мезенхимальные стволовые клетки, но в гораздо большем количестве гематопоэтических стволовых клеток. С другой стороны, пуповинная ткань содержит некоторые гемопоэтические стволовые клетки, но гораздо богаче мезенхимальными стволовыми клетками. Пуповинная ткань, или желе Уортона, представляет собой защитный слой, покрывающий вену пуповины и другие сосуды. Его МСК могут стать хозяином клеток, в том числе клеток нервной системы, органов чувств, тканей кровообращения, кожи, костей, хрящей и т. Д.МСК в настоящее время проходят клинические испытания при спортивных травмах, заболеваниях сердца и почек, БАС, заживлении ран и аутоиммунных заболеваниях. Как и пуповинная кровь, пуповинная ткань легко собирается при рождении и имеет большой потенциал в регенеративной медицине. Узнайте больше о банке пуповинной ткани здесь.
Альтернативы банкам пуповинной крови
Костный мозг и другие источники
Если у кого-то не хранится пуповинная кровь, ему придется полагаться на стволовые клетки из другого источника.Для этого мы можем вернуться к истории пуповинной крови, которая на самом деле начинается с костного мозга. Костный мозг содержит аналогичные, хотя и менее эффективные и, возможно, испорченные версии тех же стволовых клеток, которых много в пуповинной крови. Ученые провели первую трансплантацию стволовых клеток костного мозга в 1956 году между однояйцевыми близнецами. Это привело к полной ремиссии лейкемии у одного из близнецов.
Из-за инвазивной процедуры, необходимой для получения костного мозга, ученые продолжали искать лучший источник, что в конечном итоге привело к открытию подобных стволовых клеток в пуповинной крови в 1978 году.Пуповинная кровь была использована при первой трансплантации в 1988 году, и с тех пор было показано, что пуповинная кровь более выгодна, чем другие способы получения аналогичных стволовых клеток и клеток иммунной системы. Это связано с тем, что пуповинную кровь можно считать наивной и незрелой по сравнению с другими источниками. Пуповинная кровь не подвергается воздействию болезней или загрязнителей окружающей среды, и она более восприимчива к чужеродным клеткам. В этом случае неопытность делает его сильнее.
Как отмечалось ранее, при лучшем сопоставлении больше шансов на успех и меньше риск болезни «трансплантат против хозяина» (GvHD) при любой трансплантации стволовых клеток.С пуповинной кровью собственные клетки ребенка всегда идеально подходят и несут небольшой риск. При использовании пуповинной крови у однояйцевых близнецов также очень низкая вероятность РТПХ, хотя могут возникать мутации и биологические изменения, вызванные эпигенетическими факторами. У других родственников, связанных с кровью, вероятность развития РТПХ составляет 35–45%, а у лиц, не являющихся родственниками, вероятность заболевания РТПХ составляет 60–80%.
Костный мозг и аналогичные источники часто требуют инвазивной хирургической процедуры, и его собственные стволовые клетки, возможно, уже заболели, что означает, что пациенту придется искать подходящие стволовые клетки от другого члена семьи или неродственного донора.Это увеличит риск РТПХ. Кроме того, найти неродственного совпадающего донора может быть сложно, и после того, как совпадение установлено, на его поиск могут уйти ценные недели, даже месяцы. Узнайте больше о том, почему пуповинная кровь предпочтительнее другого лучшего источника — костного мозга.
Государственные банки пуповинной крови
Первые банки пуповинной крови были частными банками пуповинной крови. Фактически, Cryo-Cell — это первый в мире частный банк пуповинной крови. Только позже правительство осознало необходимость сохранения пуповинной крови для исследований и общественного благосостояния.В результате 31 штат принял закон или часть ожидающего решения закона, который требует или поощряет акушерства информировать будущих родителей о банках пуповинной крови, и во многих штатах теперь есть публичные банки пуповинной крови. В результате у родителей есть возможность хранить пуповинную кровь своего ребенка в частном порядке для исключительного использования ребенком и остальной семьей или сдавать пуповинную кровь в государственный банк, чтобы ее можно было использовать в исследованиях или любым пациентом, который Подходит и в нужде.
Если вы хотите получить пуповинную кровь в общественном банке, имейте в виду, что подобранную пуповинную кровь, как и костный мозг, может быть трудно получить через общественный банк пуповинной крови.После того, как совпадение установлено, на его получение могут уйти ценные недели, даже месяцы, а стоимость получения пуповинной крови в государственном банке может превышать 40 000 долларов. Когда пуповинная кровь новорожденного хранится в частном порядке, ее можно получить быстро, а поскольку пуповинная кровь принадлежит родителям, банки могут выполнять извлечение бесплатно. Узнайте больше о государственных и частных банках пуповинной крови здесь.
Часто задаваемые вопросы
Хотите узнать больше? Мы здесь, чтобы ответить на любой вопрос, который может у вас возникнуть, и можем выслать вам любую информацию о банке пуповинной крови, которая вам нужна.
Для того, чтобы сохранить больше типов и количества стволовых клеток пуповины и максимально увеличить возможные варианты здоровья в будущем, служба тканей пуповины Cryo-Cell предоставляет будущим семьям возможность криогенно хранить клетки ткани пуповины своего новорожденного, содержащиеся в практически неповрежденной ткани пуповины . Если клетки ткани пуповины будут рассмотрены для потенциального использования в будущем терапевтическом применении, может потребоваться дальнейшая лабораторная обработка.Что касается ткани пуповины, то вся деятельность частных банков крови для жителей штата Нью-Йорк ограничивается сбором, обработкой и долгосрочным хранением стволовых клеток ткани пуповины. Наличие лицензии штата Нью-Йорк на такой сбор, обработку и долгосрочное хранение не означает одобрения или одобрения возможного будущего использования или будущей пригодности этих ячеек.
Пуповинная кровь: что нужно знать
Español
июль — Национальный месяц осведомленности о пуповинной крови, и это идеальное время, чтобы узнать больше о пуповинной крови — биологическом продукте, регулируемом Управлением по контролю за продуктами и лекарствами.Пуповинная кровь, обнаруженная в кровеносных сосудах плаценты и пуповине, собирается после рождения ребенка и после перерезания пуповины — важный момент.
«Поскольку пуповинную кровь обычно собирают после родов и перерезания пуповины, процедура в целом безопасна для матери и ребенка», — объясняет Кейт Воннакотт, доктор философии, руководитель отделения клеточной терапии в Управлении по контролю за продуктами и лекарствами США. Клеточная, тканевая и генная терапия.
Утвержденное использование
Пуповинная кровь разрешена только для использования в процедурах «трансплантации гемопоэтических стволовых клеток», которые выполняются пациентам с нарушениями кроветворной (кроветворной) системы.Пуповинная кровь содержит кроветворные стволовые клетки, которые можно использовать для лечения пациентов с раком крови, таких как лейкемии и лимфомы, а также с некоторыми заболеваниями крови и иммунной системы, такими как серповидно-клеточная анемия и синдром Вискотта-Олдрича.
«Пуповинная кровь полезна, потому что это источник стволовых клеток, которые превращаются в клетки крови. Пуповинная кровь может использоваться для трансплантации людям, которые нуждаются в регенерации, то есть «повторном росте» этих кроветворных клеток », — говорит Воннакотт.
Например, у многих онкологических больных болезнь обнаруживается в клетках крови. Химиотерапевтическое лечение этих пациентов убивает как раковые клетки, так и здоровые кроветворные стволовые клетки. Пересаженные стволовые клетки из пуповинной крови могут помочь восстановить здоровые клетки крови после химиотерапии.
Однако пуповинная кровь — не панацея.
«Поскольку пуповинная кровь содержит стволовые клетки, были случаи мошенничества со стволовыми клетками, связанные с пуповинной кровью», — говорит Воннакотт. «Потребители могут думать, что стволовые клетки могут вылечить любую болезнь, но наука не доказывает, что это так.Пациенты должны быть скептически настроены, если пуповинная кровь продвигается не для регенерации стволовых клеток крови ».
О банках пуповинной крови
После сбора пуповинной крови ее замораживают, и ее можно безопасно хранить в течение многих лет. «Метод замораживания, называемый« криоконсервация », очень важен для поддержания целостности клеток», — говорит Воннакотт. «Пуповинную кровь нужно хранить осторожно».
Вы можете хранить пуповинную кровь вашего ребенка в частном банке, чтобы в будущем она могла быть доступна вашему ребенку или родственникам первой или второй степени родства.Частные банки пуповинной крови обычно взимают плату за сбор и хранение крови.
Или вы можете сдать пуповинную кровь в общественный банк, чтобы врачи могли использовать ее для пациента, которому требуется трансплантация гемопоэтических стволовых клеток.
FDA регулирует пуповинную кровь по-разному, в зависимости от источника, уровня обработки и предполагаемого использования.
Пуповинная кровь, хранящаяся для личного пользования, для использования у родственников первой или второй степени родства, а также отвечающая другим критериям в правилах FDA, не требует одобрения агентства перед использованием.Частные банки пуповинной крови должны по-прежнему соответствовать другим требованиям FDA, включая регистрацию и внесение в список учреждений, действующие правила надлежащей практики использования тканей, а также скрининг и тестирование доноров на инфекционные заболевания (кроме случаев, когда пуповинная кровь используется для первоначального донора). Эти требования FDA обеспечивают безопасность этих продуктов, сводя к минимуму риск заражения и передачи инфекционных заболеваний.
Пуповинная кровь, хранящаяся для использования пациентом, не связанным с донором, соответствует юридическим определениям как «лекарственного средства», так и «биологического продукта».«Пуповинная кровь в этой категории должна соответствовать дополнительным требованиям и иметь лицензию в соответствии с заявкой на получение лицензии на биологический препарат или быть предметом заявки на исследуемый новый лекарственный препарат перед использованием. Требования FDA помогают гарантировать, что эти продукты безопасны и эффективны для предполагаемого использования.
Не каждая единица пуповинной крови будет соответствовать требованиям государственных банков, добавляет Сафа Карандиш, M.T., сотрудник FDA по безопасности потребителей. Если это произойдет, часть этой донорской пуповинной крови может быть использована для доклинических исследований.
Советы для потребителей
Если вы планируете сдать кровь в банк пуповинной крови, вам следует изучить возможные варианты во время беременности, чтобы иметь достаточно времени для принятия решения до рождения ребенка. Что касается государственного банковского обслуживания, спросите, участвует ли ваша родильная больница в программе банка пуповинной крови.
Если у вас есть вопросы о процедурах и рисках сбора пожертвований или о процессе пожертвования, обратитесь к своему врачу.
FDA также предлагает базу данных с возможностью поиска, в которой хранится информация о зарегистрированных банках пуповинной крови.
Скептически относитесь к утверждениям, что пуповинная кровь — это чудодейственное средство — это не так. Некоторые родители могут рассмотреть возможность использования частного банка как формы «страховки» от болезней в будущем. Но помните, что в настоящее время разрешено использовать только пуповинную кровь для лечения заболеваний, связанных с кровью.
Также знайте, что в некоторых случаях хранимая вами пуповинная кровь может не подходить для использования у ребенка, который ее сдал. «Например, вы не можете вылечить некоторые заболевания или генетические дефекты с помощью пуповинной крови, содержащей то же заболевание или дефект», — говорит Карандиш.
Родители из этнических меньшинств могут особенно захотеть рассмотреть вопрос о пожертвовании в государственный банк, говорит Воннакотт, потому что больше пожертвований от этих групп населения поможет большему количеству пациентов из числа меньшинств, которым нужна трансплантация стволовых клеток. (Получатели должны быть «сопоставлены» с донорами, чтобы врачи с большей вероятностью могли найти подходящих доноров из этнической группы получателя.)
«Когда дело доходит до государственных банковских услуг, потребность в пуповинной крови доказана, — говорит Воннакотт. «И есть потребность в трансплантации стволовых клеток, особенно среди меньшинств.Пуповинная кровь — отличный источник для трансплантации стволовых клеток ».
И эти трансплантаты могут изменить жизнь пациентов.
к началу
Криоконсервация стволовых клеток пуповинной крови вашего ребенка
Опубликовано:
Мы знаем, что пуповина — богатый источник стволовых клеток. Благодаря криоконсервации образца стволовых клеток вашего ребенка компания Cells for Life гарантирует высочайшее качество услуг по хранению пуповинной крови.
Стволовые клетки пуповинной крови получают из крови, остающейся в пуповине и плаценте после перерезания пуповины при рождении ребенка. Пуповинная кровь собирается врачом и отправляется в лабораторию, где стволовые клетки извлекаются из красных и белых кровяных телец и тромбоцитов.
Криоконсервирующие стволовые клеткиЗатем стволовые клетки замораживают и хранят или криоконсервируют в резервуаре с жидким азотом. Образцы хранятся при -190 ° C или ниже в паровой фазе жидкого азота, что было определено как очень безопасный способ хранения ваших образцов.Эти стволовые клетки можно разморозить и перелить внутривенно (путем в / в) пациенту, нуждающемуся в лечении стволовыми клетками. Стволовые клетки пуповинной крови в настоящее время используются для лечения самых разных заболеваний.
Обязательство «Ячейки для качества жизни»Наша лаборатория обработки и криоконсервации в больнице общего профиля Торонто работает 365 дней в году. Мы используем сложное оборудование, которое было тщательно проверено и выбрано для обеспечения высококачественных результатов.
В сотрудничестве с Core CyroLab мы были первым банком пуповинной крови в Онтарио, получившим аккредитацию AABB, и вторым, получившим аккредитацию FACT в 2012 году.
В нашем биохранилище можно хранить более 125 000 образцов пуповинной крови. Наши клиенты уверены, что их ценные биологические образцы хранятся безопасно и надежно. Помещение всегда закрыто, и никому не разрешается входить на территорию без сопровождения сотрудника. Резервуары для хранения контролируются 24 часа в сутки, 7 дней в неделю, 365 дней в году, чтобы гарантировать, что температура никогда не выходит за допустимые пределы. Мы также подключены к сети аварийного питания UHN, поэтому перебои в подаче электроэнергии не повлияют на сохранность образцов.В случае стихийного бедствия у нас есть планы по безопасной эвакуации образцов.
Срок хранения пуповинной кровиУченые сообщили, что криогенно консервированные клетки могут храниться в течение длительного времени, и это относится также к замороженной пуповинной крови. Это подтверждается двумя ключевыми фактами:
- Стволовые клетки пуповинной крови хранятся при температуре -190 ° C или ниже, когда биологическая активность прекращается.
- Другие типы клеток и сперматозоиды хранились более 50 лет и оставались жизнеспособными при оттаивании.
Теги: пуповинная кровь банк криоконсервация криоконсервация стволовые клетки
[Полный текст] Долгосрочное замороженное хранение стволовых клеток: проблемы и решения
1 Биорепозиторий медицинских наук Университета Аризоны, 2 Департамент иммунологии, 3 Отдел трансляционной медицины, 4 Лаборатория GMP, Университет Аризоны, Тусон, 5 Celebration Центр стволовых клеток, Гилберт, Аризона, США
Резюме: Стволовые клетки обнаружены во всех многоклеточных организмах и определяются как клетки, которые могут дифференцироваться в специализированные зрелые клетки, а также делиться на них. производить больше стволовых клеток.Стволовые клетки обычно собирают для клинических и исследовательских целей из костного мозга, периферической крови, пуповинной крови и ткани, а также жировой ткани. Эти участки легко доступны, экономичны для сбора и содержат большое количество стволовых клеток. Появление современной технологии криоконсервации ввело концепцию сбора и сохранения стволовых клеток для будущего использования, чтобы избежать проблем с истощением доноров. Крупномасштабное банковское дело стволовых клеток действительно началось в 1990-х годах с создания банков пуповинной крови, которые постепенно расширились, включив пуповинную ткань и, наконец, жировую ткань.Накопленные стволовые клетки любого происхождения не только используются для исследований, но и обычно используются для клинических применений, включая трансплантацию и регенеративную медицину. Многие из этих источников стволовых клеток были использованы после криоконсервации, что и является предметом настоящего обзора. Часто стволовые клетки хранятся в течение различных периодов времени, которые могут варьироваться от недель до лет (даже десятилетий), и часто хранятся в нескольких аликвотах (которые могут различаться по размеру), чтобы сделать образцы стволовых клеток более пригодными для многократного использования.Эти усилия требуют значительных затрат времени и денег, поскольку они могут напрямую повлиять на безопасность пациентов. У каждого источника стволовых клеток есть свои особые проблемы, хотя есть некоторые совпадения, требующие своих особых требований для достижения решения. В этом обзоре будут рассмотрены проблемы и уникальные требования, связанные со сбором, обработкой, криоконсервацией, хранением, оттаиванием и контролем качества для каждого из наиболее часто используемых источников стволовых клеток (костный мозг, пуповинная кровь, мобилизованные стволовые клетки периферической крови, пуповинная ткань, и жировая ткань).
Введение
Стволовые клетки обнаружены во всех многоклеточных организмах и определяются как клетки, которые могут дифференцироваться в специализированные зрелые клетки, а также делиться для производства большего количества стволовых клеток. Стволовые клетки можно разделить на эмбриональные / фетальные стволовые клетки и взрослые стволовые клетки в зависимости от их происхождения. Стволовые клетки можно далее классифицировать как тотипотентные, способные давать начало всем тканям в организме, включая сам организм; как плюрипотентность, способная давать начало множеству ветвей тканей и клеток из разных зародышевых линий; как мультипотенциальные, которые могут давать начало различным типам клеток, как правило, в пределах одной и той же зародышевой линии; и как клетки-предшественники, которые дают только более ограниченные по клону клетки и ткани из одного происхождения зародышевого листка.Гематопоэтические стволовые клетки (HSC) были впервые предложены и позже охарактеризованы Till and McCulloch 1-2 на основе работы, выполненной в начале 1950-х и 1960-х годов. HSC были определены как мультипотенциальные клетки, способные давать начало не только каждому клону гемопоэтических клеток в организме (например, моноцитам, тромбоцитам, эритроцитам [эритроцитам] и лимфоцитам), но также и дополнительным HSC, которые могут обеспечивать непрерывное производство клеток крови сверх течение жизни человека (определяемое как кроветворение).Частично основанные на этих основополагающих открытиях и осознании того, что HSC могут быть получены из длинных костей тела без неблагоприятных последствий для донора, HSC были клинически использованы E Donnell Thomas в Нью-Йорке в 1957 году для первого (сингенного) костного мозга. трансплантат (BMT) для лечения больного раком с использованием HSC костного мозга (BM) от идентичного близнеца, 3 , за которым последовала работа RA Good из Университета Миннесоты с использованием HSC в первом аллогенном (родственном) BMT для доброкачественного состояние в 1968 году. 4 HSC с тех пор имеют долгую историю клинического использования. Дополнительный успешный ТКМ привел к созданию Национальной программы доноров костного мозга в середине 1980-х годов с целью облегчить увеличение числа процедур ТКМ и стандартизировать процедуру сопоставления донора / пациента. Национальная программа доноров костного мозга служит каналом для сопоставления доноров костного мозга с нуждающимися пациентами, но не собирает и не хранит HSC (все сопоставление выполняется в электронном виде, и при необходимости доноры направляются в медицинские центры для сбора HSC).Появление современной технологии криоконсервации в 1980-х годах представило концепцию сбора и хранения HSC для будущего использования, чтобы избежать проблем с оттоком доноров, которые преследовали Национальную программу донорства костного мозга с момента ее создания. Однако только в начале 1990-х гг. Банкинг HSC в форме банка пуповинной крови (CB) начал реализовываться в ответ на первую успешную трансплантацию CB ребенку с анемией Фанкони в 1988 году. 5 Коммерциализация этого Эти усилия быстро последовали: первый семейный CB-банк был создан в Университете Аризоны в 1992 году (который позже стал Регистром пуповинной крови 6 ), а первый публичный CB-банк был создан 6 месяцев спустя в Нью-Йоркском центре крови (также в 1992 году). 7 ).Оба этих первых банка ЦБ существуют и сегодня (что не всегда было верным для других банков ЦБ) и являются крупнейшими банками ЦБ в своем роде (более 600 000 и 200 000 образцов соответственно). Банковские услуги CB упрощают поиск доноров HSC в случае необходимости, предотвращают истощение доноров и сокращают общие расходы на здравоохранение. С момента его первого клинического использования в 1988 году и с момента создания CB Banking в 1992 году образцы CB из банка были использованы в более чем 35000 трансплантациях CB по состоянию на 2015 год. 8 Однако, учитывая, что во всем мире хранится более 5 миллионов образцов CB, общий уровень его использования низкий (когда-либо использовалось <1% образцов из банка). К счастью, в то время, когда трансплантация CB была интегрирована в рутинную терапию BMT, было замечено, что нервные клетки донорского происхождения присутствовали в мозге пациентов после трансплантации после вскрытия. Эти наблюдения привели к предположению, что HSCs могут быть способны давать начало (хотя и в небольшом количестве) клеткам и тканям за пределами нормального зародышевого клона HSC. 9 То есть нервная система происходит из зародышевого листка эктодермы, тогда как HSC происходят из зародышевого листка энтодермы. Также в это время были обнаружены и охарактеризованы эмбриональные стволовые клетки исследователями из Университета Висконсина, 10 , которые выдвинули гипотезу, что эти стволовые клетки могут быть использованы для лечения целого ряда заболеваний путем их использования в клеточной терапии, что привело к возникновению области тканевой инженерии и регенеративной медицины. Это было незадолго до того, как исследователи из Университета Дьюка и других 11,12 исследовали, можно ли использовать HSC для этих типов клинических применений.Основываясь на простоте и стоимости приобретения, HSC, полученные из CB, были одними из первых источников стволовых клеток, которые были проанализированы. Однако стволовые клетки, полученные из BM, как HSC, так и мезенхимальные стромальные клетки (MSC), также были исследованы как другие источники MSC, такие как ткань пуповины (CT) и жировая ткань (AT). Как и в случае с образцами стволовых клеток, хранящимися в банках CB, многие из этих источников стволовых клеток были использованы после криоконсервации, что является предметом данного обзора. Часто стволовые клетки хранятся в течение различных периодов времени, которые могут варьироваться от недель до лет (даже десятилетий), и часто хранятся в нескольких аликвотах (которые могут различаться по размеру), чтобы сделать образцы стволовых клеток более пригодными для различных целей.Эти особые требования сопряжены со своими проблемами и потребовали уникальных и новаторских решений. И учреждение, хранящее стволовые клетки, и конечный пользователь стволовых клеток (и, соответственно, пациент) должны быть уверены, что замороженный образец стволовых клеток после размораживания и использования будет действовать так же, как и свежеполученные клетки, независимо от длины. времени в замороженном хранилище. Эти усилия требуют не только значительных затрат времени и денег, но и риску для здоровья и жизни пациентов, если эти процедуры выполняются ненадлежащим образом.У каждого источника стволовых клеток есть свои особые проблемы, хотя есть некоторые совпадения, требующие своих особых требований для достижения решения. В этом обзоре будут рассмотрены проблемы и уникальные требования, связанные с сбором: обработка, криоконсервация, хранение, оттаивание и контроль качества для каждого из наиболее часто используемых источников стволовых клеток (BM, CB, мобилизованные стволовые клетки периферической крови [PBSC], CT , и AT).
Источники стволовых клеток
Костный мозг
Получение клинически значимого количества стволовых клеток (как HSC, так и MSC) из BM требует хирургического сбора больших объемов донорского костного мозга (аутологичного или аллогенного), как правило, в диапазоне 1000-1500 куб.см (во избежание манипуляций / размножения in vitro. до использования).Хирургическая процедура требует общей анестезии с некоторыми сопутствующими рисками заболеваемости (и даже смертности), что приводит к увеличению затрат (до 30 000 долларов и более). HSC составляют <0,001% от общего количества ядерных клеток (TNC) в BM, тогда как MSC составляют <0,05% от TNC. 13 Хотя МСК могут быть увеличены in vitro, 14 HSC не могут в значительной степени и не без значительных затрат времени и усилий, 15–16 и всегда есть опасения по поводу индуцированного расширением клеточного старения. 17 Из-за метода сбора образцов существует значительная контаминация образцов эритроцитами, которые необходимо удалить, а также физические ограничения, связанные с криоконсервированием таких больших объемов. 18 Обычно BM используется для трансплантации стволовых клеток без хранения в замороженном состоянии, хотя иногда он может быть помещен в краткосрочную криоконсервацию в качестве резервной копии аплазии, иногда связанной с химиотерапией или неудачей приживления. Однако с началом терапии регенеративной медицины MSC, полученной из КМ, обработанный КМ сейчас замораживается, по крайней мере, на короткий срок, для тех приложений, которые могут потребовать доступа к нескольким аликвотам стволовых клеток для многократного лечения.
Периферическая кровь
Клиническое использование цитокинов, факторов, стимулирующих колонии (CSF) гранулоцитов (G) и гранулоцитов-монцитов (GM), показало, что эти цитокины не только стимулируют выработку нейтрофилов у пациентов с лейкопенией, вызванной различными причинами, но и одновременно мобилизовали HSC в периферическое кровообращение, где клетки могли быть собраны для использования при трансплантации стволовых клеток. 19–20 Обычно HSC не присутствуют в каких-либо клинически полезных количествах в немобилизованных PBSC, но после лечения их количество достигает 0.05% периферических TNC могут быть CD34 + HSC. Вследствие того, как собираются HSC, подавляющее большинство TNC представляют собой PMN, за которыми следуют Т-клетки и эритроциты. Чтобы облегчить создание биобанков, используется уменьшение объема, что обычно означает, что эритроциты истощаются с помощью ряда различных методов. 21–22 Как правило, мобилизованные мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) используются исключительно для процедур трансплантации стволовых клеток и не используются в регенеративной медицине или тканевой инженерии, и поэтому, как и BM, обычно не подвергаются криоконсервации (по крайней мере, в течение какого-либо значительного периода времени). времени).Как и BM, большие объемы (1 л и более) и большое количество клеток (превышающее 10 10 –10 11 TNC) создают уникальные проблемы для биобанков.
Пуповинная кровь
Работа, выполненная в 1980-х годах, показала, что пупочная CB, кровь, оставшаяся в плаценте после рождения ребенка, была богатым источником HSC (0,5–1% мононуклеарных клеток. 23–24 Доклинические исследования наряду с Ранние клинические исследования показали, что CB-HSC можно заменить на BM-HSC для использования в типичных трансплантатах стволовых клеток. 23–24 CB предоставил ученым уникальную возможность нацелить доноров HSC и криоконсервировать пожертвованные биопрепараты без немедленной потребности в образцах. По сути, банковское обслуживание CB было первым значительным шагом на пути к крупномасштабному рутинному хранению стволовых клеток. Кроме того, образцы CB обычно составляют одну десятую размера образцов BM или PBSC (~ 100 куб. См), что упрощает процесс создания биобанков, хотя, как обсуждается в следующем разделе, уменьшение объема обычно выполняется для дальнейшего упрощения процесса с использованием нескольких ручных и автоматизированные процессы. 24–27 За последние 20 лет во всем мире было выполнено более 35 000 трансплантаций CB и собрано и криоконсервировано более 5 миллионов проб CB 8 (http://www.bethematch.org).
Ткань пуповины
Хотя МСК долгое время изучались как клинически значимый источник стволовых клеток 28 (в основном полученные из BM) и широко изучались в различных приложениях регенеративной медицины и тканевой инженерии, 29-30 до недавнего времени пуповина (в частности, желе Уортона, содержащееся в ткани; КТ) сама была признана экономичным и легкодоступным источником большого количества МСК. 31–32 Подобно AT, о чем говорилось в разделе «Жировая ткань», CT представляет уникальные проблемы для биобанков, поскольку это целая ткань, а не суспензия клеток. Хотя ткани можно обрабатывать, как описано в разделе «Жировая ткань», чтобы облегчить процесс криоконсервации, при этом возникают дополнительные регуляторные проблемы, которые необходимо решать. Однако, поскольку он является одним из самых молодых доступных источников МСК (подобно CB-HSC), его включение в любую программу банка стволовых клеток имеет смысл.
Жировая ткань
Исследования, проведенные за последнее десятилетие, продемонстрировали, что подкожный AT — самый богатый источник МСК в организме человека, содержащий в 100–1000 раз больше МСК / г или куб.см либо BM, либо CT. 33–34 Фактически, до 1% всех TNC, содержащихся в AT, могут быть MSC. 33–34 AT-MSC были в центре внимания сотен клинических испытаний, и сотни (если не тысячи) пациентов прошли лечение с использованием AT-MSC, что демонстрирует их важность для любых усилий по созданию биобанков стволовых клеток.Однако, как и CT, AT — это ткань, а не клеточная суспензия, что создает уникальные ограничения для ее накопления. Фактически, липоаспират, который часто является отправной точкой для сбора AT-MSC, представляет собой вязкую гелеобразную ткань, с которой трудно манипулировать даже при комнатной температуре. Хотя липоаспират может перевариваться / обрабатываться аналогично AT, такая процедура обязательно потребует введения дополнительных и несколько обременительных нормативных требований. Физические характеристики биопрепаратов также предъявляют особые требования при размораживании, промывании и клиническом использовании образца из банка.
Сбор стволовых клеток
По возможности желательно использовать закрытую и стерильную систему для коллекций стволовых клеток, что упрощает многие нормативные требования. Если система сбора также может использоваться для процедур обработки (включая криоконсервацию), она становится еще более привлекательной для пользователя. Наконец, поскольку большинство сборов стволовых клеток будет выполняться клиницистами, которые могут иметь или не иметь обширный опыт сбора стволовых клеток, система сбора должна быть простой в использовании без серьезной предварительной подготовки.Хотя все системы сбора стерильны, иногда варианты сбора (закрытые системы, которые просты в эксплуатации) ограничены особенностями источника стволовых клеток, как обсуждается в каждом из следующих разделов.
Костный мозг
ГСК, производные от BM, обычно собирают с помощью хирургической процедуры с использованием больших шприцев в полузакрытой системе. Во время сбора шприц используется для забора костного мозга и крови из большой пазухи бедра и их объединения. Как правило, выполняется 100–200 «вытягиваний» шприца, в результате чего получается 1 000–1 500 см3 крови и костного мозга.Подобные подходы используются для сбора BM-MSC, хотя объем сбора редко превышает 200 куб.см из-за способности легко расширять MSC в культуре.
Мобилизованная периферическая кровь
PBMC собирают с помощью лейкофереза после того, как субъектов лечили в течение 3 дней G-CSF, GM-CSF или другим мобилизующим агентом. То есть субъектов подключают к аппарату на 1-3 дня на несколько часов в день, который удаляет избыток лейкоцитов (включая стволовые клетки) из периферического кровообращения, возвращая эритроциты и плазму обратно донору.Сборы производятся с использованием закрытых систем, которые можно стерильно подключить к закрытым автоматизированным системам обработки. Обычно используются пакеты объемом от 300 до 2000 см 3, и они коммерчески доступны с EDTA или CPD в качестве антикоагулянта.
Пуповинная кровь
Существует несколько вариантов сбора CB. Чаще всего используются пакеты с кровью объемом 300 см3 (содержащие ЭДТА, CPD или гепарин) или шприцы объемом 60 см3, содержащие гепарин.CB уникален тем, что сбор стволовых клеток выполняется акушерами, которые могут иметь небольшую хирургическую подготовку и нуждаются в простых и надежных системах сбора. И пакеты, и шприцы являются закрытыми системами сбора. Пакеты для сбора зависят от силы тяжести для заполнения, в то время как шприцы требуют практического взаимодействия для достижения успеха. Большинство банков стволовых клеток собирают CB с использованием метода мешка, хотя многие банки CB также используют подход шприца из-за его экономичности (покупка шприца стоит копейки). Оба подхода обычно собирают ~ 100 см3 CB, который обычно является стерильным и клинически полезным.Большинство учреждений предоставляют своим акушерам специально разработанные комплекты для забора крови, которые являются стерильными и содержат все необходимые условия для успешного забора (рис. 1).
Рис. 1 Типичный набор для сбора стволовых клеток (пуповинная кровь) и транспортировочный контейнер. Примечания: Стерильный пакет для сбора, содержащий мешок для сбора (A) и необходимое оборудование, необходимое для сбора и транспортировки коллекции пуповинной крови (B) |
Пуповинная ткань
Коллекция CT — недавняя разработка в области стволовых клеток.По своей природе КТ не стерилен (по крайней мере, снаружи) и не может быть собран в закрытой системе. Обычно акушер перерезает отрезок пуповины от 6 до 10 дюймов после рождения ребенка и его перевязки. Затем сегмент пуповины помещают в стерильную чашку с крышкой (например, чашку для образца мочи), которая содержит транспортный буфер (а также антибиотики и противогрибковые препараты). Необходимо следить за тем, чтобы CT не подвергался чрезмерному воздействию воздуха и оставался «влажным» (погруженным) во время транспортировки.
Жировая ткань
AT может быть получен либо как побочный продукт процедуры липосакции, либо с помощью независимой автономной процедуры. В обоих подходах используются шприцы (либо большие 60-кубовые шприцы, которые можно подсоединять к канистре для липосакции, либо маленькие 20-кубовые шприцы для ручной процедуры). Обе системы сбора можно считать «закрытыми». Кроме того, при желании шприцы можно стерильно соединить закрытым образом с большими мешками для обработки и хранения (в зависимости от желаемых объемов).В качестве дополнения к процедуре липосакции можно получить несколько литров липоаспирата (хотя большинство банков собирают не более 2000 см3). Как отдельная процедура, выполняемая под местной анестезией, объем урожая обычно не превышает 20–100 куб. См.
После того, как источник стволовых клеток собран, его необходимо доставить на предприятие по переработке, будь то локально или на большие расстояния. Транспортировка обычно осуществляется курьерской службой или сотрудником банковского учреждения (если местный).Необходимо следить за тем, чтобы стволовые клетки не «разливались» во время транспортировки, не подвергались чрезмерным колебаниям температуры и не доставлялись на обработку в течение 24 часов после сбора. Местные поставки обычно осуществляются с использованием холодильников, упакованных блоками «голубого льда». При доставке в ночное время используются специализированные транспортные контейнеры, которые устойчивы к раздавливанию, имеют двойную герметичность и изолированы от перепадов температур. Иногда может быть целесообразно рассмотреть возможность размещения логгеров температуры в транспортных контейнерах для обеспечения жизнеспособности образцов и проверки процедур.
Обработка стволовых клеток
Целью обработки стволовых клеток является уменьшение объема образца и увеличение содержания стволовых клеток / клеток-предшественников при сохранении надежности и производительности. На рисунке 2 показан пример результатов обработки CB. Для разных источников стволовых клеток используются разные подходы.
ПБСК и костный мозг
Рисунок 2 Схематическое изображение результатов обработки пуповинной крови. Сокращения: ДМСО, диметилсульфоксид; RBC, красные кровяные тельца |
И PBMC, и BM обрабатываются одинаково из-за большого объема используемых образцов (∼1–1,5 л). Хотя эти большие объемы можно обрабатывать вручную (например, с использованием градиентов плотности фикола и центрифугирования) для удаления эритроцитов и уменьшения объемов, как правило, это непрактично. Таким образом, для получения стволовых клеток клинически применимых размеров используются почти полностью автоматизированные устройства обработки.К таким устройствам относятся устройства, полученные от Haemonetics, Fenwall, CliniMacs и COBE. Каждая из этих автоматизированных машин работает в замкнутой системе, а конечные продукты одобрены Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для клинического использования.
Пуповинная кровь
Обычно CB обрабатывается в закрытой системе. Существует несколько методов, с помощью которых это можно сделать, включая автоматизированные и ручные подходы. В первые дни банковского обслуживания CB собранные образцы были подготовлены для хранения либо путем истощения плазмы 35 , либо путем обработки Hespan. 36 Оба подхода считаются «открытыми» методами обработки, хотя могут быть предприняты шаги для «закрытия» этих систем. Они также приводят к некоторому уменьшению общего объема образца, хотя истощение плазмы не приводит к удалению эритроцитов, что может быть проблематичным при оттаивании и инфузии образца. Истощение плазмы в основном включает подготовку лейкоцитов, которая может привести к истощению> 90% эритроцитов. Эти проблемы также можно решить, используя среды для разделения плотности, такие как Ficol, 37 , что приводит к> 90% мононуклеарных клеток и восстановлению клеток CD34 + с истощением> 85% эритроцитов.Однако этот подход трудозатратный и довольно дорогостоящий, но проверенный в клинике.
Основной проблемой всех ручных методов является воспроизводимость и пропускная способность. Для решения этих проблем две компании представили автоматизированные устройства обработки CB. Thermogenesis представила платформу AXP для обработки CB, а BioSafe представила метод Sepax для банковского обслуживания CB. Оба метода приводят к получению клеточного продукта размером ~ 20–25 мл, который легко помещается в разделенные на отсеки пакеты, что является экономичным.Однако подход AXP дает продукт с меньшим количеством эритроцитов и большим извлечением TNC, что сравнимо с тем, что наблюдается при подходе Ficol. В таблице 1 представлено сравнение результатов с использованием различных методологий обработки. Оба подхода увеличивают пропускную способность образцов при одновременном снижении затрат на рабочую силу и обеспечивают воспроизводимость, что приводит к повышению надежности.
Следует отметить, что метод истощения плазмы может быть недорого реализован с использованием шприцев, что позволяет создать закрытую систему сбора, обработки и криоконсервации, хотя требуется больше ручного ввода, чем при использовании методологии Sepax.Однако метод шприца стоит около 50 долларов за образец для обработки по сравнению с 2–300 долларов за образец для других подходов.
Таблица 1 Извлечение клеток пуповинной крови с помощью методологии обработки Сокращения: TNC, общая ядросодержащая клетка; МНК, мононуклеарные клетки. |
Ткань пуповины
CT обрабатывается «открытым» способом из-за природы, по которой он собирается, и его структурных компонентов, независимо от того, хранятся ли они в виде цельной ткани или ферментативно переработаны в ее клеточные компоненты (последний подход можно классифицировать как более чем минимально управляемый для регуляции обеспокоенность).Следовательно, необходимы обширные испытания на стерильность (бактериальные, грибковые и микобактериальные). Интересующие стволовые клетки, МСК, находятся внутри СТ (либо в виде периваскулярных клеток, либо содержатся в желе Уортона 31–32 ), и это анатомическое распределение необходимо учитывать при обработке и хранении стволовых клеток. Если попытаться заморозить всю неповрежденную ткань, МСК будут повреждены и не смогут выжить в процессе. Таким образом, необходимо либо тонко измельчить ткань перед криоконсервацией 38 , либо ферментативно переварить ткань, а затем заморозить высвободившиеся МСК, как это обычно делается для суспензии одиночных клеток. 31–32 Тонко измельченная ткань требует медленной инфузии диметилсульфоксида (ДМСО) в течение продолжительных периодов времени, чтобы гарантировать однородное распределение криопротектора по ткани. 39 Изолированные МСК можно заморозить для получения любой одноклеточной суспензии. Однако с любой методологией возникают две проблемы. Если ткань переваривается перед замораживанием, теперь FDA считает, что с ней более чем минимально манипулируют, и для клинического использования требуется новое исследуемое лекарство (IND).Криоконсервированный цельный измельченный CT соответствует нормативному определению минимальных манипуляций, но обычно восстанавливается только ~ 10% исходных клеток, что требует обширного размножения ex vivo перед клиническим использованием (опять же, требуя IND перед клиническим применением). КТ проблемно разморозить, поскольку сама ткань служит стоком для криопротектора ДМСО, что затрудняет полное удаление, что приводит к потере жизнеспособных клеток. Таким образом, КТ является неоптимальным источником стволовых клеток для клинического применения из-за нормативного надзора, необходимого для его использования.
Стволовые клетки жирового происхождения
Стволовые клетки, полученные из жировой ткани, предъявляют особые требования к обработке, поскольку клетки не получают из клеточной суспензии, такой как CB, BM или PBMC, а содержатся в довольно вязкой ткани, состоящей из нескольких типов клеток. Целью обработки является удаление как можно большего количества тумесцентной жидкости вместе с любой загрязняющей кровью, оставляя AT, содержащий МСК, пригодными для немедленной криоконсервации или клинического использования или в качестве источника МСК после ферментативного расщепления.Однако его можно стерильно обрабатывать в закрытой системе, используя как ручные, так и автоматизированные методы. Была разработана методология, позволяющая осуществлять экономичную обработку в закрытой системе, отвечающую требованиям FDA по минимальным манипуляциям с использованием модифицированных шприцев. 40 Автоматизированные подходы к обработке данных можно найти у таких компаний, как BioSafe, GDP Inc., Cytori и American Cryostem. Автоматизированные подходы, как правило, более дороги и требуют покупки оборудования и / или дорогостоящих расходных материалов.Однако эти подходы действительно увеличивают пропускную способность и очень легко воспроизводимы. Кроме того, будучи закрытой системой, эти методики соответствуют правилам FDA и сводят к минимуму риски загрязнения образцов. Все эти системы представляют собой закрытые системы от начала до конца, от сбора до криоконсервации, включая оттаивание образца после хранения. Другое различие между ручными системами и автоматизированными системами заключается в том, что автоматизированные системы производят стромальную сосудистую фракцию после ферментативного расщепления, которой по определению манипулируют и перед клиническим использованием требуется IND от FDA.Ручная система производит «усиленный жир», с которым минимально манипулировать и который можно сразу использовать в косметических и реконструктивных целях или обрабатывать далее в рамках IND для регенеративных медицинских применений.
Методы криоконсервации
Успешное хранение стволовых клеток в долгосрочной перспективе во многом зависит от методологии криоконсервации. Большинство, но не все биобанки, которые замораживают жизнеспособные стволовые клетки, используют морозильники с регулируемой скоростью, доступные от многочисленных коммерческих организаций (например, Custom Biogenic Systems, Thermo-Fisher и Thermogenesis 37 ).Такие устройства обеспечивают контролируемое компьютером точное постепенное снижение температуры, чтобы избежать образования кристаллов льда внутри клеток и производить наивысший уровень жизнеспособных клеток при хранении и последующем оттаивании. Кроме того, такие устройства предоставляют как бумажные, так и электронные записи фактического замораживания, что может иметь решающее значение при прохождении внутренних или внешних аудитов и инспекций (для регулирующего лицензирования), а также при попытке определить основную причину (ы) для любых несовпадающих результатов с конечным продуктом клетки.Наконец, использование таких машин в биобанках с высокой пропускной способностью необходимо для минимизации затрат и максимального увеличения пропускной способности образцов, обеспечивая при этом надежные и воспроизводимые результаты. Недостатком является то, что каждая машина может стоить более 15 000 долларов и может потребовать покупки двух таких машин, чтобы иметь резервное устройство для этой критически важной части оборудования. Эти устройства идеально подходят как для хранения пакетов, так и флаконов и легко вмещают десятки пакетов и до сотен флаконов за один цикл криозаморозки.
Однако для биобанков с меньшим доступным капиталом и / или меньшим количеством ежедневных образцов для криоконсервации доступны альтернативы. 41 Несмотря на простоту и отсутствие какой-либо документации о фактических параметрах цикла замораживания, можно получить хорошие результаты (особенно для более выносливых ячеек, таких как MSC), используя такие простые устройства, как контейнеры из пенополистирола (например, Mr Frosty, продаваемый компанией Биоцизия). Используя ступенчатый подход, можно поместить клетки внутрь контейнера, а затем поместить образец при –80 ° C, а затем через 24 часа в паровую фазу осушителя LN2.Хотя намного проще выполнить с помощью криопробирки, этот подход не невозможно реализовать с помощью криопакетов (хотя для этого требуется покупка кассет с пакетами). Этот подход обманчиво прост, немного более экономичен и требует меньше времени технического специалиста в конце рабочего дня, чтобы поместить образцы в морозильные камеры.
Банк стволовых клеток
Банкинг стволовых клеток должен минимизировать затраты при максимальном количестве хранимых образцов. Казалось бы, эту цель легче всего достичь, используя криопробирки, в которых можно хранить 40 000 или более пузырьков в одной росе, в то время как хранить только 5–10 000 криопакетов.Однако эти цифры иногда обманчивы, поскольку для больших образцов может потребоваться хранение многих флаконов (хотя в одном флаконе может храниться до 100 × 10 6 клеток / мл), когда потребуется всего 1-2 пакета. Если для лечения или для исследований и разработок требуется несколько аликвот стволовых клеток, флаконы могут быть более оптимальными, несмотря на то, что теперь у них могут быть подходящие многокамерные пакеты. Таким образом, окончательное решение должно основываться на конечных конечных потребностях (например, количестве использований и количестве ячеек).
Можно получить как криопробирки, так и криопакеты различных размеров. Криопробирки доступны от нескольких производителей в размерах 2,0 и 4,5 куб. Доступны криопакеты размером от 25 до 250 куб. См (хотя в большинстве банков используются размеры от 25 до 60 куб. См). Оба типа контейнеров для хранения должны быть обернуты, чтобы предотвратить перекрестное загрязнение образцов, защитить от контакта с LN2 и предотвратить микробное загрязнение во время оттаивания. Как правило, биобанки используют флаконы, когда требуются образцы меньшего размера или много аликвот образцов.Пакеты обычно используются для единичных и более крупных образцов. Когда необходимо ограниченное количество аликвот пробы, можно использовать несколько пакетов объемом 25 см3. Нельзя упускать из виду проблему аликвот, поскольку она напрямую влияет на использование образцов для регенеративных медицинских применений, размножения стволовых клеток, генной терапии и т. Д. Это также позволяет избежать необходимости замораживать / размораживать образец более одного раза, что может отрицательно повлиять на функцию стволовых клеток. 42 Криопакеты теперь доступны с двумя отделениями (20% и 80%), четырьмя отделениями (по 25% каждое) и пятью отделениями (по 20% каждое).Криопакеты намного проще внедрить в закрытые технологические системы, позволяющие собирать, обрабатывать, криоконсервировать и размораживать, а также вливать пациенту через стерильное присоединение дополнительных пакетов. До недавнего времени криопробирки были доступны только в виде открытой системы, требующей использования вытяжных шкафов с ламинарным потоком или установки GMP, а также нескольких проверок стерильности. Однако теперь доступны криопробирки закрытой системы различных размеров, которые можно интегрировать в закрытую систему криоконсервации. Наш опыт показывает, что флаконы с закрытой системой трудно манипулировать и они могут не подходить для лабораторий с высокой пропускной способностью.
После того, как было принято решение об использовании флаконов вместо пакетов, следующий вопрос, который необходимо решить, — какой тип устройства хранения будет использоваться для длительного хранения образцов. При долгосрочном хранении (т.е.> 1 года) жизнеспособных стволовых клеток всегда следует использовать осушители LN2, поскольку можно достичь более низких температур и наблюдаются меньшие колебания температуры. Кроме того, сборщики LN2 не зависят от наличия электричества, что иногда может быть проблемой. Механические морозильники, хотя теперь и способны достигать температуры –150 ° C, не так холодны, как сушилки с LN2, испытывают большие колебания температуры в различных областях устройства хранения и испытывают критические отказы (движущиеся части или источники электропитания) с большей частотой, чем Вытяжка LN2 (для этого требуется только добавление LN2 [вручную или автоматически] примерно каждую неделю; даже до нескольких недель, если крышки не открываются).Хотя в прошлом существовали аргументы в пользу длительного хранения образцов стволовых клеток в паровой и жидкой фазе LN2, на самом деле это больше аргумент в пользу температуры хранения и температурной стабильности. Последний класс сливов LN2 теперь чрезвычайно стабилен во всех положениях внутри устройства с использованием парофазной среды благодаря лучшей инженерии, с изменением температуры <10 ° C в любом месте внутри устройства, поддерживая –196 ° C даже с открытыми крышками . Более старые осушители из паровой фазы были известны тем, что колебались до 40 ° C, когда крышки открывались для вставки или извлечения образцов, что приводило к повреждению образцов, хранящихся в зоне колебаний (т. Е. В верхней части росы).Биобанки редко хранят образцы в жидкой фазе. Кроме того, хранение в паровой фазе предотвращает / сводит к минимуму перекрестное загрязнение проб, предотвращает ожоги LN2 технического персонала и является более экономичным.
Следует отметить, что хотя можно приобрести автоматизированные устройства хранения (аналогичные тем, которые продаются GE Healthcare через Thermogenesis), эти устройства очень дороги, подвержены механическим проблемам и, как правило, не так хорошо подходят для высокопроизводительных биобанков, как ручная система сливов (продается Thermo-Fisher, Custom Biogenics Systems или MVE).Сушилки можно получить в размерах, способных вместить почти 10 000 пакетов объемом 25 куб. См или 40 000 флаконов объемом 4 куб. См.
Системы качества
Успешное создание банка стволовых клеток требует внедрения ряда систем качества, чтобы соответствовать нормативным требованиям и гарантировать врачам, ученым и пациентам, что образцы будут полезны либо для исследований и разработок, либо для клинических применений в будущем. Помимо базовых систем контроля и обеспечения качества, которые всегда должны быть частью банка стволовых клеток, необходимо уделить внимание программному обеспечению для системного мониторинга и управления запасами.Должны быть внедрены системы качества для калибровки / аттестации всего критически важного оборудования, проверки всех процессов и обеспечения технической компетентности. Важно отметить, что если целью банка стволовых клеток является хранение таких образцов в течение многих десятилетий с целью успешного клинического использования в более позднее время, необходимо подумать о проведении долгосрочных исследований стабильности. Такие исследования будут включать не только определение количества и жизнеспособности клеток, но и оценку любых фенотипических изменений в популяциях стволовых клеток, а также измерение функции стволовых клеток либо напрямую, либо с использованием суррогатного индикатора.Например, для HSC можно измерить количество клеток CD34 +, а также выполнить анализ колониеобразующих единиц для оценки стволовых изменений фенотипа и функции клеток. При использовании больших запоминающих устройств, подобных описанным в предыдущем разделе, необходимо внимательно оценить различные места внутри устройства (сверху, снизу и по бокам), чтобы убедиться, что в росе нет «горячих» точек. Если кто-то планирует хранить в течение десятилетий, то необходимо создать анализы, которые будут производить такие оценки в течение многих десятилетий.И если в одном устройстве хранятся разные типы стволовых клеток, то каждый тип стволовых клеток необходимо оценивать отдельно. Кроме того, в рамках систем качества необходимо иметь резервные водосливы, чтобы в случае сбоя они могли одновременно удерживать 20% от общего запаса. Для тех, кто хочет узнать больше об этих вопросах, а также о других частях базовых систем качества, читатель может найти ссылку на http://www.aabb.org, а также на правила 21CFR FDA.
Системный мониторинг
Жизненно важно (и необходимо), чтобы все критическое оборудование контролировалось в случае отказа и для определения состояния производительности. Вместо того, чтобы нанимать человека, работающего на полную ставку, для записи этих значений вручную (что отнимает много времени и дорого), можно рассмотреть несколько коммерчески доступных систем. Одна из первых подобных систем, разработанных для этой цели, предлагается компанией Rhees, имеющей долгую историю в этой области. Система Rhees — одна из самых дорогих доступных систем, но она довольно надежна и гибка.В качестве альтернативы можно использовать систему SmartVue, продаваемую Thermo-Fisher. Он стоит меньше половины системы Rhees, расширяется и может быть доступен удаленно с компьютера (но не со смартфона). Однако его долговременная надежность неизвестна из-за недавнего внедрения системы в полевых условиях. Известно, что с этим связаны некоторые технические проблемы, а замена некоторых специальных датчиков для мониторинга может превышать несколько тысяч долларов. Однако ее программная система, как и система Rhees, обеспечивает контрольный журнал для нормативных целей и соответствует многим федеральным директивам.Наконец, за небольшую часть стоимости других систем можно приобрести облачную систему (внешний сервер) у Minnot, которая предлагает большинство тех же возможностей, что и у Rhees и Thermo-Fisher. Однако Minnot не предлагает некоторые из более специализированных систем мониторинга (например, зонды CO 2 ), которые часто требуются в учреждениях по производству стволовых клеток. Кроме того, программное обеспечение для создания отчетов от Minnot является примитивным и ограниченным, что может вызвать нормативные проблемы, но данные можно легко экспортировать в другое программное обеспечение системы управления лабораторной информацией, чтобы преодолеть этот недостаток.
Программное обеспечение для управления запасами
Точное отслеживание образцов, поступающих в банк стволовых клеток и вывозимых из него, является очевидной необходимостью. Когда запасы достигают критической массы (например, более нескольких тысяч образцов), необходимо использовать автоматизированные, а не ручные системы. На рынке имеется несколько систем управления запасами программного обеспечения. Достаточно строгая и гибкая система — это TissueMetrix, программная система, которая используется многими отделениями патологии для управления своими запасами образцов.TissueMetrix позволяет вводить множество значений клинических и лабораторных данных, а также напрямую связывать их с электронными медицинскими записями. Однако программное обеспечение работает медленно (базируется на сторонних серверах) и не так удобно для пользователя, как приведенные ниже. Затраты умеренные.
Чрезвычайно удобная и гибкая система StemSoft (предлагаемая Stem Cell Technologies) была специально разработана для использования в банках стволовых клеток и в учреждениях клеточной терапии. Программное обеспечение соответствует всем федеральным нормативным требованиям (как и все другие системы), предлагая журналы аудита, управление запасами расходных материалов и т. Д.Его легко настроить и начать использовать, но это самые дорогие программные системы, описанные здесь, стоимостью более 40 000 долларов.
Последнее заслуживающее внимания программное обеспечение для управления запасами предлагает Freezer Works. Программное обеспечение существует уже некоторое время, удобное для пользователя и имеет одни из лучших доступных графических интерфейсов (для управления образцами). Кроме того, это самая дешевая из всех программных систем, стоимость которой составляет менее 15 000 долларов. Возможно, его не совсем просто использовать для лабораторий клеточной терапии или для других лабораторных функций, кроме хранения и отслеживания образцов, но его простота использования и стоимость делают его вариантом, который следует рассмотреть.
Размораживание биопрепаратов для клинического использования (основные этапы)
Восстановление максимального количества жизнеспособных и функциональных стволовых клеток после криоконсервации и длительного хранения имеет решающее значение для выживания банка стволовых клеток. Частично этот успех связан с внедрением воспроизводимой методологии размораживания замороженных образцов. Хотя во всех методах обычно используется быстрое оттаивание образца (во флаконе или пакете) до тех пор, пока ледяная пробка не станет «жидкой» (при 37 ° C), с последующим разбавлением и вымыванием ДМСО холодной средой, есть некоторые существенные различия. оптимальными методами в зависимости от типа размораживаемого образца.ДМСО следует удалять как можно быстрее путем разбавления и / или промывки, поскольку ДМСО в концентрации 10% может быть токсичным для клеток, особенно когда образец достигает комнатной температуры. 43 Разбавление и быстрая промывка могут быть легко выполнены с суспензиями отдельных клеток, как это было обнаружено с образцами CB, PBSC и BM. В случае одноклеточных растворов важно защитить от осмотического шока во время процедур оттаивания и промывки, которые могут снизить жизнеспособность. Этого легко добиться путем добавления коллоидных буферов, таких как декстран-40, к средам для оттаивания и промывки. 7 Однако этот подход не будет работать с AT и CT, где ткани являются стоками DMSO, что делает разбавление DMSO практически невозможным быстро. В этих случаях размороженные образцы хранят в холоде (9–10 ° C), чтобы избежать токсичности, разбавляют холодной средой и инкубируют в течение более длительных периодов времени 43 на качалке для извлечения ДМСО. Часто может потребоваться несколько таких продолжительных промывок, и процесс следует проверить. Как только концентрация ДМСО упала до приемлемого уровня, образец можно восстановить более теплой средой для использования в анализах или для клинических применений.Процедуры размораживания должны быть валидированы, чтобы гарантировать поддержание не только жизнеспособности клеток (и фенотипа), но и функции стволовых клеток (обычно определяемой суррогатными анализами, такими как колониеобразующие единицы), поскольку эти два параметра не всегда коррелируют.
Наконец, образцы, предназначенные для клинического использования, не должны собираться, промываться или криоконсервироваться с использованием продуктов животного происхождения, таких как фетальная бычья сыворотка, если они не получены из квалифицированных партий, одобренных регулирующими органами. Скорее, предпочтительны продукты человеческого происхождения, такие как человеческий сывороточный альбумин, которые были протестированы на наличие инфекционных агентов.По возможности, со всеми образцами следует использовать реактивы клинического качества (исключение — ДМСО). Хотя реагенты более дорогие, чем другие типы квалифицированных реагентов, регулирующие органы часто требуют использования реагентов класса GMP.
Данные долгосрочной стабильности
Целью банков стволовых клеток является приобретение и хранение различных типов стволовых клеток для будущего использования. Хранение таких образцов может составлять месяцы, годы или даже десятилетия. Чтобы гарантировать, что такие образцы действительно будут полезны (для исследований или клинических применений), все лабораторные и банковские процессы должны быть валидированы.Эти проверки должны включать в себя проведение исследований долгосрочной стабильности, включая оценку жизнеспособности и функции. Предпочтительно, чтобы один и тот же набор образцов оценивался в каждый момент времени (а не с использованием смеси образцов), что может быть выполнено путем создания банка нескольких аликвот стволовых клеток на ранних этапах первоначальной настройки банка клеток. Эти аликвоты можно отбирать в разное время (например, ежегодно) и сравнивать с результатами, полученными с тем же самым свежим, никогда не замораживаемым образцом, испытанным в более ранний момент времени.Для оценки вариабельности пациентов следует использовать нескольких доноров, как правило, необходимо выделить аликвотирование десяти доноров для каждого типа стволовых клеток, а банкинг запланирован на срок не менее 20 лет.
Как видно на рисунке 3, стволовые жировые клетки можно хранить в замороженном виде, а затем размораживать до 2 лет, при этом они все равно будут демонстрировать сопоставимую биологическую активность (не статистически значимую). Подобные результаты наблюдались для CT MSC, как показано на рисунке 4. Мы и другие ранее сообщали и публиковали аналогичные наблюдения для CB HSC. 44–45
Рис. 3 Данные о долгосрочной жизнеспособности жировых стволовых клеток, криоконсервированных и сохраненных в течение 2 лет. Примечания: Три независимых образца (A, B и C) показаны для сравнения. Образцы были собраны, обработаны, помещены в банки и разморожены. Жизнеспособность определяли по исключению красителя трипанового синего после замораживания и оттаивания в течение 1 дня, которое первоначально составляло ~ 85% –100%. Не было обнаружено значительных различий между любыми временными точками для конкретного образца |
Рисунок 4 Долгосрочные функциональные данные CT-MSC. Примечания: Показаны пять независимых выборок. КТ-МСК хранили в течение 12 месяцев перед оттаиванием и оценкой. Сокращения: CT-MSC, мезенхимальные стромальные клетки пуповинной ткани |
Сбор данных этого типа становится бесценным при проверке процессов в банке клеток, которые впоследствии могут быть использованы для регулирующего лицензирования. Это также гарантирует, что денежные затраты не будут потрачены на выборки, которые не будут полезны в будущем.
Заключение
Стволовые клетки находятся в разных частях тела, причем каждый анатомический участок содержит смесь типов стволовых клеток. Однако наиболее часто используемыми источниками из-за простоты доступа и низкой стоимости являются стволовые клетки, обнаруженные в AT, BM (аналогично мобилизованным PBSC), пуповинной CB и CT. К каждому из этих источников стволовых клеток предъявляются разные требования во время сбора, обработки, криоконсервации и хранения. Например, коллекции BM и PBSC часто имеют размер> 1000 куб. См, что требует значительного уменьшения объема для эффективной криоконсервации.Однако коллекции пуповинных клеток обычно имеют размер <100 куб. См, что требует высокоэффективных процессов для восстановления достаточного количества стволовых клеток для клинического использования. С другой стороны, и CT, и AT требуют другого подхода, поскольку ни один из них не является суспензией отдельных клеток, которые являются обычными при выполнении типичного банка стволовых клеток. Каждая из этих проблем может быть решена с помощью различных подходов, все с успешными результатами, как было описано здесь.
Что наиболее важно, клинически полезный банк стволовых клеток требует внедрения строгой системы контроля качества, которая обеспечит уверенность и уверенность конечных пользователей в том, что криоконсервированные образцы жизнеспособны и функциональны, когда это необходимо, независимо от того, насколько далеко это может быть в будущем.Кроме того, эти системы контроля необходимы для сбора данных, необходимых для научного и нормативного лицензирования (например, CAP или CLIA), которые могут отличать один биобанк от другого, обеспечивая его финансовое выживание, а также его полезность. Стволовые клетки собираются и хранятся с целью 100% использования (в клинических или исследовательских целях), что возможно только в том случае, если такие системы созданы и строго соблюдаются.
Благодарности
Автор хотел бы поблагодарить всех врачей, медсестер и пациентов, которые предоставили каждый из источников стволовых клеток за последние 20 лет для использования в исследованиях, а также для клинических применений.Без вашего участия успехи, достигнутые в банке стволовых клеток, и спасенные жизни были бы невозможны.
Раскрытие информации
Автор сообщает об отсутствии конфликта интересов в этой работе.
Список литературы
1. | McCulloch EA, Till JE. Радиационная чувствительность нормальных клеток костного мозга мышей, определяемая количественной трансплантацией костного мозга облученным мышам. Radiat Res . 1960. 13 (1): 115–125. | |
2. | Becker AJ, McCulloch EA, Till JE. Цитологическая демонстрация клональной природы колоний селезенки, полученных из трансплантированных клеток костного мозга мыши. Природа . 1963. 197 (4866): 452–454. | |
3. | Thomas ED, Lochte HL, Lu WC, et al. Внутривенное вливание костного мозга пациентам, получающим лучевую и химиотерапию. N Engl J Med . 1957. 157 (11): 491–496. | |
4. | Gatti RA, Meuwissen HJ, Nymegen MD, Allen HD, Hong R, Good RA. Иммунологическая реконструкция лимфопенической иммунологической недостаточности, связанной с полом. Ланцет . 1968. 292 (7583): 1366–1369. | |
5. | Gluckman E, Broxmeyer HE, Auerbach AD, et al. Восстановление кроветворения у пациента с анемией Фанкони с помощью пуповинной крови от HLA-идентичного брата или сестры. N Engl J Med . 1989. 321 (17): 1174–1178. | |
6. | Harris DT. Опыт работы в банках аутологичной и аллогенной пуповинной крови. J Hematother ., 1996; 5 (2): 123–128. | |
7. | Rubinstein P, Rosenfield RE, Adamson JW, Stevens CE. Сохраненная плацентарная кровь для восстановления неродственного костного мозга. Кровь . 1993; 81: 1679–1690. | |
8. | Баллен К.К., Вертер Ф., Курцберг Дж. Донорство пуповинной крови: государственное или частное? Пересадка костного мозга . 2015; 50: 1271–1278. | |
9. | Курцберг Дж., Косарас Б., Стивенс С., Снайдер Е. Ю.. Клетки пуповинной крови приживаются и дифференцируются в нервных тканях после трансплантации человеку. Пересадка костного мозга Biol . 2003. 9 (2): 128–129. | |
10. | Thomson J, Itskovitz-Eldor J, Shapiro S, Waknitz M, Swiergiel J, Marshall V, Jones J. Линии эмбриональных стволовых клеток, полученные из бластоцист человека. Наука . 1998. 282 (5391): 1145–1147. | |
11. | Lee Y-H, Choi1 KV, Moon JH, et al. Безопасность и возможность противодействия неврологическим нарушениям путем внутривенного введения аутологичной пуповинной крови при церебральном параличе. J Transl Med .2012; 10: 58–69. | |
12. | Коттен С.М., Мурта А.П., Голдберг Р.Н. и др. Возможность получения аутологичных клеток пуповинной крови для младенцев с гипоксически-ишемической энцефалопатией. J Pediatr .2014; 164 (5): 973–979.e1. | |
13. | Rubin R, Strayer DS. Патология Рубина: клинико-патологические основы медицины . Нью-Йорк: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; 2007: 90. | |
14. | Nardi NB, da Silva Meirelles L. Мезенхимальные стволовые клетки: выделение, распространение in vitro и характеристика. В: Wobus AM, Boheler K, ред. стволовых клеток. Справочник по экспериментальной фармакологии . Нью-Йорк: Спрингер; 2006. 174: 249–282. | |
15. | Delaney C, Heimfeld S, Brashem-Stein C, Voorhies H, Manger RL, Bernstein ID. Notch-опосредованная экспансия клеток-предшественников пуповинной крови человека, способных к быстрому восстановлению миелоида. Нат Мед . 2010. 16 (2): 232–236. | |
16. | Horwitz ME, Chao NJ, Rizzieri DA, et al. Расширение пуповинной крови никотинамидом обеспечивает долгосрочное многолинейное приживление. J Clin Invest. 2014; 124 (7): 3121–3128. | |
17. | Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Harris DT. Влияние умеренного теплового стресса на регенеративный потенциал мезенхимальных стволовых клеток человека. Цитотерапия . 2015; 17: 359–368. | |
18. | Руководство для доноров Национальной программы доноров костного мозга. Доступно на http://Marrow.org. По состоянию на 5 ноября 2012 г. | |
19. | McCullough J, Clay M, Herr G, Smith J, Stroncek D. Эффекты гранулоцитарно-колониестимулирующего фактора на потенциальных нормальных доноров гранулоцитов. Переливание крови . 1999; 39: 1136–1140. | |
20. | Sohn SK, Kim JG, Seo KW, Chae YS, Jung JT, Suh JS, Lee KB. Эффект мобилизации на основе GM-CSF у нормальных здоровых доноров для аллогенной трансплантации стволовых клеток периферической крови. Трансплантация костного мозга . 2002. 30 (2): 81–86. | |
21. | Daniele N, Scerpa MC, Rossi C, Lanti A, Adorno G, Isacchi G, Zinn F. Обработка концентратов стволовых клеток из костного мозга в ABO-несовместимых трансплантатах: как и когда. Переливание крови . 2014. 12 (2): 150–158. | |
22. | Sutton DW1, Chen PC, Schmid-Sch × önbein GW. Разделение клеток в лейкоцитной пленке. Биореология . 1988. 25 (4): 663–673. | |
23. | Broxmeyer HE, Douglas GW, Hangoc G, et al. Пуповинная кровь человека как потенциальный источник трансплантируемых гемопоэтических стволовых клеток / клеток-предшественников. Proc Natl Acad Sci U S A .1989. 86 (10): 3828–3832. | |
24. | Broxmeyer HE, Cooper S, Hangoc G, et al. Пуповинная кровь человека: клинически полезный источник трансплантируемых гемопоэтических стволовых клеток / клеток-предшественников. Int J Cell Cloning . 1990; 8 (Дополнение 1): 76–91. | |
25. | Solves P, Planelles D, Mirabet V, Blanquer A, Carbonell-Uberos F. Качественное и количественное восстановление клеток пуповинной крови, обработанной двумя автоматизированными устройствами в обычном банке пуповинной крови: сравнительное исследование. Переливание крови . 2013. 11 (3): 405–411. | |
26. | Solves P, Mirabet V, Blanquer A, et al. Новое автоматическое устройство для рутинного банка пуповинной крови: критический анализ различных методик уменьшения объема. Цитотерапия . 2009. 11 (8): 1101–1107. | |
27. | Basford C, Forraz N, Habibollah S, Hanger K, McGuckin CP. Обработка пуповинной крови с использованием Prepacyte-CB увеличивает доступность гематопоэтических клеток-предшественников по сравнению с обычным разделением Hetastarch. Клетка Пролиф . 2009. 42 (6): 751–761. | |
28. | Каплан А.И. Мезенхимальные стволовые клетки. J Orthopaedic Res . 1991; 9: 641–650. | |
29. | Каплан А. Взрослые мезенхимальные стволовые клетки для тканевой инженерии по сравнению с регенеративной медициной. J Cell Physiol . 2007. 213 (2): 341–347. | |
30. | Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Harris DT.Использование криоконсервированной ткани пуповины для регенеративной медицины. Curr Stem Cell Res T . 2013. 8 (5): 370–380. | |
31. | Seshareddy K, Troyer D, Weiss ML. Метод выделения мезенхимальных клеток из желе Уортона пуповины. Методы Cell Biol . 2008. 86: 101–119. | |
32. | Wang HS, Hung SC, Peng ST и др. Мезенхимальные стволовые клетки в желе Уортона пуповины человека. Стволовые клетки . 2004. 22 (7): 1330–1337. | |
33. | Bunnell BA, Flaat M, Gagliardi C, Patel B, Ripoll C. Стволовые клетки, полученные из жировой ткани: выделение, размножение и дифференцировка. Методы . 2008. 45 (2): 115–120. | |
34. | Чаудхери М.С., Бадовски М.С., Муиз А., Пирс Дж., Харрис Д.Т. Полезность стволовых клеток, полученных из жировой ткани, не зависит от анатомического места сбора. Биоресурсы в открытом доступе . 2015. 4 (1): 131–145. | |
35. | Чоу Р., Лин А., Тонай Р. и др. Сравнение восстановления клеток при истощении / восстановлении плазмы и переработке эритроцитов в пуповинной крови. Цитотерапия . 2011. 13 (9): 1105–1119. | |
36. | Rubinstein P, Dobrila L, Rosenfield RE, et al. Обработка и криоконсервация плацентарной / пуповинной крови для восстановления неродственного костного мозга. Proc Natl Acad Sci USA . 1995. 92 (22): 10119–10122. | |
37. | Harris DT, Schumacher MJ, Rychlik S, et al. Сбор, отделение и криоконсервация пуповинной крови для использования при трансплантации. Трансплантация костного мозга . 1994. 13 (2): 135–143. | |
38. | Badowski M, Muise A, Harris DT. Смешанные эффекты длительного хранения в замороженном состоянии на стволовые клетки пуповинной ткани. Цитотерапия . 2014. 16 (9): 1313–1321. | |
39. | Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Harris DT. Сравнение регенеративного потенциала мезенхимальных стволовых клеток, полученных из жировой ткани и пуповинной ткани человека. Цитотерапия . 2013. 15 (3): 330–343. | |
40. | Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Pierce J, Harris DT. Криоконсервация всей жировой ткани для будущего использования в регенеративной медицине. J Surg Res ., 2014; 187 (1): 24–35. | |
41. | Simione FP, Daggett PM. Извлечение морской динофлагелляты после контролируемого и неконтролируемого замораживания. Криобиология . 1977. 14 (3): 362–366. | |
42. | Harris DT. Оптимизация криоконсервации образцов пуповинной крови. Цитотерапия . 2012. 14 (3): 359–365. | |
43. | Харрис Д.Т., Ван Дж., Хе Х, Бретт С.К., Мур М.Э., Браун Х. Исследования практических вопросов сохранения пуповинной крови: влияние ионизирующего излучения и переменные криоконсервации. Открытая стволовая клетка J . 2011; 2: 37–44. | |
44. | Harris, DT. Сбор, обработка и хранение пуповинной крови для клинического использования. J Bellevue Obstet Gynecol Soc . 2002; 18: 13–21. | |
45. | Broxmeyer HE, Srour EF, Hangoc G, Cooper S, Anderson SA, Bodine DM. Высокоэффективное восстановление функциональных гемопоэтических клеток-предшественников и стволовых клеток из пуповинной крови человека, криоконсервированной в течение 15 лет. Proc Natl Acad Sci USA . 2003. 100 (2): 645–650. |
Криоконсервация ткани пуповины: краткий обзор | Исследование стволовых клеток и терапия
Кнудтзон С. Рост in vitro гранулоцитарных колоний из циркулирующих клеток в пуповинной крови человека.Кровь. 1974. 43 (3): 357–61.
CAS PubMed Google ученый
Gluckman E, Broxmeyer HA, Auerbach AD, Friedman HS, Douglas GW, Devergie A, Esperou H, Thierry D, Socie G, Lehn P. Восстановление кроветворения у пациента с анемией Фанкони с помощью пуповины кровь от HLA-идентичного брата. N Engl J Med. 1989. 321 (17): 1174–8.
CAS Статья Google ученый
Баллен К.К., Глюкман Э., Броксмайер Х. Трансплантация пуповинной крови: первые 25 лет и позже. Кровь. 2013. 122 (4): 491–8. https://doi.org/10.1182/blood-2013-02-453175.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Баллен К.К., Вертер Ф., Курцберг Дж. Донорство пуповинной крови: государственное или частное? Пересадка костного мозга. 2015; 50 (10): 1271–8. https://doi.org/10.1038/bmt.2015.124.
CAS Статья PubMed Google ученый
Арутюнян И., Ельчанинов А., Макаров А., Фатхудинов Т. Пуповина как перспективный источник терапии на основе мезенхимальных стволовых клеток. Stem Cells Int. 2016; 2016: 6
6. https://doi.org/10.1155/2016/6
6.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Kalaszczynska I, Ferdyn K. Wharton Мезенхимальные стволовые клетки, полученные из желе: будущее регенеративной медицины? Последние данные и клиническое значение.Biomed Res Int. 2015; 2015: 430847. https://doi.org/10.1155/2015/430847.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Ding DC, Chang YH, Shyu WC, Lin SZ. Мезенхимальные стволовые клетки пуповины человека: новая эра в терапии стволовыми клетками. Трансплантация клеток. 2015; 24 (3): 339–47. https://doi.org/10.3727/096368915X686841.
Артикул PubMed Google ученый
Маллис П., Гонтика I, Поулогианнопулос Т., Зойдакис Дж., Влаху А., Михалопулос Э., Хатзистаматиу Т., Папассавас А., Ставропулос-Джокас С. Оценка децеллюляризации артерии пуповины. Transplant Proc. 2014; 46 (9): 3232–9. https://doi.org/10.1016/j.transproceed.2014.10.027.
CAS Статья PubMed Google ученый
Ambler GK, Twine CP. Тип трансплантата для бедренно-подколенного шунтирования. Кокрановская база данных Syst Rev.2018; 2: CD001487. https://doi.org/10.1002/14651858.CD001487.pub3.
Артикул PubMed Google ученый
Рочон К., Шейнер П.А., Шарма Дж., Родригес-Давалос М.И., Савино Дж., Фачуто М.Э. Польза реканализированного трансплантата из пупочной вены для гепатопанкреатобилиарного хирурга. Surg Innov. 2013. 20 (2): 126–33. https://doi.org/10.1177/1553350612447691.
Артикул PubMed Google ученый
Бейки Б., Зейнали Б., Сейджафари Э. Изготовление трехмерного губчатого каркаса с использованием внеклеточного матрикса человеческого желе Вартона для заживления ран. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2017; 78: 627–38. https://doi.org/10.1016/j.msec.2017.04.074.
CAS Статья PubMed Google ученый
Tuan-Mu HY, Yu CH, Hu JJ. О децеллюляризации свежих или замороженных пупочных артерий человека: значение для сосудистых трансплантатов с тканевой инженерией малого диаметра.Энн Биомед Eng. 2014. 42 (6): 1305–18. https://doi.org/10.1007/s10439-014-1000-1.
Артикул PubMed Google ученый
Гуи Л., Муто А., Чан С.А., Брейер К.К., Никласон Л.Е. Развитие децеллюляризованных пупочных артерий человека в виде сосудистых трансплантатов малого диаметра. Tissue Eng Part A. 2009; 15 (9): 2665–76. https://doi.org/10.1089/ten.TEA.2008.0526.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Hoenicka M, Lehle K, Jacobs VR, Schmid FX, Birnbaum DE. Свойства пупочной вены человека как живого каркаса для тканеинженерного сосудистого трансплантата. Tissue Eng. 2007. 13 (1): 219–29.
CAS Статья Google ученый
Родригес-Родригес В.Е., Мартинес-Гонсалес B, Кирога-Гарса A, Рейес-Эрнандес CG, де ла Фуэнте-Вильярреал D, де ла Гарса-Кастро О, Гусман-Лопес С., Элизондо RE. Пупочные сосуды человека: выбор оптимального метода децеллюляризации.ASAIO J. 2017; https://doi.org/10.1097/MAT.0000000000000715.
Артикул Google ученый
Крузье Т., МакКлендон Т., Тосан З., Макфетридж П.С. Перевернутые человеческие пупочные артерии с регулируемой толщиной стенки для регенерации нервов. J Biomed Mater Res A. 2009; 89 ((3): 818–28. Https://doi.org/10.1002/jbm.a.32103.
CAS Статья Google ученый
Goktas S, Pierre N, Abe K, Dmytryk J, McFetridge PS.Клеточные взаимодействия и биомеханические свойства уникального сосудистого каркаса для регенерации тканей пародонта. Tissue Eng Part A. 2010; 16 (3): 769–80. https://doi.org/10.1089/ten.TEA.2009.0101.
CAS Статья PubMed Google ученый
18. Abousleiman Р.И., Рейес Y, McFetridge Р, Sikavitsas В. пупочной вены человека: новым подмости для костно-мышечной регенерации мягких тканей. Искусственные органы. 2008. 32 (9): 735–42.https://doi.org/10.1111/j.1525-1594.2008.00598.x.
Артикул PubMed Google ученый
Кук М., Тан Е.К., Мандрики К., Хе Х., О’Коннелл Дж., Ценг СК. Сравнение криоконсервированной амниотической мембраны и ткани пуповины с дегидратированной амниотической мембраной / тканью хориона. J Уход за раной. 2014; 23 (10): 465–74 476. https://doi.org/10.12968/jowc.2014.23.10.465.
CAS Статья PubMed Google ученый
Папанна Р., Флетчер С., Моис К. Дж. Мл., Манн Л. К., Ценг СК. Криоконсервированная человеческая пуповина для лечения миелошизиса в утробе матери. Obstet Gynecol. 2016; 128 (2): 325–30. https://doi.org/10.1097/AOG.0000000000001512.
Артикул PubMed Google ученый
Рафаэль А., Гонсалес Дж. Использование криоконсервированной пуповины с терапией ран отрицательным давлением при сложных диабетических язвах с остеомиелитом. J Уход за раной. 2017; 26 (Sup10): S38–44.https://doi.org/10.12968/jowc.2017.26.Sup10.S38.
CAS Статья PubMed Google ученый
Капуто В.Дж., Вакеро С., Монтероза А., Монтероса П., Джонсон Е., Беггс Д. и др. Ретроспективное исследование криоконсервированной пуповины в качестве дополнительной терапии для ускорения заживления хронических сложных язв стопы на фоне остеомиелита. Регенерация заживления ран. 2016; 24 (5): 885–93. https://doi.org/10.1111/wrr.12456.
Артикул PubMed Google ученый
Couture M. Одноцентровое ретроспективное исследование криоконсервированной пуповины для заживления ран у пациентов, страдающих хроническими ранами стопы и голеностопного сустава. Раны. 2016; 28 (7): 217–25.
PubMed Google ученый
Розати Х, Хэндли Т, Джаясена Си. Процесс и подводные камни криоконсервации спермы. J Clin Med. 2017; 6 (9) https://doi.org/10.3390/jcm60
.
Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Pierce J, Harris DT.Криоконсервация всей жировой ткани для будущего использования в регенеративной медицине. J Surg Res. 2014. 187 (1): 24–35. https://doi.org/10.1016/j.jss.2013.09.027.
CAS Статья PubMed Google ученый
Devitt SM, Carter CM, Dierov R, Weiss S, Gersch RP, Percec I. Успешное выделение жизнеспособных стволовых клеток, полученных из жировой ткани, из жировой ткани человека, подлежащих длительному криоконсервации: положительные последствия для взрослых стволовых клеток терапия на основе пациентов пожилого возраста.Stem Cells Int. 2015; 2015: 146421. https://doi.org/10.1155/2015/146421.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Park BW, Jang SJ, Byun JH, Kang YH, Choi MJ, Park WU и др. Криоконсервация ткани зубного фолликула человека для использования в качестве ресурса аутологичных мезенхимальных стволовых клеток. J Tissue Eng Regen Med. 2017; 11 (2): 489–500. https://doi.org/10.1002/term.1945.
CAS Статья PubMed Google ученый
Carnevale G, Pisciotta A, Riccio M, De Biasi S, Gibellini L, Ferrari A и др. Оптимизированная криоконсервация и хранение фрагментов костного мозга человека и стволовых клеток. Биопресерв Биобанк. 2016; 14 (2): 138–48. https://doi.org/10.1089/bio.2015.0001.
CAS Статья PubMed Google ученый
Унни С., Касивисванатан С., Д’Суза С., Хавале С., Мукерджи С., Патвардхан С., Бхартия Д. Эффективная криоконсервация ткани яичка: влияние возраста, состояния образца и концентрации криопротектора.Fertil Steril. 2012; 97 (1): 200–8.e1. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2011.10.018.
CAS Статья PubMed Google ученый
Флери А., Пиррелло О., Могард С., Мателин С., Линк С. Рак груди и криоконсервация ткани яичников: обзор литературы. J Gynecol Obstet Hum Reprod. 2018; (18): 30172–7. https://doi.org/10.1016/j.jogoh.2018.05.008.
Saleh R, Reza HM. Краткий обзор эпителиальных клеток выстилки пуповины человека и их потенциальных клинических применений.Stem Cell Res Ther. 2017; 8 (1): 222. https://doi.org/10.1186/s13287-017-0679-y.
Артикул PubMed PubMed Central Google ученый
Танака М., Цуно Н.Х., Фуджи Т., Тодо Т., Сайто Н., Такахаши К. Терапия вакциной эндотелиальных клеток пупочной вены человека у пациентов с рецидивирующей глиобластомой. Cancer Sci. 2013. 104 (2): 200–5. https://doi.org/10.1111/cas.12055.
CAS Статья PubMed Google ученый
Hayward CJ, Fradette J, Galbraith T., Rémy M, Guignard R, Gauvin R, et al. Использование потенциала пуповины человека: выделение и характеристика четырех типов клеток для применения в тканевой инженерии. Клетки Тканевые Органы. 2013; 197 (1): 37–54. https://doi.org/10.1159/000341254.
CAS Статья PubMed Google ученый
Пузанов М.В., Васильева Л.Б., Попова П.В., Гринева Е.Н., Дмитриева Р.И. Новый подход к криоконсервации первичного некультивируемого эндотелия пупочной вены человека в биобанках.Биопресерв Биобанк. 2018; 16 (2): 114–9. https://doi.org/10.1089/bio.2017.0086.
CAS Статья PubMed Google ученый
Moll G, Geißler S, Catar R, Ignatowicz L, Hoogduijn MJ, Strunk D, Bieback K, Ringdén O. Криоконсервированные или свежие мезенхимальные стромальные клетки: только вопрос вкуса или ключ к раскрытию полного клинического потенциала МСК-терапии? Adv Exp Med Biol. 2016; 951: 77–98. https://doi.org/10.1007/978-3-319-45457-3_7.
CAS Статья PubMed Google ученый
Chatzistamatiou TK, Papassavas AC, Michalopoulos E, Gamaloutsos C, Mallis P, Gontika I, et al. Оптимизация методов изолированной культуры и замораживания для сохранения свойств мезенхимальных стволовых клеток (MSC) желе Wharton: подтверждение банковского протокола MSC для банка пуповинной крови Греции. Переливание. 2014; 54 (12): 3108–20. https://doi.org/10.1111/trf.12743.
Артикул PubMed Google ученый
Da-Croce L, Gambarini-Paiva GH, Angelo PC, Bambirra EA, Cabral AC, Godard AL. Сравнение витрификации и медленного охлаждения тканей пуповины. Банк клеточной ткани. 2013. 14 (1): 65–76. https://doi.org/10.1007/s10561-012-9301-9.
Артикул PubMed Google ученый
Choudhery MS, Badowski M, Muise A, Harris DT. Использование криоконсервированной ткани пуповины для регенеративной медицины. Curr Stem Cell Res Ther. 2013. 8 (5): 370–80.
CAS Статья Google ученый
Лучший БП. Токсичность криопротекторов: факты, проблемы и вопросы. Rejuvenation Res. 2015; 18 (5): 422–36. https://doi.org/10.1089/rej.2014.1656.
Артикул PubMed PubMed Central Google ученый
Rodríguez L, Velasco B, García J, Martín-Henao GA. Оценка автоматического устройства обработки клеток для восстановления диметилсульфоксида из гемопоэтических трансплантатов после оттаивания.Переливание. 2005. 45 (8): 1391–7.
Артикул Google ученый
Du T, Chao L, Zhao S, Chi L, Li D, Shen Y, et al. Успешная криоконсервация цельного яичника овцы с использованием криопротектора, не содержащего ДМСО. J Assist Reprod Genet. 2015; 32 (8): 1267–75. https://doi.org/10.1007/s10815-015-0513-3.
Артикул PubMed PubMed Central Google ученый
Shivakumar SB, Bharti D, Subbarao RB, Jang SJ, Park JS, Ullah I, et al.Криоконсервация без применения ДМСО и сыворотки желеобразной ткани Уортона, выделенной из пуповины человека. J Cell Biochem. 2016; 117 (10): 2397–412. https://doi.org/10.1002/jcb.25563.
CAS Статья PubMed PubMed Central Google ученый
Рой С., Арора С., Кумари П., Та М. Простой бессывороточный протокол криоконсервации пуповины человека как источника мезенхимальных стволовых клеток студня Уортона. Криобиология.2014; 68 (3): 467–72. https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2014.03.010.
CAS Статья PubMed Google ученый
Симадзу Т., Мори Й., Такахаши А., Цунода Х, Тодзё А., Нагамура-Иноуэ Т. Криоконсервация ткани пуповины человека как источника мезенхимальных стромальных клеток без сыворотки и ксеносов. Цитотерапия. 2015; 17 (5): 593–600. https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2015.03.604.
CAS Статья PubMed Google ученый
Hartmann I, Hollweck T, Haffner S, Krebs M, Meiser B, Reichart B и др. Мезенхимальные стволовые клетки, полученные из ткани пуповины, лучше всего растут в условиях культивирования, соответствующих требованиям GMP, и сохраняют свои фенотипические и функциональные свойства. J Immunol Methods. 2010. 363 (1): 80–9. https://doi.org/10.1016/j.jim.2010.10.008.
CAS Статья PubMed Google ученый
Swamynathan P, Venugopal P, Kannan S, Thej C, Kolkundar U, Bhagwat S, et al.Идеальны ли условия культивирования без сыворотки и ксено для крупномасштабного распространения мезенхимальных стволовых клеток, полученных из желе Уортона, в клинических условиях? Сравнительное исследование. Stem Cell Res Ther. 2014; 5 (4): 88. https://doi.org/10.1186/scrt477.
Артикул PubMed PubMed Central Google ученый
Badowski M, Muise A, Harris DT. Смешанные эффекты длительного хранения в замороженном состоянии на стволовые клетки пуповинной ткани. Цитотерапия. 2014. 16 (9): 1313–21.https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2014.05.020.
CAS Статья PubMed Google ученый
Романов Ю.А., Балашова Е.Е., Волгина Н.Е., Кабаева Н.В., Дугина Т.Н., Сухих Г.Т. Выделение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток из криоконсервированной ткани пуповины человека. Bull Exp Biol Med. 2016; 160 (4): 530–4. https://doi.org/10.1007/s10517-016-3213-9.
CAS Статья PubMed Google ученый
Дулугиак М., Молдован Л., Зарнеску О. Сравнительные исследования мезенхимальных стволовых клеток, полученных из различных отделов ткани пуповины — влияние криоконсервации и питательной среды. Плацента. 2015; 36 (10): 1192–203. https://doi.org/10.1016/j.placenta.2015.08.011.
CAS Статья PubMed Google ученый
Фонг С.Ю., Субраманиан А., Бисвас А., Бонгсо А. Замораживание свежего желе Уортона из пуповины человека дает большое количество мезенхимальных стволовых клеток после оттаивания для клеточной терапии.J Cell Biochem. 2016; 117 (4): 815–27. https://doi.org/10.1002/jcb.25375.
CAS Статья PubMed Google ученый
Yang Y, Melzer C, Bucan V, von der Ohe J, Otte A, Hass R. Кондиционированная ткань пуповины обеспечивает естественное трехмерное хранилище в качестве ниши стволовых клеток in vitro для мезенхимальной стромы / ствола человека клетки. Stem Cell Res Ther.