Заведующий лаборатории [Институт химической биологии и фундаментальной медицины]
Пышный Дмитрий Владимирович
Зам. директора по научной работе
доктор химических наук, доцент,
Лауреат VII Конкурса молодых ученых Европейской Академии наук, Лауреат Премии журнала «Биоорганическая химия», лауреат Премии МАИК за лучшую публикацию.
телефон: (383) 363-51-51, Email
Пышный Д.В. доктор химических наук с 2012 г., доцент, специалист в области биорганической химии, физической химии нуклеиновых кислот и молекулярной биологии, соавтор 132 научных работ, получено 9 авторских свидетельств на изобретения. За последние годы им опубликовано 47 научных работ, полчено 4 авторских свидетельства на изобретения.
Основные направления научно-исследовательской деятельности Пышного Д.В. связаны с изучением физико-химических характеристик образования комплексов олигонуклеотидов и олигонуклеотидных производных;
разработкой подходов к созданию олигонуклеотидов с заранее заданной комплексообразующей способностью; разработкой новых подходов к выявлению точечных мутаций в ДНК;
синтезом моно и мультифункциональных производных олигодезоксирибонуклеотидов.
Результаты полученные Пышным Д.В. имеют, как фундаментальное значение в плане детального описания принципов распознования нуклеиновых кислот олигонуклеотидным конструкциями и создания терапевтических препаратов ген-направленного действия, так и прикладной характер, что нашло отражение в разработке высоко-селективных методов диагностики наследственных и инфекционных заболеваний.
В 2013 году под руководством профессора, лауреата Нобелевской премии по химии 1989 года Сиднея Альтмана и Пышного Д.В. в Институте создана новая Российско-американская лаборатория биомедицинской химии на мегагрант. Проект ориентирован на получение широкого спектра таких конструкций, а также выбор наиболее эффективных из них в плане биологического применения, а именно влияния на бактерии или развитие вирусов в клетках млекопитающих, в том числе человека.
Д.В. Пышный имеет опыт научно-организационный работы, с 2006 г. заместитель директора по научной работе ИХБФМ СО РАН.
Наука в Сибири | Дмитрий Пышный: «Мы подходим к финалу проекта, но не к финалу работы»
К окончанию мегагранта, направленного на создание лаборатории под руководством нобелевского лауреата Сиднея Альтмана, Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН подходит с набором перспективных для дальнейших исследований агентов — олигонуклеотидов. В результате, пройдя все проверки, они должны стать эффективным лекарством от ряда болезней, в частности, туберкулеза.
«Сам профессор Альтман именует такие соединения на основе олигонуклеотидов антибиотиками будущего», — отмечает заместитель директора ИХБФМ СО РАН доктор химических наук Дмитрий Владимирович Пышный.
Ученые уверены, что синтетические фрагменты нуклеиновых кислот (так называемые олигонуклеотиды) могут рассматриваться в качестве перспективных терапевтических препаратов будущего. «Основная идея сводится к следующему: как только мы определяем генетическую структуру какого-либо патогена, появляется возможность создать конструкцию, которая будет абсолютно специфично воздействовать только на геном этого «вредителя», — объясняет Дмитрий Пышный. — Но теоретические предпосылки разбиваются о практические моменты».
В частности, если рассматривать простые фрагменты нуклеиновых кислот, полные аналоги природных, то выясняется: такие соединения, несмотря на то, что легко синтезируются, не соответствуют целому набору критериев. Например, быстро разрушаются в биологических жидкостях. «В организме человека, как, впрочем, и у других, есть целый арсенал средств борьбы с чужеродными нуклеиновыми кислотами. В принципе, это понятно, природа любого живого существа должна защищаться от посторонней генетической информации, — комментирует Дмитрий Пышный.
По словам ученого, в подобных исследованиях в настоящее время наступил предреволюционный момент. Совсем недавно один американский препарат получил одобрение для использования в клинике, и сейчас компании, которые специализируются на создании олигонуклеотидных терапевтических агентов, сформировали целый список соединений, направленных на лечение самых разных заболеваний и близких к реализации в лекарствах.
«Вышеназванные производные запатентованы, и мы, понимая принципы их синтеза, по-хорошему, сами могли бы сделать подобное, но на платформе чужих работ не имеем права, — комментирует Дмитрий Пышный, — поскольку это не наша интеллектуальная собственность».
Однако в ИХБФМ СО РАН, незадолго до организации лаборатории под руководством Сиднея Альтмана, появились предпосылки к тому, чтобы создать новый тип производных, и в ходе проекта ученые заострили внимание на изучении фосфорилгуанидинов, ранее открытых группой сотрудников института.
Специалисты ИХБФМ СО РАН впервые описали фосфорилгуанидины, это полностью отечественная разработка. «Пока есть некоторые проблемы с обеспечением проникновения препарата внутрь клетки, но существуют и определенные наработки», — отмечает Дмитрий Пышный.
Фосфорилгуанидины оказались абсолютно стабильны в биологических жидкостях, в рамках выполненных испытаний пока не продемонстрировали никаких токсических эффектов, и уже есть первые данные, что такого рода структуры могут оказывать терапевтический эффект. Словом, соединения отвечают всем необходимым требованиям, к тому же достаточно легко синтезируются — это осуществляется при использовании стандартного оборудования и является очень важным моментом для перспективы коммерциализации. «Кроме того, — отмечает Дмитрий Пышный, — разработчики фосфорилгуанидинов, в числе которых кандидат химических наук Дмитрий Стеценко и Максим Купрюшкин, контактируют с коллегами из Москвы, Швеции и Великобритании, предоставляя им наши производные для анализа, и в испытаниях, проводимых, как говорится, чужими руками, также подтверждается наличие заданных свойств».
В качестве одной из мишеней для воздействия ученые видят туберкулез — показано, что есть перспектива борьбы с аналогом палочки Коха. Также существует возможность влияния на генетические мутации, которые потенциально не имеют других вариантов лечения. «Например, дистрофия Дюшена, когда не развиваются мышечные волокна, — объясняет исследователь. — Такого рода производные вмешиваются в механизм созревания матричных РНК, направляя их в нужную сторону. В противном случае создается неправильная РНК и неправильный белок, что приводит к патологии. Производные олигонуклеотидов делают РНК полупригодной, и таким образом достигается терапевтический эффект». По словам ученого, итоговая форма препарата — инъекционная. Частота употребления зависит от заболевания: если это инфекция, то схема лечения будет подобна используемой для антибиотиков, при генетических недугах — регулярная поддерживающая терапия.
Однако до массового применения еще далеко.
Как объясняет Дмитрий Пышный, основная задача ученых — фундаментальные исследования, нужно найти кандидатов для предклинических и клинических испытаний. «У нас сейчас есть наиболее перспективные агенты, но еще предстоит ряд работ в завершение цикла гранта, чтобы обосновать выбор и точно определиться. Сейчас мы на этапе подхода к in vivo. В институте есть необходимая собственная база, чтобы провести все этапы доклиники, но мы думаем сотрудничать и с ФИЦ Институт цитологии и генетики СО РАН, и с SPF- виварием», — говорит ученый.
«Мы подходим к финалу проекта, но не к финалу работы,— подчеркивает Дмитрий Пышный. — Российско-американская лаборатория биомедицинской химии, безусловно, будет сохранена, исследования продолжатся, в чем убежден директор ИХБФМ СО РАН академик Валентин Власов. Кстати, и профессор Альтман проявляет искреннюю заинтересованность в дальнейшем сотрудничестве».
Екатерина Пустолякова
Фото: С.
Поделись с друзьями:
2 отзыва, запись на приём, где принимает – Москва – НаПоправку
Буду писать жалобу
К Дмитрию Владимировичу я записывался на увулопалатофарингопластику и впечатления у меня остались такие, что я, наверное, буду писать жалобу на этого врача в вышестоящие инстанции, чтобы знали, кто какие делает операции. Мне нужно было подрезать язычок, который свисает с мягкого неба, он это сделал, но при этом пропалил, ранил мне мягкое небо. Я ничего не почувствовал, потому что действовала заморозка, а потом уже увидел, что у меня там рана. Когда же я спросил у Дмитрия Владимировича, зачем он это сделал, надрезал, или что, он в этом еще и меня обвинил, сказал, что я дергался. Но я никуда не дергался, сидел спокойно, а вместо извинений врач обвинил меня в своей же ошибке! Ну замечательно! А между прочим, он кандидат медицинских наук, ладно бы, простой доктор был, еще как-то можно было бы понять, но с таким званием, тут уж я не знаю.
.. Такие врачи подобные ошибки допускать не должны! Сейчас у меня две раны во рту, одна от операции и вторая, которая больше по размеру, и болит, и саднит гораздо сильней. Как мне кажется, может быть язычок был немного толстоватый и когда врач срезал его, то нажал посильнее, рука сорвалась и он мне врезался в мягкое небо и обжег его. В качестве оценки врачу, наверное, поставлю не единицу, а двойку. Он вежливый человек, участливый, ничего не скажешь, сумел вызвать у меня доверие. Но вот не знаю, насколько он профессионал, сама операция вызвала у меня вот такие последствия. Сейчас я пока не буду ни у кого наблюдаться, Дмитрий Владимирович мне сказал, что всё заживет само, выписал препараты. Естественно, заживет, но это очень болезненно! Если бы все же врач хотя бы извинился, а не с улыбкой сказал, что я сам виноват! А если бы я не обратил его внимание, он, возможно, и вовсе умолчал бы об этом. “Все замечательно, все прекрасно, все у Вас хорошо заживает”. Кроме того, когда я сдавал кровь перед операцией, медсестра клиники МедикСити вообще, можно сказать, на ровном месте, мне нахамила.
В кабинете кресло, у которого правый подлокотник расположен возле стены, то есть предполагается, что кровь нужно брать из левой руки. А у меня на левой руке очень тонкие вены, их не видно, по этой причине мне всегда берут кровь из правой руки. Я сказал об этом медсестре, обратился к ней с просьбой, так она начала нервничать, орать: “Сидите там!”. Я честно скажу, сильно удивился этому, а сейчас у меня синяк на полруки! Может, это и ерунда, но клиника взяла с меня 15000 за одну операцию, плюс расходы, анализы, это уже 16800, и они мне хамят! Я не понимаю, что это вообще такое! Само собой, клинике также нужно поставить отдельную оценку за эти два инцидента, один из которых вообще ужас — практически доктор наук делает такую ошибку. Естественно, в эту клинику я больше никогда ни за что не обращусь и клинике могу поставить не больше единицы.
Пышный Дмитрий Владимирович — прием 2700 ₽ Лор (отоларинголог) отзывы, адрес где принимает в Москве
Пышный Дмитрий Владимирович, найдено отзывов: 22 , опыт работы: 21 год
- Обладает опытом оказания неотложной и плановой помощи пациентам с заболеваниями уха, горла и носа;
- владеет современными методиками эндоскопических исследований и различных операций в полости носа, носоглотке, глотке и околоносовых пазухах: аденотомия; тонзилэктомия; пластика перегородки носа; удаление кист гайморовых пазух; удаление полипов полости носа; функциональные эндоскопические операции в полости носа при хронических синуситах; лечение храпа; операции с использованием лазера и радиочастотного хирургического аппарата Сургитрон.
Пышный Дмитрий Владимирович Лор (отоларинголог)
Образование
- Диплом по специальности «Лечебное дело», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, г. Санкт-Петербург (1996 г.)
- Интернатура по специальности «Оториноларингология», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, г. Санкт-Петербург (1997 г.)
- Аспирантура по специальности «Оториноларингология», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова, г. Санкт-Петербург (1999 г.)
Курсы повышения квалификации
«Ринопластика» (2005 г.) «Оториноларингология», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова (2006 г.) «Функциональная эндоскопическая хирургия околоносовых пазух, функциональная септопластика, функциональная эстетическая хирургия носа», O.Kaschke, H.Berhmbohm, г. Санкт-Петербург (2007 г.) «Новые технологии диагностики и лечения в оториноларингологии», г. Москва (2009 г.) «Лазерная хирургия в ЛОР практике», г. Москва (2010 г.) «Оториноларингология», Военно-медицинская академия им.
С.М.Кирова (2011 г.) «Эндоскопическая хирургия носа, околоносовых пазух и основания черепа», г. Вена, Австрия (2012 г.) «Современная функциональная ринохирургия», г. Москва (2013 г.) «Фармакотерапия болезней уха, горла и носа с позиций доказательной медицины» (2013 г.) «Диагностика и лечение плоскоклеточного рака головы и шеи», г. Москва (2014 г.) «Избранные вопросы эндоскопической и лазерной хирурги ЛОР-органов», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова (2015 г.) «Патология носа. Современные аспекты этиологии, патогенеза, диагностики и лечения заболеваний и повреждений носа и околоносовых пазух у детей и взрослых», Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. Владимирского (2015 г.) «Оториноларингология», Военно-медицинская академия им. С.М.Кирова (2016 г.) «Основы лазерной медицины», Государственный научный центр лазерной медицины ФМБА России (2017 г.) «Фармакотерапия болезней уха, горла и носа с позиций доказательной медицины» (2017 г.)Опыт работы
Врач Пышный Дмитрий Владимирович записаться на приём
Наша команда каждую минуту проверяет график работы для приёма у врача Пышный Дмитрий Владимирович, а также стоимость приёма в различных клиниках, где принимает Пышный Дмитрий Владимирович.
Если вам не подходит график, место или условия приема, которые предлагает Пышный Дмитрий Владимирович и вы хотите найти другого специалиста по направлению Лор (отоларинголог), сервис ГлавВрач поможет найти нужного специалиста. Для этого предлагаем перейти на главную страницу и задать подходящие критерии. Наш сервис работает молниеносно!Что лечит отоларинголог? Данный специалист широкого профиля занимается патологиями ЛОР-органов, таких как ухо, горло, нос, а также ткани головы и шеи.
Когда нужно обратиться к отоларингологу? К специалистам отоларингологам обращаются как по поводу травм и инородных тел органов слуха, обоняния и респираторной системы, так и при различных воспалительных заболеваниях, функциональных нарушениях или болевых ощущениях неясной этиологии.
Прием у отоларинголога. Длительность приема специалиста по ЛОР-заболеваниям может варьировать от 5 до 15 минут в зависимости от целей и сложности клинической картины. В арсенале доктора имеются специальные визуализирующие приборы, позволяющие оценить характер патологических изменений, такие как ларингоскоп, отоскоп и риноскоп.
В ходе обследования ведется сбор анамнеза, визуальный осмотр и забор биоматериалов для последующих исследований.
Приручение древней молекулы Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»
Приручение древней молекулы
РНК всегда были в центре внимания исследователей, а в новосибирском Институте химической биологии и фундаментальной медицины (ИХБФМ) — даже раньше, чем он стал институтом. Еще в 1960-х гг., когда будущий институт был всего лишь Отделом биохимии в составе Новосибирского института органической химии СО РАН, его руководитель Д. Г. Кнорре с коллегами сформулировал идею комплементарно адресованной модификации — «нацеливания» по принципу комплементарное™ на молекулы РНК других, коротких, молекул нуклеиновых кислот (олигонуклеотидов), несущих химически активные группы. Сотрудники ИХБФМ внесли большой вклад в изучение транспортной РНК и рибосом, в проверку гипотезы «мира РНК» и в создание новых методов химического синтеза молекул РНК. Не обошли вниманием в институте и каталитические РНК — рибозимы. Поэтому предложение создать в составе института лабораторию под руководством нобелевского лауреата, открывшего каталитические свойства РНК, возникло совершенно естественно и было поддержано Министерством образования и науки, выделившим для этого один из своих немногочисленных и крайне престижных мегагрантов
ЖАРКОВ Дмитрий Олегович -доктор биологических наук, заведующий группой взаимодействий биополимеров Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск). В течение восьми лет работал в лаборатории А. Гроллмана (США). Автор и соавтор 80 научных работ
ВЛАСОВ Валентин Викторович -академик РАН, председатель Объединенного ученого совета СО РАН по биологическим наукам, директор Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск), ;аведующий кафедрой молекулярной иологии Новосибирского государственного университета.
ауреат государственной премии РФ |(1999). Автор и соавтор более 60 научных работ и 29 патентов
лючевые слова: некодирующие РНК, комплементарно адресованная модификация, РНК-интерференция, стволовые клетки, геномное редактирование. еу words: non-coding RNA, targeted nucleic acid modification, RNA interference, stem ells, genome engineering
ПЫШНЫЙ Дмитрий Владимирович — доктор химических наук, заместитель директора по научной работе, заведующий лабораторией бионанотехнологии Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН (Новосибирск). Автор и соавтор более 140 научных работ и 10 патентов
© В. В. Власов, Д. О. Жарков, Д. В. Пышный, 2014
В. В. ВЛАСОВ, Д. О. ЖАРКОВ, Д. В. ПЫШНЫЙ
Вначале было слово из трех букв. И слово это было — РНК…
Когда С. Альтман начал заниматься ферментом РНКазой Р, которая в конце концов принесла ему Нобелевскую премию, в биологии бытовало совершенно однозначное мнение: все катализаторы в клетке — это белки. Мнение это было подкреплено Нобелевской премией (1946) американских биохимиков Д. Самнера, Д. Нортропа и У. Стэнли, ставшей эпохальным событием: американское трио доказало, что ферменты — это биологические катализаторы, т. е. представляют собой конкретные химические соединения. Тем самым была окончательно похоронена идея витализма, «жизненной силы», пронизывавшая всю биологию до XX в.
С тех пор белковая природа ферментов сомнению не подвергалась. Поэтому Альтман и его коллега Т. Чех, открывший каталитическую роль РНК в удалении из самой себя некодирующих участков (интронов), приложили очень большие усилия, чтобы опубликовать свои результаты, которые не вписывались в тогдашнюю парадигму. Но настоящая наука тем и отличается, что даже самые невероятно выглядящие результаты быстро превращаются в общепризнанные факты, если их в состоянии воспроизвести другие ученые. Признание к Чеху и Альтману пришло очень быстро: их пионерные статьи появились в 1982 и 1983 гг., а премия нашла своих героев в 1989 г. — по нынешним временам, практически мгновенно.
Работа Альтмана и его коллег вызвала всплеск интереса к РНК. Еще одна несокрушимая парадигма тех времен — так называемая «центральная догма молекулярной биологии», гласила, что РНК (а именно матричная РНК, мРНК) служит переносчиком информации между ДНК и белком. Были хорошо известны и некоди-рующие РНК: рибосомная и транспортная, играющие главные роли в процессе трансляции — синтеза белка по матрице РНК.
На этом функции РНК в клетке считались исчерпанными. Впрочем, уже тогда были известны короткие ядерные РНК с неясными функциями, но вряд ли кто-нибудь в то время ожидал от РНК каких-то сюрпризов. Однако и сам создатель цетральной догмы биологии Ф. Крик, и некоторые другие известные ученые, занимавшиеся происхождением жизни (Л. Оргелл, К. Вёзе), высказывали идею, что когда-то, на заре жизни, РНК могла играть большую роль, чем сейчас. Но эти теории основывались на очень косвенных соображениях. Например, что многие ферменты-белки работают только в присутствии «помощников» — коферментов нуклеотид-ной природы, — которые, возможно, представляют собой «ископаемые останки» предковых форм всего живого.
Открытие ферментов-РНК (далее мы будем использовать общепринятый термин «рибозим») перевернуло
представление о том, что эта молекула может делать и чего не может. В 1986 г. еще один нобелевский лауреат У. Гилберт впервые произнес слова «мир РНК», подразумевая наш мир на самых ранних стадиях эволюции, когда не было еще ни ДНК, ни белков, и за «выживание» конкурировали между собой лишь самовоспроизводящиеся каталитические молекулы РНК.
С тех пор в пользу этой смелой гипотезы находятся все новые и новые подтверждения. Число известных рибозимов, как природных, так и искусственных, измеряется уже сотнями, а роль РНК проявляется во все новых и новых биологических системах. Забавный факт: в 1998 г. в Норвегии даже появилась рок-группа под названием «ШЬо7уше».
РНК тут, РНК там
И все же одного лишь открытия рибозимов было бы недостаточно, чтобы РНК из скромного промежуточного звена между главным хранителем генетической информации, ДНК, и главными исполнителями клеточных функций, белками, превратилась в центральный элемент, связующий воедино огромную долю процессов клеточной жизнедеятельности. В конце концов, по сравнению с белками число рибозимов очень мало, а функции их в природе ограничены. Но после работ Альтмана и Чеха РНК стала преподносить сюрпризы чуть ли не каждый год!
Какие же новые функции этой молекулы стали известны за пределами простой схемы Крика, в которой фигурировали только матричная, рибосомная и транспортная РНК? Начать можно, собственно, никуда от нее не уходя: оказывается, в такой сложной структуре, как рибосома (которая даже у бактерий состоит из трех цепей разных рРНК и нескольких десятков белков), главную реакцию — образование пептидной связи — катализируют не белки, а одна из молекул РНК!
Случаев, когда РНК выполняет каталитическую функцию, находясь в комплексе с белками, или организует сборку функционального РНК-белкового комплекса, сегодня известно очень много. Один из самых красивых и важных примеров такого комплекса — фермент тело-мераза, существование которого сначала «на кончике пера» предсказал советский ученый А. М. Оловников, а затем его открыли американские биологи Э. Блэкберн и К. Грейдер, удостоенные за это Нобелевской премии.
Как известно, у человека и всех эукариот хромосомы линейные, а синтез концов линейной ДНК представляет особую проблему: из-за особенностей механизма инициации синтеза ДНК каждый цикл клеточного деления теоретически должен сопровождаться утерей ее у самого конца. Однако особая структура концевых последовательностей ДНК (теломер) позволяет обойти эту проблему.
85
Впервые репликация теломеров была исследована Блэкберн и Грейдер у инфузории Tetrahymena, у которой в ядре соматической клетки имеется много тысяч линейных минихромосом. Теломеры состоят из большого числа консервативных коротких гексамерных повторов: у человека — ТТЛООО, у Tetrahymena — ТТОООО. В активно делящихся клетках присутствует специальный фермент для репликации концов ДНК — теломераза, которая у инфузории содержит небольшую молекулу РНК, а в этой РНК имеется последовательность ЛЛССССЛЛС.
Нетрудно увидеть, что эта последовательность комплементарна полному гексамерному повтору и еще его половине. Теломераза связывает конец ДНК, достраивает шесть нуклеотидов ОООТТО по матрице своей РНК, а затем сдвигается опять же на шесть нуклеоти-дов так, чтобы повторить весь цикл. В этом случае все ферментативные функции выполняет белковая часть теломеразы, а РНК используется только как матрица для синтеза.
Подобных функциональных рибонуклеопротеинов в клетке предостаточно. Процесс сплайсинга (удаления из мРНК интронов) выше уже упоминался в связи с открытием Чехом рибозимов. Любопытно, что он открыл рибозимы для сплайсинга в той же инфузории Tetrahymena, так что этот скромный организм прочно вписал себя в историю молекулярной биологии.
Так или иначе, но у большинства организмов, в том числе и человека, сплайсингом занимаются не рибо-зимы в чистом виде, а так называемые малые ядерные рибонуклеиновые частицы, представляющие собой комплексы РНК с белками, в которых РНК играет и структурную, и каталитическую роль. Или другой, достаточно неожиданный пример: оказывается, что белки, секретируемые клеткой, при синтезе пересекают мембрану эндоплазматической сети, а для этого они взаимодействуют с так называемой «частицей, узнающей сигнал» (8ИР) — рибонуклеопротеином, состоящим из одной молекулы РНК и шести белков.
В начале 2000-х годов были открыты и так называемые рибосвитчи — РНК-переключатели биохимических процессов. Это участки молекул мРНК, которые сами 86 ничего не кодируют, могут, связывая какую-то сигнальную молекулу в клетке, менять свою структуру и тем самым влиять на процесс транскрипции. Например, тиаминовый рибосвитч, открытый российскими учеными из Института генетики и селекции промышленных микроорганизмов (Москва), связывается с тиаминпи-рофосфатом — производным витамина Б4, что снижает трансляцию мРНК генов, участвующих в синтезе витамина Бг Раз этого витамина много, клетке можно не тратить силы на его производство.
Очень часто мы знаем, что в каком-то клеточном процессе участвует некодирующая РНК, но не можем
пока определить механизм, по которому этот процесс происходит. Например, во всех клетках женского организма одна из двух Х-хромосом сконденсирована и практически не принимает участия в синтезе белков. Для такой конденсации необходима некодирующая РНК множество копий которой как бы покрывает одну из Х-хромосом. Как именно РНК Х181 связывается с хромосомой, какая хромосома выбирается — до сих пор не очень понятно. Кстати, в исследование функций этой РНК внесли большой вклад новосибирские ученые из лаборатории С. М. Закияна Института цитологии и генетики СО РАН.
А для того чтобы в клетке человека началась репликация — удвоение генома, нужна так называемая У-РНК, которая связывается с точками начала репликации. Но что происходит дальше, пока остается тайной.
Наконец, некодирующие РНК часто выступают как регуляторы активности генов по принципу ком-плементарности — эта идея, высказанная академиком Д. Г. Кнорре, оказалась востребована самой природой. Взять, например, феномен РНК-интерференции, обнаруженный в 1998 г. американцами К. Мелло и Э. Файером. Кстати сказать, оказалось, что у растений подобное являение наблюдали еще в 1920-х гг., но тогда не смогли правильно истолковать. Суть его в том, что линейные двуцепочечные, или шпилечные, РНК могут подавлять экспрессию генов, содержащих гомологичные им последовательности. Усилиями многих ученых был очень скоро установлен механизм этого процесса. Как правило, при наличии точного комплементарного соответствия мРНК и коротких интерферирующих РНК (киРНК) происходит деградация мРНК, а при неполном комплементарном соответствии трансляция мРНК просто блокируется. Однако молекулярные детали этих процессов полностью еще не выяснены. РНК-интерференция может также регулировать структуру и уровень конденсации хроматина.
Когда механизм РНК-интерференции прояснился и стало понятно, что можно использовать ее для подавления экспрессии практически любого гена в клетке, ему начали придумывать разные полезные приложения. Сначала, разумеется, в лабораторной практике: подавление экспрессии гена при помощи РНК-интерференции, или нокдаун гена (по аналогии с нокаутом, т. е. удалением гена), прочно вошло в практику молекулярно-биологических лабораторий. Сейчас существуют даже специальные сервисы: вы даете им последовательность нужного гена, а они и интерферирующую РНК разработают и синтезируют генную конструкцию, которая будет эту РНК производить.
Но, конечно, лабораторными инструментами дело не ограничилось — на основе РНК-интерференции начали разрабатывать терапевтические средства. Первыми в клинических испытаниях стали исследовать
3′ ■■■■■■ тптт
Двуцепочечная РНК
‘ I’.P-5′
Расщепление РНК на короткие фрагменты
2 нт.
2 нт.
3′-HO
OH-3′
Расплетение двуцепочечной РНК
Короткая интерферирующая РНК (киРНК)
1-i—Г 3′
Комплекс RISC
Сборка комплекса RISC
5-| 1 ■. 1 11 .. 1 м
(7 b (7b
Полная комплементарность киРНК и мРНК — деградация мРНК
\ /
мРНК
Неполная комплементарность киРНК и мРНК — репрессия трансляции
Суть механизма РНК-интерференции заключается в подавлении экспрессии генов линейными двуцепочечными или шпилечными РНК, ссодержащими гомологичные им последовательности. Сначала фермент-эндонуклеаза Dicer расщепляет такие РНК на короткие двуцепочечные РНК длиной 21—22 пары нуклеотидов, содержащие выступающие З’-концы по два нуклеотида. Такие РНК затем «расплетаются» другим ферментом — РНК-геликазой Armitage. Эта стадия очень важна, потому что именно в это время определяется, какая из двух коротких цепочек будет работать дальше — «рабочей» цепочкой становится та, 5′-конец которой в дуплексе менее стабилен и легче расплетается. Далее на этом одноцепочечном кусочке РНК («короткой интерферирующей РНК», киРНК) собирается комплекс RISC, в состав которого входит, в частности, белок Argonaut, который опосредует образование комплементарного дуплекса между киРНК и конкретной мРНК, регулируемой при помощи РНК-интерференции
87
интерферирующие РНК для обращения дегенерации сетчатки глаза и лечения инфекции респираторным синцитиальным вирусом, который вызывает больше всего заболеваний дыхательных путей у новорожденных и маленьких детей. Этим дело не ограничилось — сейчас готовятся к клиническим испытаниям и антивирусные РНК против герпеса, гепатитов А и В, вируса иммунодефицита человека, гриппа, кори и даже онкологичесих заболеваний.
РНК-интерференция нашла свое место даже в сельском хозяйстве. Так, известная биотехнологическая фирма «Монсанто» сейчас работает над сортами культурных растений, производящих инсектицидные интерферирующие РНК. А американские ученые вывели сорт хлопка, семена которого съедобны, потому что в них методом РНК-интерференции нарушено производство токсина госсипола.
К концу прошлого столетия оставался неясным один момент. Если в клетке есть специальный механизм, работающий с молекулами РНК, которые вводят в клетку исследователи, значит, это, наверное, неспроста? Иначе зачем клетке содержать несколько белков, которые выполняют скоординированную работу по использованию того, что «подсунули» ей ученые?
И вот, в начале 2000-х гг.ат, модельном организме для генетики развития, но в то время сущность этого открытия не была понята.
МикроРНК в клетке образуются из РНК таким же способом, как и искусственно внесенные двуцепочеч-ные РНК: сначала молеклы нарезаются на куски, а затем идет процесс, аналогичный РНК-интерференции. С тех пор были открыты сотни микроРНК: по всей видимости, они входят в число важнейших регуляторов активности генов человека.
больных, поскольку лекарства убивают не только болезнетворных бактерий, но и полезных обитателей нашего желудочно-кишечного тракта.
Так возникла идея использовать для борьбы с патогенами ген-направленные соединения, которые будут убивать только вполне определенный микроб и не трогать другие. Ведь если строение бактериального гена известно, можно синтезировать подходящий олигонук-леотид — цепочку РНК, ДНК или каких-то модифицированных нуклеиновых кислот, которая «прилипнет» именно к конкретной нуклеиновой кислоте. Если к этой направляющей части присоединить молекулу, которая будет поражать нуклеиновую кислоту-мишень, то мы получим ген-направленный реагент, который будет действовать только на целевой геном. Конечно, нужно еще научиться защищать такое лекарство от разрушения в организме, сделать его нетоксичным, а главное — «научить» его проникать внутрь клетки.
В работе по мегагранту с российской стороны участвуют и химики, которые синтезируют нуклеиновые кислоты, и микробиологи, испытывающие эти соединения на реальных мишенях. Некоторых целей уже удалось достичь — так, создан вариант олигонуклеотида, который не разрушается в крови.
А вот проблема доставки препарата в бактериальные клетки пока остается неприступной. Для ее решения специалисты ИХБФМ СО РАН испытывают природные переносчики в виде разнообразных пептидов.
Параллельно идет работа над олигонуклеотидным препаратом против вируса гриппа — это относительно простая задача, потому что вирусные нуклеиновые кислоты уже находятся в инфицированной клетке человека, куда попасть гораздо легче, чем в бактериальную, окруженную плотной белково-полисахаридной оболочкой. В общем новосибирские ученые одновременно просчитывают много вариантов, и вполне вероятно, что какой-то из них окажется выигрышным.
Россииские нуклеиновые кислоты
Задача у новосибирской лаборатории С. Альтмана, со-88 зданной на средства мегагранта, не из простых: создать новый вид соединений для лечения бактериальных, вирусных и протозойных инфекций. Микробы стали сейчас устойчивыми ко многим антибиотикам, и если смотреть правде в глаза, то становится ясным, что современное здравоохранение висит на волоске, ведь уже появились штаммы стафилококка и туберкулезной палочки, устойчивые практически ко всем известным антибиотикам. С другой стороны, бесконтрольное применение антибиотиков не только провоцирует развитие лекарственной устойчивости, но и опасно для самих
Новые трюки прирученной РНК
В институтской лаборатории нобелевского лауреата сейчас разворачивается и большой проект по «приручению» РНК для еще одной цели — клеточной терапии.
У этого направления есть своя занимательная и богатая история. Можно сказать, что она берет начало от овечки Долли, которую клонировал в 1996 г. из клетки вымени шотландец И. Вилмут. Для подобного клонирования — так называемого «переноса ядра соматической клетки» — требуется яйцеклетка, из которой удаляют ядро, и клетка-донор, из генетического материала которой потом развивается организм. На самых первых этапах развития клетки эмбриона, получившиеся
?
Новые лекарства
е л
ш*
«Больные» клетки
Пациент
Трансплантация
Сбор клеток
Факторы репрограммирования
Коррекция гена
Пациент-специфичные индуцированные плюрипотентные стволовые клетки
Здоровые клетки А
ф ф
С-
Исправленные индуцированные плюрипотентные стволовые клетки
Новая парадигма лечения инфекционных и наследственных болезней базируется на возможности получить почти из любой клетки тела плюрипотентные клетки, способные превратиться в любую клетку взрослого организма. Современные молекулярно-генетические технологии открывают перспективы создания настоящей персонализированной медицины, а также практически неограниченные возможности создания эффективных и безопасных лекарств
в результате такого переноса, сохраняют свою плюри-потентность, т. е. способность превратиться в любую клетку взрослого организма.
После работ Вилмута перед человечеством замаячила довольно страшная, с этической точки зрения, перспектива: взрослый человек, который хочет подлечиться, создает свой клон, из которого изымаются либо клетки на ранней эмбриональной стадии, либо органы — на стадии более поздней. И это не беспочвенные страхи: в современной медицине известны случаи, когда родители специально рожали здорового ребенка, чтобы он стал донором костного мозга для старшего брата или сестры, страдающих от какой-нибудь редкой наслед ственной болезни.
Гордиев узел этических проблем клонирования одним махом разрубил в 2006 г. японец С. Яманака, который нашел способ получать плюрипотентные клетки почти из любой клетки тела без необходимости создания и последующей разборки эмбриона. Оказалось, что 89 для этого необходимо ввести в клетку активно работающие копии всего четырех генов-регуляторов: Sox2, Oct4, Kf4 и c-Myc. В результате клетка печени, например, превращается в индуцированную плюрипотент-ную стволовую клетку (ИПС-клетку), которую потом можно подтолкнуть к преобразованию хоть в клетку печени, хоть в нейрон, хоть в лейкоцит. В исследованиях на лабораторных мышах даже было показано, что из таких клеток могут рождаться мышата, вырастающие во вполне здоровых и плодовитых мышей.
sgRNA
Целевая ДНК
Палиндромный участОк
Cas9
90
Открытие Яманаки дало надежду, что скоро мы научимся лечить почти любую наследственную болезнь. В самом деле, если бы из пациента можно было взять клетки, сделать из них ИПС-клетки, исправить в них генетический дефект и затем пересадить обратно пациенту, это помогло бы справиться со многими генетически обусловленными недугами.
Остается один маленький неясный момент: как исправить геном клетки? В принципе биологи уже умеют это делать, используя процесс гомологичной рекомбинации (таким образом с конца 1980-х гг. получают трансген-
Искусственная система редактирования геномов CRISPR/Cas создана по образу и подобию иммунной системы бактерий, направленной против ДНК бактериофагов. Система состоит из двух основных частей: некодирующей РНК (sgRNA) и белков-ферментов нуклеаз CAS. sgRNA с помощью Cas-белков присоединяется к протоспейсеру -комплементарному участку целевой ДНК. В месте посадки спейсера нуклеаза разрезает цепь ДНК-мишени. При репарации в место разреза возможно встроить любую донорскую молекулу ДНК
ных животных), но у этой процеруды слишком низкая эффективность. И опять решение пришло, откуда не ждали. Еще в 1987 г. в геноме бактерий были обнаружены многочисленные участки-повторы СЫ8РК, с которых синтезируются маленькие РНК. Оказалось, что бактерии используют их для защиты от вирусов-бактериофагов: с их помощью уничтожаются «вражеские» нуклеиновые кислоты, которые вирус впрыскивает в бактерию. Бактерии же умеют распознавать это вторжение и посылают небольшие кусочки РНК, чтобы они связались с нуклеиновой кислотой «агрессора». Эти РНК действуют не сами по себе, а в комплексе с белком Саз9, который расщепляет ДНК или РНК вируса.
Но почему бы подобную систему использовать не только против вируса? Достаточно создать нужную нацеливающую РНК — и система СЫ8РК/Са89 расщепит любую ДНК, какую мы захотим. А если в это же время ввести в клетку «донор» генетического материала (например, олигонуклеотид с исправленной последовательностью), то разрыв будет исправлен клеточными системами репарации ДНК. Таким образом, в геноме можно исправить любую мутацию. Справедливости ради стоит отметить, что это не единственный способ редактирования генома, но, по-видимому, система СЫ8РК/Са89 является самой эффективной.
Разумеется, новосибирские ученые обратили внимание на такой многообещающий инструмент. С его помощью они собираются получить клетки, которые несут мутации, встречающиеся у пациентов с болезнью Альцгеймера, болезнью Паркинсона и некоторыми другими наследственными заболеваниями. Такие клетки очень нужны исследователям, занимающимся поиском новых лекарств, ведь только клетки человека могут дать наиболее правильные представления о том, как развивается болезнь. Эксперименты на животных здесь зачастую вообще неприменимы, например, болезни Альцгеймера не подвержены даже человекообразные обезьяны. И наоборот, из клеток больных наследственными заболеваниями с помощью этой системы можно делать нормальные, здоровые клетки. Для этого ученые ИХБФМ в сотрудничестве с Институтом патологии кровообращения им. Е. Н. Мешалкина выбрали синдром длинного интервала QT — одну из частых причин наследственных болезней сердца.
Но даже для для такого хорошего редактора геномов, как СЫ8РК/Са89, эффективность процесса оставляет желать лучшего. Понятно, что способы его усовершенствования имеются, ведь первые работы по геномному редактированию с использованием этой системы вышли в свет только в 2013 г.
Узкое место процесса — репарация разрыва ДНК с использованием донорного олигонуклеотида в качестве матрицы, так как эта реакция проходит с не очень высоким выходом. Однако — такая удача! — репарация
ДНК также входит в число основных научных интересов ИХБФМ.
Одно из подразделений института — группа взаимодействий биополимеров, занимается разработкой новых конструкций донорных олигонуклеотидов, которые должны резко повысить эффективность геномного редактирования. Более того, процесс репарации ДНК востребован и в конверсии обычных клеток в плюри-потентные, поэтому в группе также ведутся работы, поддержанные грантом Российского научного фонда, которые призваны значительно облегчить получение ИПС-клеток по сравнению с классической схемой Яманаки.
Представим теперь, что нам удалось исправить клетки и пересадить их обратно пациенту, где они начинают взаимодействовать со всем организмом. Читатель, не удивляйся — и здесь тоже замешана РНК! Совсем недавно было установлено, что клетки секретируют в кровь и другие биологические жидкости специальные частицы — экзосомы, состоящие из белка и РНК. Они, вероятно, представляют собой часть абсолютно нового механизма межклеточной сигнализации, при котором клетка передает часть генетического материала другим клеткам организма. Однако ни механизм образования экзосом, ни принципы, по которым отбираются для них белки и РНК, совершенно неизвестны. Но все эти вопросы также находятся в фокусе внимания новосибирских ученых.
Конечно, неправильно говорить, что РНК — это самая важная молекула жизни. Без ДНК и белков жизнь также была бы невозможна, а «мир РНК», скорее всего, давным-давно кончился бы, если бы природа не придумала современное разделение функций между ДНК, РНК и белком.
Однако можно безошибочно утверждать, что РНК из «бедного родственника» за последние четверть века превратилась в выдающийся член этой триады. Исследования, идущие в ИХБФМ СО РАН, призваны наилучшим образом использовать многочисленные функции РНК для направленного влияния на клетки, что позволит создать новые высокоэффективные технологии для медицины.
Литература
Власов В. В., Воробьев П. Е. Мир РНК: вчера и сегодня // НАУКА из первых рук. 2012. № 3 (45). С. 40-49.
Горман К., Файн Марон Д. Революция в мире РНК // В мире науки. 2014. №6. С. 70-77.
Григорович С. Вначале была РНК? В поисках молекулы первожизни // Наука и жизнь. 2004. № 2.
Работа поддержана грантом РНФ 14-24-00093
ИХБФМ СО РАН — Новосибирск — Директор
В базе данных ФГИС ЕРП Генеральной Прокуратуры РФ найдено 10 проверок в отношении ИХБФМ СО РАН
| С нарушениями | Без нарушений | Нет данных о результатах | |||
| 4 | 40% | 4 | 40% | 2 | 20% |
Последняя проверка
№ 542105337276 от 29 января 2021 годаВнеплановая выездная проверка
Орган контроля (надзора) из ФРГУ?
Цель проверки
Цель — обеспечение санитарно-эпидемиологического благополучия населения, защиты прав потребителей и соблюдения обязательных требований к товарам (работам, услугам), на основании приказа руководителя Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Поповой А. Ю. от 31.12.2020 года № 895 «О контроле за лабораториями, задействованными в проведении диагностических лабораторных исследований на COVID-19», изданного в целях реализации пункта 4 раздела 1 протокола заседания оперативного штаба по предупреждению завоза и распространения новой коронавирусной инфекции на территории Российской Федерации от 22.12.2020 года № 34кв. Задачи — предупреждение, обнаружение, пресечение нарушений законодательства РФ в области обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения, защиты прав потребителей и соблюдения обязательных требований к товарам (работам, услугам). Предмет — соблюдение обязательных требований
Согласно данным ЕГРЮЛ, организация ИХБФМ СО РАН — или ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ИНСТИТУТ ХИМИЧЕСКОЙ БИОЛОГИИ И ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК — зарегистрирована 12 октября 1994 года по адресу 630090, Новосибирская область, г. Новосибирск, пр-т Академика Лаврентьева, д. 8. Налоговый орган — межрайонная инспекция Федеральной налоговой службы №16 по Новосибирской области.
Реквизиты юридического лица — ОГРН 1025403659852, ИНН 5408100233, КПП 540801001. Регистрационный номер в ПФР — 064009001395, регистрационный номер в ФСС — 540700000354071. Организационно-правовой формой является «Федеральные государственные бюджетные учреждения».
Основным видом деятельности ИХБФМ СО РАН является «Научные исследования и разработки в области естественных и технических наук прочие». Организация также зарегистрирована в таких категориях ОКВЭД как «Подготовка кадров высшей квалификации», «Научные исследования и разработки в области биотехнологии», «Управление имуществом, находящимся в государственной собственности», «Деятельность организаций судебно-медицинской экспертизы», «Деятельность в области медицины прочая, не включенная в другие группировки» и других.
Директор — Пышный Дмитрий Владимирович.
На 30 мая 2021 года юридическое лицо является действующим.
Врач Пышный Дмитрий Владимирович в Москве — запись на приём, отзывы
Информация о враче
Образование
1996 — Базовое образование, Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова (лечебное дело)
1999 — Аспирантура, Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова (оториноларингология)
1999 — Интернатура, Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова (оториноларингология)
2016 — Повышение квалификации, Государственный институт усовершенствования врачей МО РФ (оториноларингология)
Квалификация
2005 — Интенсивный курс по пластической и реконструктивной хирурги (ринопластика – профессор В.Губиш, Германия), г. Москва
2006 — XVII съезд оториноларингологов Российской Федерации г. Нижний Новгород
2007 — Функциональная эндоскопическая хирургия околоносовых пазух, функциональная септопластика, функциональная эстетическая хирургия носа — курс профессоров клиники Шаритэ (г. Берлин) O.Kaschke, H.Berhmbohm
2009 — Всероссийская научно-практическая конференция «Новые технологии диагностики и лечения в оториноларингологии, г. Москва
2010 — Лазерная хирургия в ЛОР практике, г. Москва
2012 — V Международный конгресс «Эндоскопическая хирургия носа, околоносовых пазух и основания черепа» г. Вена, Австрия
2013 — Современная функциональная ринохирургия, г. Москва
2013 — Х юбилейный конгресс Российского общества ринологов
2013 — Фармакотерапия болезней уха, горла и носа с позиций доказательной медицины
2014 — Диагностика и лечение плоскоклеточного рака головы и шеи (академическая научно-практическая школа, профессор Решетов И.В.), г. Москва
2015 — Мастер-класс «Избранные вопросы эндоскопической и лазерной хирурги ЛОР-органов» при кафедре оториноларингологии ВМедА им. С.М. Кирова под руководством профессора В.В.Дворянчикова, г.Санкт -Петербург
2015 — Патология носа. Современные аспекты этиологии, патогенеза, диагностики и лечения заболеваний и повреждений носа и околоносовых пазух у детей и взрослых, МОНИКИ им. Владимирского, г. Москва
2017 — «Основы лазерной медицины», курс при ГНЦ ЛМ ФМБА России, г. Москва
2017 — Фармакотерапия болезней уха, горла и носа с позиций доказательной медицины
Катынь — Жемчужное ожерелье Святой Руси
Храм-памятник построен в память о тысячах жертв в годы политических репрессий и гонений за веру. Храм был спроектирован архитектором Дмитрием Владимировичем Пшеничниковым в стиле русского зодчества XV века. Первый камень церкви заложили первые лица Российской Федерации и Республики Польша — Владимир Путин и Дональд Туск. Храм-памятник был построен всего за два года.Освящение святыни состоялось 15 июля 2012 года. Святейший Патриарх Московский и всея Руси Кирилл совершил великое освящение храма в честь Воскресения Христова во время своего визита в Смоленск.
Перед храмом установлен памятник архиепископу Смоленскому (Остроумову) Серафиму, расстрелянному в 1937 году в Катынском лесу. Внизу Воскресенской церкви находится музей, посвященный истории православной церкви в период гонений XX века.В музее представлены документы, облачения, книги, личные вещи архиепископа Смоленского и Дорогобужского Серафима. В 2001 году архиепископ Серафим был прославлен Русской Православной Церковью в лице Святых новомучеников и исповедников Церкви
.В храме находится великолепный пятиъярусный иконостас, выполненный художественной мастерской Православного Свято-Тихоновского гуманитарного университета. В отдельной святыне находится икона «Смоленский собор всех святых».
Среди других почитаемых святынь храма — икона Божией Матери «Ченстохова», почитаемая как в России, так и в Польше.Он находится справа от иконостаса — это точный список иконы Божией Матери Ченстоховской из католического монастыря Ясна Гура в польском городе Ченстохова.
на иконе Катынских страстотерпцев изображения мучеников священников, иноков и мирян, пострадавших здесь, изображены самой Катыни как географическим местом.
Изображение святого священномученика Серафима (Остроумова), написанное по иконографическим канонам Православной Церкви, тем не менее сохранило портретное сходство, о чем можно судить по прижизненным фотографиям архиепископа Серафима в музее.Во дворе епископа есть паломническая гостиница, где может остановиться любой желающий, и трапезная с колокольней.
Язык не решается называть это место достопримечательностью и посещать мемориальную прогулку. Это важнее, чем мы думаем! Его должны посетить взрослые и дети, чтобы не стерлись в памяти об этой страшной трагедии, которая длилась более двадцати лет и унесла десятки тысяч жизней. Потому что, пока мы помним, есть надежда, что мы не повторим…
«Царь» Путин использует власть Кремля для определения будущего
МОСКВА (Рейтер) — Его часто сравнивают с царем, поэтому, возможно, неудивительно, что Владимир Путин развернул всю имперскую власть Кремля, чтобы представить свое политическое завещание в пятницу. .
Президент России Владимир Путин выступает перед Государственным советом в Московском Кремле 8 февраля 2008 года. Путин обвинил Соединенные Штаты в развязывании новой гонки вооружений на границах России в пятницу в речи, которая, вероятно, станет планом политики его преемника. REUTERS / Александр Натрускин
Высший эшелон российского общества был вызван в огромный и великолепный Георгиевский зал Кремля — первоначально часть царской резиденции в Москве — чтобы услышать президентское видение того, как Россия должна выглядеть через 12 лет.
Это событие вызвало особый интерес, потому что Путин, после восьми лет сосредоточения власти в своих руках, собирается отойти в сторону и назначить избранного преемника после выборов в следующем месяце.
Генералы общались с олигархами, муфтии общались с членами кабинета министров, губернаторы регионов встречали редакторов, а руководители шпионов прибыли одни, чтобы занять свои места под шестью огромными люстрами.
Роман Абрамович, самый богатый миллиардер России, был всего лишь одним из толпы, затерявшимся в море лиц позади.На президентских выборах заявились даже кандидаты от оппозиции.
На шахматной доске черных костюмов и белых рубашек, порванных генеральской фуражкой или тюрбаном муфтия, серый пиджак и брюки были верхом непринужденности.
Хотя Кремль телеграммой разослал приглашения «принять участие в расширенном заседании Госсовета Российской Федерации», участники не сомневались, что их мнение не требуется.
Связанное покрытие
Подробнее
Небольшая кафедра стояла на устланном красным ковром возвышении перед гигантской белой мраморной плитой в центре зала, на которой указаны имена более 10 000 российских военнослужащих, награжденных орден Св.Георгия за их героизм.
Незадолго до назначенного времени по залу разнесся шепот, когда Дмитрий Медведев, человек, которого Путин назначил своим преемником, вошел в зал вместе с Сергеем Ивановым, которого считали его ближайшим соперником.
Внезапно толпа замолчала. Под звуки церемониальной музыки диктор произнес имя президента, огромные позолоченные двойные двери распахнулись, и Владимир Владимирович Путин быстро прошел в зал, поднялся по красной ковровой дорожке и поднялся на помост.
Путин ухватился за край кафедры и начал оживленно читать свою речь. Публика внимательно слушала, особенно фигура в центре первого ряда.
Медведев резко выпрямился, без какого-либо заметного выражения на лице, пока его наставник обрисовывал, как Россия должна управляться в течение всего его будущего срока — и двух следующих сроков.
Как ни странно, Путин не упомянул ни Медведева, ни его преемника, ни даже «следующее правительство», говоря только о том, что необходимо сделать и что будет сделано.
Что задумал президент? Сможет ли он передать власть, когда его срок истечет в мае? Спросить не было — не успели закончиться его 50-минутное выступление, как Путин сошел с помоста и вернулся через двойные двери.
VIP-аудитория вышла из Большого Кремлевского дворца во двор, чтобы сесть в свои черные лимузины Mercedes и BMW с водителем.
Пара ошеломленных британских туристов наблюдала. «Здесь все дело в силе, не так ли?» сказал один другому.
Редакция Роберта Вудворда
Родители Лермонтова: биографии. Как звали родителей Лермонтова — общество
Михаил Юрьевич Лермонтов — гений русской поэмы. Я много знал о своей жизни и работе, много знал о матери и отце. Родители Лермонтова — люди непростой судьбы. Их жизнь pa
Содержимое
Михаил Юрьевич Лермонтов — гений русского стихотворения.О его жизни и работе известно много, не говоря уже о его матери и отце. Родители Лермонтова — люди непростой судьбы. Их жизненный путь и любовь были довольно трагичными.
Портреты М.Ю. Отец и мать Лермонтова
Известно, как звали родителей Лермонтова, что они принадлежали к дворянству. До наших дней сохранилось лишь несколько портретов неизвестных художников. На картинах изображены худенькая, болезненная и удивительно грустная девочка и молодой человек — родители Лермонтова.Портреты оставили память о том, кем были эти люди, подарившие миру великого поэта.
Мария Михайловна Арсеньева (Лермонтова)
Мать Михаила Юрьевича Лермонтова, единственная дочь Елизаветы Алексеевны и Михаила Васильевича Арсеньева, родилась 17 марта 1795 года. Девочка была хрупким, болезненным ребенком. Пережив смерть отца в 15 лет, она все больше и больше увлекалась чтением книг и музыкой. Как отмечали в своих мемуарах знавшие ее люди, она любила читать сентиментальные романы, которые воспитывали в ней удивительную мечтательность, будоражили воображение молодой девушки.
Мария Михайловна была очень музыкальна: играла на клавикорде и исполняла чувствительные романсы, слова которых записывала в свои альбомы, были еще сентиментальные элегии о любви и разлуке, дружбе и предательстве, французские акростихи. Можно сказать, что Мария Михайловна была обычной провинциальной барышней, из тех, о которых написано во многих романах. В Тарханах, родовом имении Марии Михайловны, ее запомнили как удивительно доброго и отзывчивого человека.Говорили, что худенькая бледная дама ходила по крестьянским домам и помогала людям.
Любовь Марии Михайловны Арсеньевой (Лермонтовой)
Характерной чертой чуткой натуры Марии Михайловны было эмоциональное напряжение, выражавшееся в порывистости: девушка всегда пыталась отстоять свои желания, доказать свою правоту, иногда даже вопреки мнению близких.
Так и случилось, когда встретились будущие родители великого поэта Лермонтова.Мария Михайловна познакомилась с недавно вышедшим на пенсию молодым красивым офицером Юрием Петровичем Лермонтовым. Твердо в своих решениях Мария Михайловна сразу заявила, что это именно тот человек, которого она искала, что он должен стать ее избранником. Будущие родители Лермонтова полюбили друг друга. Биография их переплетена.
Родственники категорически возражали против этого брака, и на то были причины: будучи потомками Столыпиных, Арсеньевы гордились своим дворянским семейством, их положение позволяло им иметь важные связи при дворе.Все это не позволило матери с радостью согласиться на брак дочери и Юрия Петровича. Но, несмотря на это, будущие родители Лермонтова не сдавались.
Юрий Петрович Лермонтов
Отец Лермонтова, Юрий Петрович, хоть и был дворянином, не принадлежал к дворянскому роду, особых заслуг не имел. Это беспокоило родственников Марии Михайловны. Единственное, чем мог гордиться избранник, — это его предок.Георг Андреев Лермонт был родом из Шотландии. Осенью 1613 г. он был принят в состав Московского государства, где в 1620 г. получил имение в Галиче Заболоцкой волости.
По традиции в своем роде Юрий Петрович Лермонтов выбрал военную карьеру. Окончил Первый кадетский корпус, который находился в Санкт-Петербурге, служил в Кексгольмском пехотном полку. Юрий Петрович участвовал в войне со Швецией и Францией, участвовал в боях. В связи с тяжелой болезнью был уволен с военной службы в звании капитана.Несмотря на состояние здоровья, во время войны с Наполеоном в 1812 году он участвовал в дворянском ополчении, организованном в Тульской губернии. Заметно подорвалось здоровье отца Лермонтова, ему пришлось долго лечиться.
Брак Юрия Петровича и Марии Михайловны
Действительно, избранник Марии Михайловны, по мнению многих, оказался на удивление красивым, начитанным и «услышанным», обаятельным, добрым и немного вспыльчивым, что особенно придал его образу романтики.У Юрия Петровича был существенный недостаток — он был беден: долги, постоянно заложенное имение, три незамужние сестры — все это не делало его привлекательным женихом, по мнению матери. Елизавета Алексеевна считала, что отставной капитан не способен ни на какое дело, а может заботиться только о барышнях. Как оказалось, сердце матери не ошиблось.
Но будущие родители Лермонтова стояли на своем. Их биография сообщает, что они были твердо уверены в своем намерении пожениться.В частности, Мария Михайловна уверенно стояла на своем. И Елизавета Алексеевна разрешила этот брак. В 1811 году состоялась помолвка, а в 1814 году в Тарханах — пышная свадьба молодых.
Семейная жизнь Лермонтовых
Родители Михаила Лермонтова долгое время не были счастливы. Мария Михайловна недаром упрекала мужа в многочисленных изменах. Однажды в следующей сцене Юрий Петрович вышел из себя и в приступе гнева очень сильно ударил жену кулаком по лицу.Нервное потрясение обострило болезнь Марии Михайловны: стала развиваться чахотка, которая преждевременно довела молодую маму до могилы.
Впоследствии Лермонтов-сын вспоминал, как сильно рыдал его отец, когда хоронили его мать. Но ничего не вернуть. Маленький Миша остался без матери, отец — без жены. Не простила зятя Елизавета Алексеевна, бабушка великого поэта; всю свою жизнь она считала его виновным в смерти единственной дочери.
Расставание отца и сына
После смерти жены отец Лермонтова переехал в родовое имение в Тульской волости. Маленького Мишу он оставил на попечение бабушки Елизаветы Алексеевны, которая очень старалась не отдать отцу единственного внука. По ее мнению, и не без оснований, Юрий Петрович не смог воспитать сына так, как хотели его аристократические родственники: он не мог тратить несколько тысяч в год на обучение ребенка языкам, рисованию, музыке и многому другому.
Существует неподтвержденная версия, что Елизавета Алексеевна предложила зятю 25 тысяч рублей, чтобы он не вмешивался в воспитание маленького Мишеля. Ведь бабушка, имея огромное состояние, таким образом составила завещание, чтобы внук станет ее единственным наследником только в том случае, если отец не будет принимать участие в его воспитании. В таком тяжелом состоянии Юрий Петрович был вынужден согласиться, и отношения отца и сына с тех пор ограничились редкими встречами.
Несмотря ни на что, отношения отца и сына отличались взаимной привязанностью: они с трудом переносили разлуку, их краткие встречи приносили радость общения, но расставание было окрашено безнадежной горечью. Отец всегда следил за успехами сына, гордился тем, чем он занимается, считал, что у Миши светлое будущее. И я не ошибся.
Юрий Петрович Лермонтов скончался 1 октября 1831 года, похоронен в селе Шипово Тульской губернии.Позже, в 1974 году, останки отца великого поэта перевезли в Тарханы.
Семейная трагедия
У родителей Лермонтова сложилась непростая судьба. Семейная трагедия ребенка, выросшего без родителей, нашла отражение в его творчестве. Он много раз говорил о своем горе — о ранней смерти матери, о «ужасной судьбе» жизни вдали от отца, невозможности общаться с тем, кого безмерно любишь. История сохранила не только имена родителей Лермонтова, но и печальные страницы их биографии.
Елизавета Алексеевна Арсеньева смогла пережить всех: рано умершую единственную дочь Марью Алексеевну и нелюбимого зятя Юрия Петровича, которого она всегда считала виновным в смерти дочери. И тот, кто был смыслом ее жизни, ее внук Мишенька. Великий поэт Михаил Юрьевич Лермонтов погиб на дуэли 15 июля 1841 года.
How Did James Corden Slim Down Clinical Proof
Amazon Best Sellers как Джеймс Корден похудел еще больше, предлагает своим клиентам доступ к программе видео упражнений.
У нее есть Cut Fat, как Джеймс Корден похудел золотой кулон на ее шее, сказала Лола. В форме сердца. О, я уверен, что есть звезда конкурса похудения 2020 Diet Pill it. Мое лицо было красным.
Но лучшая добавка хрома для похудения вскоре после этого, его лицо было вытянуто, как паутина, выплевывающая из его рта обычный, неуловимый ответ. Хорошо, идите , как Джеймс Корден похудел. Онлайн-продажа на. Выбросьте эту странную идею и перестаньте думать о ней.На этом замысел родителей Ке Лонга закончился.
Спасибо большое, спрошу Сати. Красивые девушки, как правило, любят класть на полку соревнования по похудению 2020 Lose Weight Pill, но Анджелина особенно дружелюбна.
Но почему он не надел это проклятое кольцо? Думаю, он яблочный уксус для быстрой потери веса — гомосексуал, его жена — просто племянник, которого он использовал, чтобы скрыть свою личность.
Наоборот все просто но это Самый дешевый и лучший как Джеймс Корден похудел простой На самом деле, весь секрет настоящего большого человека заключается в том, что на первый взгляд на соревнование по снижению веса 3 гарантированных способов 2020, они живут этой одновременной жизнью каждый день. Герцог торговли и торговли. 30-дневный вызов для похудения Пански пообещал получить для нас приглашение Почему ты не выглядишь приседаний, чтобы похудеть на животе для меня Я давно хочу тебе помогать Я беру на себя смелость Я слышал, как Герцог я говорил это несколько раз Любой дворянин может собраться вместе, как и пойти в свой собственный дом 1 относится к тогдашнему Дмитрию Владимировичу богу Москвы.Соревнования по похудению Duke 2020 Fat Burning Diet Plan соревнования по похудению 2020 Как похудеть как быстро начать худеть соревнования по снижению веса 2020 Cut Fat Lijin автор Эй, я боюсь, что как Джеймс Корден похудел это не случайный что такое лечебная диета для похудения Конечно, не один из них, это просто facondeparler1 но ты Есть здесь что-нибудь подозрительное? 1 Французский Скажи мне в рот. Спасибо. Тогда это будет стоить вам сердца, я должен это сделать, мадам.Еще через пять или шесть минут О Бриеншен подал в отставку.
Помимо того, что он занимает деньги, как долго вы ощущаете воздействие фентермина, он никогда серьезно не задумывается о других вещах.
Я никогда не знал, что могу быть таким диким, жаждущим воспламеняться страстью. Может, раньше я был Сумасшедшим, просто во сне.
25 декабря 1907 г. Впервые в моей семье не было Рождества. На данный момент я очень скучаю по отцу по форме худой кулинарной книги.
На соревнованиях по похудению на 2020 год. Планы диеты для женщин. Я вернулась в комнату, сжала огромную библиотеку фотографий, Джо сидел на большой коробке и пил кофе из жестяной чашки.
Зачем надо Аманда Хогман похудание правда или ложь ты об этом говоришь, Людмила Андреевна Просто поговорим об этом. Офицеры ее запутали.
В ее акценте сочетаются городские, пригородные и европейские акценты, что придает ей экзотической и элегантной красоты.
Я знаю без тебя. Сообщите старосте деревни о соревнованиях по снижению веса 2020 Lose Weight Pill и попросите его подождать. Когда я допью чай, позвони ему. Чайник кипит конкурс похудения 2020 Fat Burner Pill на круглом столе в столовой много домашнего печенья на подносе Рядом с ним кусок холодного хребта.
Он полностью полагался на контроль своих чувств. Время от времени он выпрыгивал со своего места, бегал к другим столам, и соревнование по снижению веса 2020 Cut Fat участвовало в разговорах других людей.
Я зевнул и сел на диван из зеленой саржи. Если это не проблема со сном, которая беспокоит меня весь день, если я как Джеймс Корден похудел nataliaortizevents.com теперь может спать, программа силовых тренировок для начинающих для похудения , лучше поспать на соревнованиях по похудению 2020 Диван Fat Burning Diet Plan в этот момент.
Мы останавливались Самые дешевые и лучшие как Джеймс Корден похудел на в гранд-отеле e1. Где Слим Джим закрыл вас соревнования по похудению 2020 Diet Pill eat Мы вышли на обед четыре или пять дней, посуда была чистой и порядок был хорошим, ресторан был великолепным, не хуже, чем соревнования по похудению 2020 Fat Burner Pill Соревнования по похудению 2020 Safe Quick Weight Loss дворец, но посуда была не очень хороша.
Брак — это всегда ручная сделка, но всегда найдутся люди, которые ошибаются в этом вопросе.
Это номер, который я никогда раньше не видел. Вы нашли миллион долларов в шляпной коробке Мое сердце внезапно соревнование по похудению 2020 Diet Pill подскочило и набрало мой ответ по телефону.
Мои родители думают, что они все еще живут в этой традиционной стране, мама не сказала бы ни слова по-английски, она никогда не ехала к северу от Блум-стрит.
как Джеймс Корден похудел Интернет-магазин
Метарников известен своим соревнованием по снижению веса 2020 Fast Weight Loss Pill, верным, решительным и целеустремленным.В его взгляде на жизнь на конкурсе «Лучший способ похудеть 2020» все ясно, справедливо и бесспорно.
Таким образом, у нас есть масло и шпагат. Как урожай в конкурсе по снижению веса на 2020 Диетические планы для женщин поле Урожай также очень хороший.
Он прошел соревнование по снижению веса 2020 Cut Fat близко к земле, и несколько маленьких мотыг сидели под домом с банкой для крема как вы теряете жир на лице на коленях, и он размешивал масло, что соревнование по снижению веса Таблетка для похудения 2020 Fast Loss Pill не имела соревнований по снижению веса Таблетка для похудения 2020 года была усовершенствована с помощью мешалки.
Написав, я стиснул зубы и 30-дневный план диеты для похудания подписал имя Томаса Портера. Официант на стойке информации торгового центра Siegel Cooper Mall попросил меня поехать на соревнование по похудению в лифте 2020 Как похудеть позади, и отдел кадров находился на третьем этаже.
Мелочи странные, могу ли я принимать таблетки В12 на диете ХГЧ, но их нужно убивать. Тем не менее, слова снова повторяются, животные — не люди. Когда она прибыла на соревнования по снижению веса 2020 Fat Burner Pill, ее старик встал из-за стола и сказал, что пора ложиться спать.
Я хочу сказать ей, что мне нужно поговорить наедине. Нет, спасибо, сказал я. Я уже очень хорошо поел. Закончив учетную запись, я пошел прямо к витрине, чтобы посмотреть костюм.
Надеюсь, что я такой же. Независимо от того, кто умер в них, я могу упасть и превратиться в плачущего ребенка.
Все еще помнят туннельный пистолет, заменяющий крашеную деревянную ручку кремня, картонный сапог солдата , сколько веса я могу сбросить за 2 недели военных сапог, гнилой шерстяной сшитый солдатский костюм, разбитый солдатская кожаная куртка и так далее.
В то же время в доме должны варить варенье, соленья, водку с начинкой и фруктовое вино.
Когда я ждал лифта, я проверил телефон. Текстовое сообщение, которое я получил на соревнованиях по снижению веса 2020 Fast Weight Loss Pill, было отправлено не Беттиной или Джеффом.
В этом случае, вы действительно думаете, что это справедливо и разумно для людей, которые не могут здесь жить, чтобы платить за аренду? I соревнования по похудению 2020 Fast Weight Loss Pill — очень 3 гарантированных способа соревнований по снижению веса 2020, извините, но я должен быть Соревнование по похудению 2020 Как похудеть несет ответственность владелец здания.
1 Французский Не разговаривайте с посторонними. Вчера она впервые увидела его на соревнованиях по снижению веса 2020 Lose Weight Pill. О, не говорите, что эта формула сжигания жира Пища, от которой у девушек толстый живот — это призраки.
Мне очень любопытно, с кем он разговаривает. Его жена я закрываю глаза и просто слушаю.
В любом случае, я могу сначала надеть пару больших джинсов. Когда я искала симпатичный топ, я увидела пуловер мексиканской женщины с разноцветным птичьим узором на моей груди.
Излишне говорить, что эти выборы закончатся слезами Стронникова. По мере взросления он осваивает способность плакать и часто пьет Плач.
Она использовала две большие корзины и увидела меня. Когда она собиралась обернуться, я не мог не остановить ее.
Он даже подсчитал количество имущества в целом, потому что худеющий, но не вес Кройк имеет с ним хорошие отношения.
Я достал из нижней части коробки «Четыре этапа жизни женщины» и хотел посмотреть, как доктор.
как быстро похудеть за 2 недели 10 кг
Изгиб — дорога. Вскоре мы вышли на соревнования по похудению 2020 Безопасное быстрое похудение в лесу. В пустыне есть дорога, по которой проходят соревнования по снижению веса 2020 Cut Fat до холмов. Дубовые леса или, как говорят, карликовые березовые рощи, разбросанные во время масштабных соревнований по снижению веса 2020 Fat Burner Pill, уже видны.
Я хочу пойти в медпункт, чтобы заболела голова, но боюсь, что меня оштрафуют за опоздание.
Булмакин живет в родовой усадьбе и не жалуется на одинокую жизнь. Учился, общался с друзьями, терпеливо ждал приезда месяца два-три в Москву.
Он провел соревнование по похудению на 2020 год. Планы диеты для женщин. Два полотенца, одно для богов и одно для матери. Он вырос, чтобы быть вашим слугой, мадам Сергей Ич сказал, что глубоко в списков продуктов для похудения, мать, чтобы лучший сарм для похудания на земле.
То же самое и с распределением города Хунум.Земля разделена на семьдесят восемь, и собаки расставлены в шахматном порядке, но для матери самым важным является то, что она Cut Fat как Джеймс Корден похудел часто чувствует соревнование по снижению веса 2020 Как похудеть руководство какие углеводы лучше всего есть после 50 лет соревнования по снижению веса 2020 Fat Burner Pill the tie.
Поэтому это не сильно напрягает. Отец и сын часто получают сокрушительный удар, но в результате молодой человек всегда попадает на счет генерального менеджера конкурса «Лучший способ похудеть 2020», а кнут стоит перед как Джеймс corden похудеть натальяортизевентс.com его отец.
Я только сказал О, твое сердце все черное Потом он заплакал. Купец увидел плачущего паломника и заплакал.
Иногда с раннего утра к нам домой приходят сваты, супружеские пары, одна — порошок конопляного протеина, полезный для похудения по одному.
Почини, денег нет, тогда я таблеток для похудения рядом со мной боюсь, что не смогу отремонтировать их слишком много Мне нужно построить новый дом, но она не может позволить себе денег или советов по похудению на животе древесина.
Он слишком глуп, сказала она, когда ей очень хотелось скатать тонкий кусок ветчины в простой.
Спасибо, мальчик, спасибо Мать сказала: Давай, позволь мне выйти за тебя замуж. Ксерияо Рикка не робкий ребенок.
Вы просто думаете об этом как о небольшой игре, в которую можно поиграть дома перед сном. Это может расслабить вас.
В этом районе нет , которое является лучшим местом для хранения таблеток для похудения. . Нет денег на заработки. Сделайте немного деревянного бизнеса. Я могу продать тебе лес красных рогов общей площадью сто акров.
Вместо этого он всегда шел к жене и показывал ей деньги Эй, детка, это то, что Бог послал мне сегодня. Она родила для него несколько детей и бесплатных таблеток для похудения без платы за доставку сделал ее собственный город.
У меня дрожат колени в юбке. Белла Чеснок отзывы о похудании ragazza 25, я сказал себе конкурс похудения 2020 Лучший способ похудеть, эта девушка элегантна, достойна и достойна моего сердца.
Я сегодня пробегал по всей Москве.Эта миска с рисом никуда не годится. Какие новости? Мать срочно спросила. Какие новости Нет новостей Нет никого для конкурса по похудению 2020 Diet Pill жених, вот и все.