Иммуноблот на вич неопределенный: ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ НА ВИЧ – ИНФЕКЦИЮ

Содержание

ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ НА ВИЧ – ИНФЕКЦИЮ

 

Кому нужны тесты на ВИЧ?

ВИЧ — это вирус. В отличие от людей, вирусы не знают, что такое дискриминация. Вирусу безразличен пол, возраст, социальное положение и сексуальная ориентация — все, что нужно ВИЧ — это возможность проникнуть в организм. Не существует «групп риска», существуют ситуации, которые являются потенциально опасными с точки зрения передачи ВИЧ:
  • — Вагинальный или анальный секс без презерватива.
  • — Инъекционный прием наркотиков при помощи иглы, шприца или посуды, которыми ранее пользовались другие люди.

Если вас беспокоит возможность передачи ВИЧ, то до обращения в кабинет тестирования вам может потребоваться информация о риске заражения, а также о самих тестах.

 

Зачем идти в кабинет тестирования?

Люди решают пройти тестирование на ВИЧ по самым разным причинам:

— Знание о своем положительном ВИЧ-статусе может помочь людям вовремя получить медицинскую помощь, которая способна предотвратить серьезные и угрожающие жизни заболевания. Например, при наличии ВИЧ-инфекции некоторые инфекции, например сифилис, должны лечиться по-другому. Также при наличии ВИЧ очень важно следить за иммунным статусом и другими показателями, что позволяет вовремя назначить необходимое противовирусное лечение, и предотвратить развитие СПИДа.

— Знание об отсутствии у себя инфекции, может помочь человеку принять решение о том, как сделать свое поведение наиболее безопасным в отношении ВИЧ. Также для человека может быть важно, знать о наличии у себя ВИЧ, так как его волнует безопасность сексуального партнера.

— Диагностика ВИЧ-инфекции позволяет предотвратить передачу ВИЧ ребенку во время беременности.

— Для некоторых людей знание о своем ВИЧ-статусе, пусть даже положительном, может быть менее страшным, чем постоянное беспокойство и навязчивые мысли о возможном заражении. В любом случае, сдача анализа позволяет положить конец мучительной неопределенности, и принимать решения о своей дальнейшей жизни на основе знаний о состоянии своего здоровья.

 

Причины отказа от тестирования

У человека также могут быть причины для того, чтобы не сдавать тест. Он может быть уверен, что в его жизни не было рискованных в отношении ВИЧ ситуаций. Также у человека могут быть более личные причины для отказа от теста. Для многих людей стресс, вызванный знанием о ВИЧ-инфекции, а также возможное влияние диагноза на отношения с окружающими и образ жизни может быть гораздо более пугающим, чем незнание ВИЧ-статуса. Некоторые люди опасаются разглашения тайны диагноза. Также они могут беспокоиться о возможной дискриминации, с которой приходиться сталкиваться ВИЧ-положительным людям.

Подобные вопросы беспокоят большинство людей. Каждый самостоятельно решает, что для него важнее: страх возможного диагноза или преимущества тестирования на ВИЧ. В подобной ситуации человеку может потребоваться консультирование, или обращение на телефон доверия, где ему помогут в принятии решения. Достижения и прогресс медицины в области лечения ВИЧ-инфекции являются главным доводом в пользу теста на ВИЧ. Из истории эпидемии СПИДа давно известно, что чем шире доступ к медицинскому уходу и препаратам для лечения ВИЧ-инфекции, тем большее количество людей принимают решение о тестировании на ВИЧ. Принимая решение сделать анализ, стоит подумать о том, какие возможности есть у человека после получения положительного результата. Будет ли ему предоставлено консультирование и психологическая поддержка? Сможет ли он обратиться на специализированный телефон доверия? Есть ли в его городе группы поддержки и взаимопомощи, а также другие ресурсы для ВИЧ-положительных?

 

Если ВИЧ-инфекция неизлечима и вакцины не существует, есть ли смысл узнавать о том, что у тебя ВИЧ?

Даже если у человека есть ВИЧ, он может позаботиться о том, чтобы сохранить свое здоровье. Хотя на сегодняшний день невозможно полностью избавить человека от ВИЧ, существуют способы замедлить развитие ВИЧ-инфекции, а также излечить или предотвратить опасные заболевания.

 

Если был риск заражения ВИЧ, когда можно сделать тест?

Иммуноферментный анализ (ИФА), который используется для диагностики ВИЧ, может показать результат только через несколько недель после инфицирования. Данный тип анализа определяет не сам вирус, а антитела к нему. У некоторых людей антитела присутствуют в крови в достаточном количестве уже через 2 недели. Тем не менее, у большинства образование антител (сероконверсия) занимает больше времени. Чтобы результат теста был достаточно достоверен, необходимо, чтобы прошло около 3 месяцев после рискованной ситуации. После 3 месяцев тест ИФА достоверен у 95-98% людей, то есть у подавляющего большинства. Иногда образование антител занимает больше времени — от 3 до 6 месяцев.

 

Если результат теста отрицательный через 3 месяца, обязательно ли делать повторный тест через 6 месяцев?

У подавляющего большинства людей тест вполне достоверен через 3 месяца (у большинства антитела появляются еще раньше). Можно полностью исключить возможность заражения, сдав анализ через 6 месяцев. Тем не менее, для многих людей ожидание результатов теста является очень тяжелым переживанием. Если у человека не было очень рискованных контактов с заведомо ВИЧ — положительным партнером, то вероятность, что он окажется среди тех немногих людей, чей тест недостоверен через 3 месяца ничтожно мала. Учитывая стресс, с которым связано тестирование в повторном тесте часто нет необходимости. Тем не менее, окончательное решение все равно остается за человеком.

 

Как долго нужно ждать результатов теста?

Результат анализа, как правило, готов через 3 рабочих дня. Учитывая, что ожидание результатов может быть весьма неприятным периодом, лучше всего уточнить этот вопрос заранее, до сдачи анализа. Также можно узнать, не повлияют ли на сроки теста выходные дни и праздничные дни.

 

Где лучше сделать тест?

Тестирование на ВИЧ – инфекцию должно обязательно сопровождаться процедурой до – и послетестового консультирования, в процессе которых пациент получает достоверную информацию о ВИЧ – инфекции, обсуждает с консультантом индивидуальный риск инфицирования и пути снижения рисков, получает ответы на все интересующие вопросы, касаемые процедуры теста на ВИЧ.

Тестирование бывает двух видов: конфиденциальное и анонимное. Если вы делаете тест конфиденциально, то сотрудникам лаборатории будет известно ваше имя, но следует учесть, что они не могут сообщить его куда-либо, так как это будет нарушением врачебной тайны. В анонимных кабинетах тестирования вы не сообщаете своего имени, а вам присваивается номер или имя по которым вы сможете узнать результат теста.

 

Пройти тестирование на ВИЧ — инфекцию вы можете в любом филиале Удмуртского республиканского СПИД – центра, а также в консультативной поликлинике по адресам:

 

Консультативная поликлиника Удмуртского СПИД – центра: г. Ижевск, ул. Труда, 17а,

e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript . Телефон: 8(3412) 21-15- 94, 21-35-94, 21-37-86

Сарапульский зональный центр СПИД: г. Сарапул, ул. Гагарина, 67, лит. «Д».

(34147)3-27-43, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

Воткинский зональный центр СПИД: г. Воткинск, ул. Школьная, 2.

(34145)3-36-23, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

Можгинский зональный центр СПИД: г. Можга, ул. Сюгаильская, 19.

(34139)3-26-65, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

Игринский зональный центр СПИД: пос. Игра, ул. Милиционная, 6.

(34134)4-04-85, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

Глазовский зональный центр СПИД: г. Глазов, ул. Кирова, 27, лит «Л».

(34141)3-37-07, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

Увинский зональный центр СПИД: пос. Ува, ул. Чкалова, 20.

(34130)5-28-19, e-mail: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript .

 

Если результат отрицательный, значит больше волноваться не надо?

Если тест был сделан через достаточный период времени, в течение которого у вас не было опасных контактов, это значит, вы ВИЧ — отрицательны. Тем не менее, тестирование на ВИЧ и профилактика — это не одно и то же. Недостаточно просто регулярно сдавать анализ, если ваше поведение остается рискованным, то через какое-то время результат теста может оказаться положительным. По счастью, пути передачи ВИЧ изучены лучше, чем у любого другого вируса. Получение отрицательного результата — это хороший повод узнать как можно больше о профилактике ВИЧ, и принять решение о том, как снизить для себя риск заражения.

 

Насколько достоверен положительный результат теста?

Иногда у ИФА бывают ложноположительные результаты (примерно в 1% случаев), причиной подобного результата может быть беременность, различные вирусные инфекции, а также простая случайность. После получения положительного результата необходим более точный тест — иммуноблот, по результатам которого и ставится диагноз. Положительный результат иммуноблота после положительного ИФА достоверен на 99,9% — это максимальная точность для любого медицинского теста. Если иммуноблот отрицательный, значит, первый тест был ложноположительным, и на самом деле ВИЧ у человека нет.

 

Что такое неопределенный результат?

Если ИФА бывает положительным или отрицательным, то иммуноблот может быть положительным, отрицательным или неопределенным. Неопределенный результат иммуноблота, т.е. наличие в иммуноблоте хотя бы одного белка к вирусу, может наблюдаться, если заражение произошло недавно и в крови еще мало антител к ВИЧ, в этом случае иммуноблот станет положительным через некоторое время. Также неопределенный результат может появиться при отсутствии ВИЧ-инфекции при гепатите, некоторых хронических заболеваниях обменного характера, или при беременности. В этом случае, либо иммуноблот станет отрицательным, либо будет обнаружена причина неопределенного результата.

 

Есть ли тест, который можно сделать раньше?

Диагностика ВИЧ-инфекции производиться только с помощью тестов, определяющих антитела. Помимо этого есть тест полимеразной цепной реакции (ПЦР), который определяет генетический материал самого вируса, поэтому он достаточно достоверен через 10 дней после возможного заражения. Иногда люди делают тест ПЦР, т. к. для них тяжело ждать 3 месяца, в других случаях его может назначить врач, например, его делают детям, рожденным от ВИЧ — положительных матерей. Тем не менее, несмотря на высокую чувствительность и надежность, были зафиксированы случаи ложноположительных и ложноотрицательных результатов ПЦР. По этой причине, даже если был сделан ПЦР, может понадобиться подтверждающее тестирование методом ИФА.

 

Если мой партнер сделал тест на ВИЧ, зачем делать тест мне?

Результат теста партнера не всегда говорит о вашем статусе. У вашего партнера может быть ВИЧ, при этом вы могли остаться ВИЧ — отрицательным даже после опасного секса. Также при отсутствии ВИЧ у постоянного сексуального партнера, вирус мог передаться вам во время других случаев рискованного поведения. Если речь идет о стабильных отношениях, то зачастую тестирование рекомендуется обоим партнером одновременно.

 

Что делать, если результат теста отрицательный, но до сих пор есть симптомы?

Прежде всего, обратитесь к врачу по поводу всех своих симптомов. Их причиной может быть все, что угодно помимо ВИЧ-инфекции. Единственным достоверным способом диагностики ВИЧ является тестирование. Даже опытный врач не может определить ВИЧ-инфекцию по симптомам. Если прошло уже достаточно времени и результат повторного анализа отрицательный, то у вас нет ВИЧ, независимо от наличия или отсутствия симптомов. Тем не менее, подобные переживания могут быть симптомом СПИДофобии, и в этом случае следует уделить больше внимания своему психологическому здоровью.

 

Что делать, если все-таки будет обнаружен ВИЧ?

Следует помнить, что ВИЧ и СПИД — это не одно и то же. Если у вас обнаружат ВИЧ, это значит, что в вашем теле присутствует вирус, от которого на данный момент вы не сможете полностью избавиться. СПИД — это лишь одна из стадий ВИЧ-инфекции, во время которой у людей действительно начинаются серьезные проблемы со здоровьем, тем не менее, существуют медикаменты, которые способны замедлить развитие ВИЧ-инфекции и избавить человека от СПИДа. У большинства людей, живущих с ВИЧ, не наблюдается никаких симптомов, они могут продолжать вести привычный образ жизни. Тем не менее, диагноз ВИЧ-инфекция может привести к психологическим проблемам, человеку может потребоваться много времени, чтобы научиться жить с ВИЧ.

 

Материал подготовлен с использованием информации портала http://aids.ru/

Диагностика ВИЧ-инфекции — причины, диагностика и лечение

ВИЧ-инфекция подтверждается двумя разными тестами — скрининговым тестом и подтверждающим тестом. Из-за высокой чувствительности скрининговые тесты могут давать ложноположительные результаты. Поэтому, обычно при получении первичного положительного результата берется тот же образец крови и скрининговый тест дублируется второй раз, и если он опять положительный, только тогда проводится подтверждающий тест другого типа. Подтверждающие тесты проводятся только для образцов крови, которые неоднократно дают положительные результаты (являются «реактивными»).

Наиболее распространенный скрининговый тест — иммуноферментный анализ (ИФА). Обычно для него используют в качестве подтверждающего теста иммунный блотинг. Комбинация из двух разных типов тестов гарантирует, что полученные результаты обладают «высокой точностью».

Скрининговые тест-системы используют искусственно созданные белки ВИЧ, которые «ловят» специфические антитела, выработанные организмом в ответ на белки вируса. Как только антитела пойманы, они «могут быть определены реагентами, которые применяются вместе с индикатором, например, ферментом, который приводит к изменению цвета». Изменения цвета считываются машиной, которая и определяет результат. Иммунный блотинг действует по похожей схеме, но для него используется электрическое поле, которое различает различные компоненты на основе их молекулярной массы. Это позволяет определить антитела к специфическим вирусным антигенам, которые затем изображаются на бумаге как различимые «полоски». Современные тест-системы могут определить ВИЧ-инфекцию через 3-5 недель у большинства людей.

Вопросы-ответы:

Если был риск заражения ВИЧ, когда можно сделать тест?

Иммуноферментный анализ (ИФА), который используется для диагностики ВИЧ, может показать результат только через несколько недель после инфицирования. Этот тип анализа определяет не сам вирус, а антитела к нему. У некоторых людей антитела присутствуют в крови в достаточном количестве уже через 2 недели. Тем не менее, у большинства людей образование антител (сероконверсия) занимает больше времени. Чтобы результат теста был достаточно достоверен, необходимо, чтобы прошло около 3 месяцев после рискованной ситуации. Иногда образование антител занимает больше времени — от 3 до 6 месяцев.

Если результат теста отрицательный через 3 месяца, обязательно ли делать повторный тест через 6 месяцев?

У подавляющего большинства людей тест вполне достоверен через 3 месяца (у большинства антитела появляются еще раньше). Можно полностью исключить возможность заражения, сдав анализ через 6 месяцев.

Как долго нужно ждать результатов теста?

Это зависит от особенностей лаборатории, в которой проводиться тестирование. Тест ИФА можно сделать в течение этого же дня, но в большинстве лабораторий этот срок может составлять от 1-2 дней до 2 недель. Учитывая, что ожидание результатов может быть весьма неприятным периодом, лучше всего уточнить этот вопрос заранее, до сдачи анализа. Также можно узнать, не повлияют ли на сроки теста выходные дни и праздничные дни.

Насколько достоверен положительный результат теста?

Иногда у ИФА бывают ложноположительные результаты (примерно в 1% случаев), причиной подобного результата может быть беременность, различные вирусные инфекции, а также простая случайность. После получения положительного результата необходим более точный тест — иммуноблот, по результатам которого и ставится диагноз. Положительный результат иммуноблота после положительного ИФА достоверен на 99,9% — это максимальная точность для любого медицинского теста. Если иммуноблот отрицательный, значит, первый тест был ложноположительным, и на самом деле ВИЧ у человека нет.

Что такое неопределенный (сомнительный) результат?

Если ИФА бывает положительным или отрицательным, то иммуноблот может быть положительным, отрицательным или неопределенным. Неопределенный результат иммуноблота, т.е. наличие в иммуноблоте хотя бы одного белка к вирусу, может наблюдаться, если заражение произошло недавно и в крови еще мало антител к ВИЧ, в этом случае иммуноблот станет положительным через некоторое время. Также неопределенный результат может появиться при отсутствии ВИЧ-инфекции при гепатите, некоторых хронических заболеваниях обменного характера, или при беременности. В этом случае, либо иммуноблот станет отрицательным, либо будет обнаружена причина неопределенного результата.

Нужно ли при поступлении на работу сдавать тест на ВИЧ?

По законодательству РФ обязательным освидетельствование на ВИЧ может быть только для доноров крови, иностранных граждан и лиц без гражданства, желающих въехать на территорию РФ сроком свыше трех месяцев, а так же медицинский персонал, работающий непосредственно с кровью; лица, находящиеся в местах лишения свободы. Все остальные граждане сдают тест на ВИЧ добровольно.

По материалам сайта www.Aids.ru

Диагностика ВИЧ

Виды тестов на ВИЧ

1-й тест — иммуноферментный анализ (ИФА)

Это самый распространенный метод диагностики. Спустя три месяца после попадания вируса в кровоток, в организме человека накапливается то количество антител, которое может определить иммуноферментный анализ. Примерно в 1% случаев он дает ложноположительный или ложноотрицательный результаты.
Ложноотрицательный результат может быть получен, если антитела к вирусу не успели выработаться либо на терминальной стадии СПИДа, когда вируса в крови настолько много, что клетки CD-4 и антитела почти отсутствуют. Если ты хочешь удостовериться, что твой отрицательный результат не является на самом деле ложноотрицательным, имеет смысл пересдать ИФА еще раз через 3месяца.
Ложноположительный результат в основном выявляется при обследовании пациентов с хроническими инфекционными, аутоиммунными, онкологическими и некоторыми другими заболеваниями, а также в случае беременности. Поэтому любой положительный результат обязательно проверяют на более чувствительном тесте — иммуноблоте. Положительный результат иммуноблота после положительного ИФА достоверен на 99,9% — это максимальная точность для любого медицинского теста.

2-й тест — иммуноблот (ИБ)

Этот тест определяет наличие специфических антител к ВИЧ. Результат может быть положительным, отрицательным и сомнительным (или неопределенным).
Неопределенный результат может означать, что в кровотоке человека присутствует ВИЧ, но организмом  выработан еще не весь спектр антител. Как правило, по прошествии 1-3-6 месяцев с момента получения сомнительного результата в сыворотке появляются одно за другим все антитела и ВИЧ. В этом случае сомнительный результат является свидетельством начальной стадии ВИЧ-инфекции. Неопределенный результат иммуноблота также может означать, что человек не инфицирован ВИЧ, но в его организме есть антитела, похожие на антитела к ВИЧ. Такой результат бывает у больных туберкулезом, онкобольных, реципиентов, получающих многократные гемотрансфузии (переливания крови), у беременных женщин. При неопределенном результате ИБ пациент находится под наблюдением врача-инфекциониста и повторяет анализ через 1, 3 и 6 месяцев.

3-й тест — полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Он используется для определения РНК и ДНК вируса. Это очень эффективная и чувствительная реакция, позволяющая получить результат, исследуя ДНК всего одной клетки путем умножения (или амплификации) специфических последовательностей ДНК. ПЦР используется для: определения наличия или отсутствия самого ВИЧ в период «окна» и при неясном результате иммуноблота; для определения, какой вирус присутствует в организме — ВИЧ-1 или ВИЧ-2; — для определения и контроля вирусной нагрузки; для определения ВИЧ-статуса новорожденных, родившихся от ВИЧ-инфицированных матерей; в службах переливания крови.

Чувствительность данного теста очень высока: он обнаруживает сам вирус, причем через короткое время (в среднем около 10-ти дней) с момента предполагаемого заражения. Однако эта же высокая чувствительность позволяет тесту реагировать и на многие другие инфекции, что приводит к частым ложноположительным результатам. Поэтому по результатам этого теста никогда не ставится окончательный диагноз.
Проведение ПЦР требует сложного лабораторного оборудования и высокой квалификации специалистов. Метод является очень дорогостоящим и потому в массовом тестировании на ВИЧ, которое, согласно законодательству, проводится для населения бесплатно, применяться не может.

4-й тест — так называемый экспресс-тест

Его применяют в экстренных ситуациях (например, во время операций по жизненным показаниям или в родах). Проведение экпресс-теста не требует сложного оборудования и высокой квалификации персонала, но его результат должен быть впоследствии подтвержден стандартным тестированием на ВИЧ.

Сдать кровь на  ВИЧ может любой желающий в ГУ «Смолевичская ЦРБ», г. Смолевичи, ул.Первомайская,101, либо в ГУ «Республиканский центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья» отдел ВИЧ, СПИД, г.Минск, ул. Клары Цеткин, 4. 

Будьте здоровы! 

Врач-эпидемиолог (заведующий отделом эпидемиологии) ГУ «Смолевичский районный центр гигиены и эпидемиологии» Красовская Т.В.

КАЗАХСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ДЕРМАТОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | Важно знать | ВИЧ инфекция

1.Какие задачи выполняют лаборатории Центров СПИД?

В функции лабораторий входят следующие основные задачи:

  • Диагностика ВИЧ-инфекции
  • Контроль (мониторинг) эффективности лечения, предоставляемого лицам, живущим с ВИЧ (ЛЖВ)
  • Диагностика лекарственной устойчивости ВИЧ

Диагностика ВИЧ-инфекции – это процесс, который включает серию лабораторных тестов с обязательным использованием различных диагностических тест-систем и методов. Необходимость проведения серии тестов связана прежде всего с тем простым фактом, что  сегодня не существует идеального метода, гарантирующего абсолютно точное разделение инфицированных пациентов от неинфицированных лиц. Максимально достоверные данные достигаются комбинацией нескольких тестов (методов), одни из которых лучше выявляют ВИЧ-инфицированных пациентов, а другие — лучше идентифицируют неинфицированных. На первом этапе лаборатории используют наиболее чувствительные тест-системы последнего (четвертого) поколения. Вероятность ложноотрицательного результата при использовании данных тест-систем крайне мала, поэтому при получении отрицательного результата Центры СПИД немедленно выдают заключение: Антител к ВИЧ не обнаружено.

Вместе с тем, положительный результат не является абсолютно точным доказательством наличия ВИЧ-инфекции. В Казахстане общая распространенность ВИЧ-инфекции довольно низка(<0,05%). Вероятность обнаружения ВИЧ-инфицированного пациента среди общего населения меньше, чем вероятность получения ложноположительного результата (допустимый лимит — 2%). Поэтому положительный результат требует подтверждения. Для этого лаборатории Центров СПИД проводят дополнительные тесты, которые позволяют «отсеивать» истинно-положительные результаты от ложноположительных. На последнем этапе используется иммуноблот — тест, который гарантирует максимальную надежность положительных результатов. На основании данного результата врачи могут вынести окончательное заключение о наличии у пациента ВИЧ-инфекции.

Мониторинг эффективности антиретровирусной терапии. В Казахстане лица, живущие с ВИЧ, получают бесплатное лечение в виде антиретровирусной терапии (АРТ). Эффективность АРТ очень сильно зависит от ряда факторов: соблюдение режима приема лекарственных препаратов, первичной устойчивости вируса к тому или иному препарату, или скорости возникновения мутантных устойчивых форм. Поэтому все ЛЖВ, получающие АРТ, проходят регулярное обследование в лабораториях областных и городских центров СПИД на количественное определение РНК ВИЧ (вирусная нагрузка) и количественное определение уровня CD4+/CD8+ Т-лимфоцитов.

Тест на вирусную нагрузку позволяет определить насколько эффективно лекарственные препараты подавляют размножение вируса. А тест на CD4+/CD8+ Т-лимфоциты показывает состояние иммунитета пациента. Если вирусная нагрузка находится на низком уровне, а количество CD4+клеток растет, значит выбранная схема лечения эффективна. Если нет, то необходимо внести соответствующие коррективы.

Диагностика лекарственной устойчивости ВИЧ. Проблема возникновения лекарственной устойчивости ВИЧ является неизбежной при внедрении широкомасштабной программы лечения ЛЖВ. В случае, когда терапия оказывается неэффективной, и это не связано с приверженностью пациента к лечению, на базе РЦ СПИД проводятся исследования по выявлению и генотипированию мутантных форм вируса. Эти исследования позволяют установить, какие препараты уже не могут подавлять размножения вируса, и таким образом, скорректировать схему лечения.

2.Что такое иммуноблот и почему мы можем доверять его положительным результатам?

Вирус иммунодефицита человека состоит из ряда белков (антигенов), к каждому из которых у инфицированного пациента вырабатываются специфические антитела. В отличие от тестов, выполняемых на первых этапах (ИФА, ИХЛА, экспресс-тесты), иммуноблот может определять к каким конкретно антигенам ВИЧ у пациента есть антитела.

Согласно критериям Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ), положительный результат может быть установлен при обнаружении антител как минимум к двум из трех поверхностных белков вируса (gp). Поэтому использование иммуноблота сводит к минимум вероятность ложноположительных результатов.

 

Рис. 1. Пример иммуноблота

gp160, gp120, gp41, p66, p24, p17 –белки вируса. Появление на тест-полоске темной поперечной черты свидетельствует о присутствии в организме пациента антител к данному белку.

Существует два типа иммуноблота. Первый, так называемый Вестерн-блот, производится из белков настоящих, но предварительно разрушенных вирусов, выращиваемых в культуре клеток. Преимуществом Вестерн-блота является то, что в нем присутствуют все белки ВИЧ, и мы можем увидеть полную картину, происходящего в организме пациента процесса генерации специфических антител. Однако использование дорогостоящей культуры соответственно сказывается на цене данного теста. Второй тип иммуноблота — линейный иммунный тест, был разработан с целью удешевления подтверждающего анализа. В линейных иммунных тестах используются рекомбинантные (искусственно созданные) белки. Поскольку в тестах данного типаотсутствует ряд белков ВИЧ, мы получаем фрагментарную картину. Так, например в линейных иммунных тестах отсутствует белок gp160 — один из трех поверхностных белков, на основании которых выносится окончательное решение, что делает данный тест менее информативным. Поэтому Вестерн-блот остается на сегодня «золотым стандартом»для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции.

3.Насколько надежны отрицательные результаты иммуноблота?

В силу недостаточной чувствительности (по сравнению с ИФА, ИХЛА или экспресс-тестами), к отрицательным результатам иммуноблота необходимо относится с осторожностью. Поэтому при получении отрицательного или неопределенного результата иммуноблота Центры СПИД предписывают пациенту пройти повторное обследование через две недели. Как правило, этого периода достаточно, чтобы организм пациента выработал в достаточном количестве антитела к основным белкам вируса. Однако в некоторых случаях этот процесс может растянуться на несколько месяцев, поэтому пациента могут пригласить пройти обследование еще несколько раз, вплоть до окончательного установления или исключения диагноза ВИЧ-инфекции.

4.Как обеспечивается безопасность донорской крови?

Скрининг доноров крови на ВИЧ (т.е. обязательное обследование каждой кроводачи, каждого донора) осуществляется не региональными СПИД, а центрами крови. При этом используются методы ИХЛА/ИФА четвертого поколения, позволяющие одновременно выявлять вирусный антиген и антитела к ВИЧ. Кроме того, образцы крови проходят обследование с использованием метода полимеразной цепной реакции (на Рис. 2 обозначена как NAT – nucleicacidamplificationtechnology, англ.), позволяющим обнаруживать РНК ВИЧ уже на 10 день после инфицирования. До этого момента ВИЧ-инфекция не определяется никакими тестами.

Рис. 2. Выявление ВИЧ-инфекции с помощью тестов различных форматов и поколений в процессе естественного течения инфекции.

При получении положительного результата любого из тестов, потенциально инфицированная донорская кровь подвергается уничтожению, а сам донор отстраняется от возможности сдавать кровь в дальнейшем. При этом диагноз ВИЧ-инфекции донору без проведения подтверждающих исследований не ставится. Для постановки окончательного диагноза образец крови донора направляется в РЦ СПИД для проведения дальнейших исследований согласно утвержденного алгоритма тестировния на ВИЧ инфекцию.

5.Как в Казахстане осуществляется диагностика на ВИЧ-2?

Согласно имеющимся эпидемиологическим данным на территории СНГ на сегодня не зарегистрировано ни одного случая ВИЧ-2 инфекции. Тем не менее, во всех лабораториях региональных центров СПИД Казахстана и центров крови используются тест-системы, способные одновременно выявлять как ВИЧ-1, так ВИЧ-2 инфекцию. Кроме того, большая схожесть строения вирусов первого и второго типа обеспечивает перекрестную реакцию в иммуноблоте на стадии подтверждения. При подозрении на ВИЧ-2 инфекцию в распоряжении лаборатории РЦ СПИД имеется соответствующий иммуноблот для выявления специфически антител к вирусу иммунодефицита человека второго типа.

6.Сколько стоит тест на ВИЧ?

Согласно тарифов на медицинские услуги в рамках гарантированного объема бесплатной медицинской помощи, утвержденных приказом Министерства здравоохранения РК, стоимость исследования на ВИЧ составляет 1413,99 тенге.

7.Могут ли частные медицинские организации выполнять исследования на ВИЧ?

В целях широкого доступа населения к тестированию на ВИЧ-инфекцию, медицинские организации всех форм собственности могут проводить первый этап лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. При этом Министерством здравоохранения будут предусмотрены квалификационные требования и обязательность предоставления статистической отчетности.

Пресс-служба РЦ СПИД

 

 

 

Что делать, если тест на ВИЧ положительный

Что делать, если тест на ВИЧ положительный

Порядок освидетельствования на ВИЧ-инфекцию


Основным методом выявления ВИЧ-инфекции является проведение тестирования на антитела к ВИЧ. Освидетельствование на ВИЧ-инфекцию (в том числе и анонимное) осуществляется в медицинских учреждениях всех форм собственности с информированного согласия пациента в условиях строгой конфиденциальности, а в случае обследования несовершеннолетних в возрасте до 14 лет  по просьбе или с согласия его законного представителя. Тестирование добровольное и проводится с обязательным до- и послетестовым консуль­тированием по вопросам профилактики ВИЧ-инфекции.


Обязательному   медицинскому освидетельствованию  на  ВИЧ-инфекцию подлежат:

  • • Доноры крови, плазмы крови, спермы и других биологических жидкостей, тканей и органов (в т.ч. спермы).
     
  • • Беременные женщины.
     
  • • Дети, рожденные от ВИЧ-инфицированных матерей.
     
  • • Обязательному медицинскому освидетельствованию для выявления ВИЧ-инфекции при поступлении на работу и при периодических медицинских осмотрах подлежат следующие работники:
     
  • ? Врачи, средний и младший медицинский персонал центров по профилактике и борьбе со СПИДом, учреждений здравоохранения, специализированных отделений и структурных подразделений учреждений здравоохранения, занятые непосредственным обследованием, диагностикой, лечением, обслуживанием, а также проведением судебно — медицинской экспертизы и другой работы с лицами, инфицированными вирусом иммунодефицита человека, имеющие с ними непосредственный контакт;
  •  
  • ? Врачи, средний и младший медицинский персонал лабораторий (группы персонала лабораторий), которые осуществляют обследование населения на ВИЧ-инфекцию и исследование крови и биологических материалов, полученных от лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека;
  •  
  • ? Научные работники, специалисты, служащие и рабочие научно — исследовательских учреждений, предприятий (производств) по изготовлению медицинских иммунобиологических препаратов и других организаций, работа которых связана с материалами, содержащими вирус иммунодефицита человека;
     
  • ? Медицинские работники в стационарах (отделениях) хирургического профиля при поступлении на работу и в дальнейшем 1 раз в год;

  • • Лица,  проходящие военную службу и поступающие в военные учебные заведения и на военную службу по призыву и контракту,  при призыве на срочную военную службу, при поступлении на службу по контракту, при поступлении в военные ВУЗы министерств и ведомств, устанавливающих ограничения для приёма на службу лиц с ВИЧ-инфекцией;
     
  • • Иностранные граждане и лица без гражданства при обращении за получением разрешения на гражданство или видом на жительство, или разрешением на работу в Российской Федерации, при въезде на территорию Российской Федерации иностранных граждан на срок более 3-х месяцев.
     


Группы населения, которым рекомендуется тестирование на антитела к ВИЧ:

  • • Пациенты с рядом клинических показаний, указывающих на наличие ВИЧ.
     
  • • Пациенты с подозрением или подтвержденным диагнозом: наркомании, инфекций, передаваемых половым путем, гепатитита В, С, легочного и внелегочного туберкулеза.

  • • Уязвимые группы населения: гомо- и бисексуалы, работники коммерческого секса, клиенты работников коммерческого секса, лица с беспорядочными половыми связями (промискуитет), лица, находящиеся в местах лишения свободы.

  • • Реципиенты препаратов крови.

  • • Лица, имеющие половые контакты с ВИЧ-инфицированными или больными инфекциями, передающимися половым путем.

  • • Работники системы здравоохранения, получившие микротравмы при выполнении профессиональных обязанностей.

  • • Пациенты, при оказании помощи которым был травмирован медицинский работник.

  • • Члены семей ВИЧ-инфицированных пациентов.


ПОМНИТЕ: Согласие или отказ от тестирования на ВИЧ не должны влиять на качество оказания медицинской помощи.

 

Возможные результаты тестирования и период «серонегативного окна»:

  • • Положительный результат теста означает, что у человека обнаружены антитела к ВИЧ. Это дает основание полагать, что человек ВИЧ-инфицирован. Необходима консультация врача.

  • • Отрицательный результат теста означает, что антитела к ВИЧ не обнаружены. Однако отрицательный результат тестирования на антитела к ВИЧ не всегда может означать, что человек не инфицирован, поскольку существует период «серонегативного окна».Чтобы выработать антитела в количестве, достаточном для их обнаружения тест-системой организму требуется от двух недель до трех месяцев (в редких случаях до года). Этот отрезок времени называется «период окна». Тестирование в этот период может дать отрицательный результат, поэтому  анализ следует повторить. В «период окна» кровь, сперма, вагинальный секрет и грудное молоко инфицированного человека уже содержат достаточное количество вируса для заражения других людей.

  • • Неопределенный (сомнительный) результат теста: необходимо провести повторные исследования на антитела к ВИЧ иммунном или линейном блоте через 2 недели, 3 и 6 месяцев. Если получены отрицательные результаты в ИФА, то дальнейшее исследование не требуется. Если через 6 месяцев после первого обследования вновь будут получены неопределенные результаты, а у пациента не будут выявлены факторы риска заражения и клинические симптомы ВИЧ-инфекции, результат расценивается как ложноположительный. При этом при наличии эпидемиологических и клинических показаний исследования проводятся повторно по назначению лечащего врача или эпидемиолога. Пока окончательный результат тестирования на ВИЧ неизвестен рекомендации в отношении изменения поведения такие же как и для лиц с положительным результатом тестирования.


Результаты исследования не сообщаются по телефону, а только при личной беседе с обследуемым.

 

Дотестовое и послетестовое консультирование

Дотестовое и послетестовое консультирование проводимое в Центре СПИД это далеко не формальная процедура. Это не воспитание или осуждение поведения пациента, приведшее  к инфицированию, а разумный разбор сложившейся ситуации и коррекция дальнейшего поведения, в том числе и рискованного. Ежегодно это порядка 2600-2700 дотестовых и 3400-3500 послетестовых консультаций. От качества проведенного консультирования зависит, в том числе, и последующее желание пациента наблюдаться в Центре СПИДа и его приверженность.

Ежегодно в Центре благодаря проведенному консультированию лиц, обратившихся после случайных половых контактов или практикующих другие формы рискованного поведения, предотвращается порядка 180-240 случаев.

Период ожидания результатов тестирования может иметь большое значение для принятия человеком решения об изменении рискованного поведения. В этот период многие впервые задумываются о ВИЧ как о личной проблеме, осознают необходимость изменения поведения, поэтому возможности дотестового консультирования должны быть в полной мере использованы в целях профилактики ВИЧ-инфицирования.

Дотестовое консультирование

Дотестовое консультирование по ВИЧ представляет собой диалог между пациентом и специалистом с целью обсуждения теста на ВИЧ и возможных последствий в связи со знанием своего ВИЧ-статуса. Такое консультирование ведет к принятию информированного решения о проведении теста или отказу от прохождения теста.

В ходе беседы перед тестированием на ВИЧ должны быть освещены следующие вопросы:

  • •  формы поведения, сопряженные с риском инфицирования ВИЧ

  • •  польза от прохождения тестирования, включая спектр видов помощи, доступной для пациентов с положительным результатом тестирования на ВИЧ

  • •  пути передачи ВИЧ, меры профилактики; процедура тестирования

  • •  возможные последствия выяснения ВИЧ-статуса (для личной жизни, практические выводы)

  • •  порядок получения информированного согласия на тестирование

  • •  порядок выдачи результатов тестирования

  • •  пути получения дальнейшей помощи

 

В результате дотестового консультирования пациент:

  • • получает информацию о ВИЧ-инфекции, тесте на антитела к ВИЧ, мерах профилактики ВИЧ-инфекции, возможных последствиях тестирования

  • • получает объективную оценку наличия в его жизни риска заразиться ВИЧ-инфекцией

  • • принимает осознанное решение о прохождении обследования на антитела к ВИЧ

  • • обдумывает возможности изменения своего поведения, рискованного в плане заражения ВИЧ

При завершении консультирования с пациентом обсуждаются следующие вопросы:

  • • Какого результата тестирования он ожидает и почему?

  • • Что он будет делать, если получит не тот результат, на который рассчитывает?

  • • Что изменится в его жизни, если результат окажется положительным?

  • • Что изменится в его жизни, если результат окажется отрицательным?


Послетестовое консультирование

Результаты исследования по телефону не сообщаются. Послетестовое консультирование представляет собой диалог между пациентом и специалистом с целью обсуждения результатов теста на ВИЧ, предоставления соответствующей информации, оказания поддержки и направления к другим специалистам, а также с целью формирования поведения, которое снижает риск заражения, если результаты теста отрицательны или снижает риск передачи ВИЧ другим, если они положительны. Результат тестирования может оказаться отрицательным, неопределенным или положительным.

Послетестовое консультирование при отрицательном результате проводится с учетом степени риска ВИЧ-инфицирования у пациента. Пациенту с низким риском относительно инфекции ВИЧ врач напоминает основную информацию, предоставленную до тестирования, обсуждает вопросы наименее опасного поведения в отношении ВИЧ-инфекции и предлагает поддержку в виде дальнейших посещений, возможных обращений по телефону с целью закрепить установку на безопасное поведение.

С пациентом с высоким риском относительно инфекции ВИЧ врач должен обсудить значение полученного результата, повторить основную информацию, предоставленную до тестирования, напомнить пациенту о существовании периода «окна» и рекомендовать повторное тестирование через 3-6 месяцев. Врач также должен вернуться к вопросу наименее опасного поведения в отношении ВИЧ-инфекции, обсудить необходимость использования презервативов, а – при наличии в анамнезе сведений об употреблении наркотиков – обратить внимание пациента на необходимость соблюдения стерильности инъекционного инструментария.

В случае тестирования крови на антитела к ВИЧ методом иммунного блоттинга существует вероятность получения неопределенного результата по причине

  • • ошибки при постановке теста;

  • • наличия у пациента других острых и хронических заболеваний;

  • • явления сероконверсии.
     

При получении неопределенного результата врач должен обсудить с пациентом причины и значение полученного результата, рекомендовать повторить тест, рекомендовать придерживаться менее опасного в плане передачи ВИЧ поведения и направить пациента в центр СПИД для дальнейшего наблюдения.

О положительном результате теста на ВИЧ пациенту сообщает врач, назначивший обследование.

При сообщении положительного результата тестирования консультант

  • • ясно и кратко сообщает результат;

  • • предоставляет время для осознания сообщения;

  • • оценивает реакцию пациента на сообщение о наличии антител к ВИЧ;

  • • выслушивает мысли и опасения пациента относительно своего диагноза;

  • • выслушивает рассказ пациента о чувствах, касающихся ВИЧ инфекции;

  • • поясняет, что более подробно вопрос о перспективах пациента будет обсуждаться после завершения обследования в центре СПИД;

  • • объясняет в простых словах, что такое ВИЧ, как он влияет на иммунную систему, разницу между ВИЧ-инфекцией и СПИДом;

  • • объясняет, что диагноз ВИЧ-инфекции, стадия заболевания будут окончательно определены в центре профилактики и борьбы со СПИДом врачом-инфекционистом на основании клинических, эпидемиологических и лабораторных данных;

  • • обращает внимание на важность соблюдения наименее опасного поведения в отношении ВИЧ-инфекции, болезней, передающихся половым путем, которые могут угнетать иммунитет и способствовать прогрессированию заболевания; рекомендует использовать презервативы при сексуальных контактах, при употреблении наркотиков пользоваться одноразовыми шприцами и иглами, не передавая их другим потребителям, следить за стерильностью раствора наркотика и емкости, из которой он набирается;

  • • объясняет ответственность за изменение поведения для того, чтобы избежать передачи ВИЧ другим людям.

Таким образом, консультирование при обследовании на антитела к ВИЧ является не только обязательным, но и эффективным способом индивидуальной профилактической работы с людьми по вопросам ВИЧ-инфекции. Многие впервые задумываются об этом заболевании применительно к себе, осознают индивидуальную степень риска, получают необходимую информацию, т.е. делают первый шаг к изменению поведения.

Квалифицированное консультирование также помогает людям овладеть ситуацией в случае получения ими положительного результата тестирования и тем самым вносит существенный вклад в профилактику самоубийств и других поступков, продиктованных отчаянием.

 

Погрешность исследования. Всё о возможных ошибках в ВИЧ-диагностике

Погрешность исследования. Всё о возможных ошибках в ВИЧ-диагностике

Может ли тестирование на ВИЧ выдать ложный результат?  И что делать при подозрении на ошибку? Когда отрицательный результат точно гарантирует отсутствие вируса? 

Точность диагностики ВИЧ – задача первостепенной важности, ведь ошибка в диагнозе может привести к психологической травме или к распространению ВИЧ. Поэтому для тестирования на ВИЧ используют тест-системы высокого качества. Однако стопроцентной точности не бывает ни при одном обследовании. Получив результат, важно проконсультироваться со специалистом.

Технические ошибки


Результаты обследования на ВИЧ могут оказаться ошибочными, например, из-за несоблюдения правил хранения и транспортировки крови, взятой для анализа на ВИЧ-инфекцию – сейчас в медицинских учреждениях это встречается крайне редко.

Ошибки диагностики у беременных


Ложноположительные результаты определения антител к ВИЧ могут наблюдаться при беременности. В этом случае женщина встаёт на учёт в СПИД-центр, где проводится наблюдение. Обследование повторяют через 3 месяца – если уровень антител растет, это говорит об инфицировании ВИЧ. Если количество антител остаётся прежним – то подозрение на ВИЧ-инфекцию не подтверждается.

Ошибки диагностики при хронических заболеваниях


Ложноположительные результаты могут встречаться также при хронических заболеваниях с нарушенным обменом веществ, например – при сахарном диабете или коллагенозах. Данная диагностическая ошибка может быть следствием других инфекционных или аутоиммунных заболеваний. При онкологических процессах также велика вероятность диагностической ошибки.

Ошибки при обследовании детей, рождённых от ВИЧ-позитивных женщин


У детей, рождённых от ВИЧ-инфицированных женщин, в первые 18 месяцев жизни в крови могут определяться антитела к ВИЧ при отсутствии самой инфекции.

«Серологическое окно»


При определении антител к ВИЧ методом ИФА или иммунного блота возможен ложноотрицательный результат, если ВИЧ-инфицированный пациент находится в периоде «окна» и количество антител ниже пороговых значений, определяемых тест-системами.

Ошибки при нарушении работы иммунной системы


Ложноотрицательный результат может быть при так называемой атипичной реакции иммунной системы – когда не происходит адекватного иммунного ответа на инфекционный процесс. Также ложноотрицательный результат часто бывает на конечных этапах развития заболевания, когда иммунная система ослаблена настолько, что не в состоянии выработать антитела. Другое состояние – длительная иммуносупрессивная терапия, например, после трансплантации органов – в данном случае иммунный ответ также отсутствует.

Когда результат диагностики ВИЧ точно отрицательный


Отрицательный результат тестирования на ВИЧ практически полностью гарантирует отсутствие ВИЧ-инфекции, если у человека в последний год не было ситуаций, сопряжённых с высоким риском заражения ВИЧ и нет клинических признаков, характерных для СПИДа. Если была опасная ситуация с точки зрения заражения ВИЧ, то об отсутствии инфекции можно говорить, если в течение года результаты теста остаются отрицательными.

Тест на ВИЧ

Единственный способ узнать, не заразился ли ты ВИЧ или ИППП – пройти тестирование. Многие люди очень переживают, когда сталкиваются с необходимостью сдавать анализы на ВИЧ и ИППП, особенно если это происходит впервые.

Эти переживания могут бать вызваны страхом перед результатами анализа или перед тем, что об этом может узнать кто-то еще. Все эти переживания очень естественны.

Тебе будет проще принять решение пройти тестирование. Если ты подумаешь о следующем:

— получение результатов тестирования позволит избежать мук неведения;
— без надлежащего лечения инфекции, передающиеся половым путем, и особенно ВИЧ-инфекции. Приводят к серьезным последствиям для здоровья;
— ранняя диагностика и своевременное лечение позволяют сохранить здоровье;
— тестирование на ВИЧ и ИППП не занимает много времени и в некоторых клиниках проводится бесплатно;
— это даст тебе уверенность в том, что ты не передашь ВИЧ своим любимым или (если ты собираешься стать матерью) своему ребенку – во время беременности, родов и кормления грудью.

Хотя лекарств полностью излечивающих от ВИЧ-инфекции пока нет, существующая на сегодняшний день антиретровирусная терапия позволяет снизить активность вируса и уменьшить вред, который он наносит иммунной системе, таким образом препятствуя развитию и переходу ВИЧ-инфекции в стадию СПИД.

Уже сейчас есть такие препараты, которые позволяют людям, живущим с ВИЧ, прожить долгую и здоровую жизнь.

При использовании современной терапии ВИЧ-инфекция может рассматриваться как хроническое заболевание.

Виды анализа:

Разработаны различные принципы тестирования, из них два используются наиболее часто: обнаружение антител и выявление белков, характерных для вируса. Результат анализа принято называть положительным (вирус обнаружен), отрицательным (вируса нет) или сомнительным (маркеры вируса есть, но не все, результат не может считаться положительным).

Тест-системы, определяющие иммунный ответ:

Практически стандартным тестом на ВИЧ является ИФА (иммунно-ферментный анализ), определяющий наличие в крови антител, которые вырабатывает организм для борьбы с вирусом. Этот тест обладает высокой надежностью (ок. 99%) и селективностью, хорошо отработанная технология сделала этот тест недорогим (себестоимость ок. 1 долл. США).

Для анализа берется небольшое количество крови из вены. Существуют также разновидности для слюны и мочи, которые позволяют проводить тестирование без укола, но они не обладают такой же надежностью и в России не утверждены.

Выработка антител начинается в организме примерно в течение первого месяца после попадания вируса, затем их количество постепенно растет. Спустя два-два с половиной месяца вырабатывается достаточная концентрация антител для надежного определения. Поэтому во многих странах (в том числе и в России) перед тестированием пациента предупреждают, что достоверный результат определяется спустя 3-6 месяцев после контакта с вирусом (ок. 99% людей спустя 3 месяца, практически 100% спустя 6 месяцев).

Если ИФА показал положительный результат, его перепроверяют с помощью более точного теста иммуноблот. Этот анализ имеет очень высокую чувствительность и достоверность (99.9%), однако у него довольно высок процент ложноположительных срабатываний. Диагноз ВИЧ-инфекция ставится лишь при наличии двух положительных результатов одновременно: ИФА и иммунноблота.

Тест на антитела, иммуноблот (Western blot (WB), не может служить «золотым стандартом» для другого теста на антитела ИФА (ELISA). Только потому, что в иммуноблоте “вирусные” антигены другие, это не является доказательством, что иммуноблот более чувствительный и достоверный, чем ИФА.

Также нельзя узнать достоверность теста на антитела повторяя тестирование, неважно сколько раз. Более того, на данный момент нет доказательства, что “протеины вирусного ядра(p24, p55 и p17) и оболочки (gp120, gp160 и gp41) ” или какие либо други протеины использующиеся в ИФА или иммуноблоте являются ВИЧ протеинами.

Тест-системы, определяющие белки вируса:

Самым распространенным из этой группы является тест под названием ПЦР (полимеразная цепная реакция). Обладает меньшей точностью (ок. 95%), чем ИФА, однако может быть использован уже спустя 10 дней после возможной передачи вируса.

Применяется в случаях, когда желателен ранний предварительный результат (до истечения 3 месяцев) или иммунный ответ не может служить показателем: у новорожденных, у пациентов, проходивших иммунносупрессорную терапию (отключение иммунного ответа). По результатам ПЦР диагноз не ставится.

Ложноположительные, ложноотрицательные и сомнительные результаты:

Сомнительный (или неопределенный) результат бывает у теста иммунноблот (см. раздел Тест-системы, определяющие иммунный ответ). В таком случае часто рекомендуют пересдать анализ через несколько недель. Такой результат может объясняться присутствием похожих белков вируса гепатита или аутоиммунными реакциями организма, не имеющими отношения в ВИЧ.

Ложноположительным результатом называется ситуация, в которой вируса нет, а анализ показал положительный результат. Это возможно для анализа ИФА, последующая проверка на иммунноблоте подтверждает отсутствие вируса.

Ложноотрицательный результат – отрицательный показатель теста при том, что вирус присутствует. Такая ситуация может сложиться если анализ проводится слишком рано, до истечения 3 месяцев (недостаточно антител в крови для срабатывания).

Также, анализ ПЦР показывает отрицательный результат во время проведения терапии против ВИЧ, когда концентрация вирусов в крови становится ничтожной, ниже порога срабатывания. В этом случае анализ, опирающийся на присутствие антител, покажет верный результат.

СПИД:

Анализ на ВИЧ не показывает, болен ли человек СПИД, он лишь означает, что в организме человека присутствует определенный вирус.

СПИД диагностируется при наличии как минимум двух ассоциированных заболеваний.

Социальные аспекты тестирования:

Тестирование на ВИЧ может иметь как позитивные, так и негативные последствия. Поэтому во всех демократических странах право выбора — сдавать анализ или нет — предоставляется самому человеку.

Тестирование на ВИЧ очень важно с точки зрения сохранения здоровья человека. Результаты могут повлиять на планирование жизни и карьеры, отношение к собственному организму, сексуальные практики и точку зрения на употребление вредных или опасных субстанций.

Вместе с тем, результат может стать известен окружающим, а значит, служить причиной для дискриминации: увольнения с работы, развода с супругом, потери близкого человека или друзей, отказа в предоставлении медицинской помощи или других услуг. Часто получение положительного анализа приводит к сильному стрессу у самого человека.

Поэтому решение о тестировании должно приниматься осознанно, без давления и на полностью добровольной основе.

Принудительное тестирование каких-бы то ни было групп населения бесперспективно с точки зрения сдерживания эпидемии и противоречит соблюдению прав человека.

Проведение анализа без согласия человека является незаконным в России. Вместе с тем, такие случаи имеют место в армии, при задержании правоохранительными органами, в местах лишения свободы.

В настоящее время анализ доступен в большинстве российских городов. Как правило, анализ по желанию пациента можно сделать анонимно и бесплатно.

Документы требуются, если пациенту нужна справка с результатом на его имя.

Забор крови делают в районных кожно-венерических диспансерах (КВД), городских СПИД-центрах (организованных во всех городах уровня районного и областного центра) и многочисленных коммерческих лабораториях.

Юридические нормы:

Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан устанавливают, что для любого медицинского вмешательства необходимо информированное добровольное согласие пациента.

Это, в частности, означает, что забор крови не может быть на законных основаниях произведен принудительно. Исключение сделано для пациентов, чье состояние здоровья не позволяет им выразить свою волю (в этом случае решение принимает медицинский консилиум), и для подростков младше 15 лет (решение принимают законные представители).

Существуют также 4 ситуации, в которых предоставление результатов тестирования на ВИЧ является обязательным (но не насильственным — каждый может просто отказаться от участия):

1) донорство крови, других биологических жидкостей и органов;
2) при устройстве на работу медицинского работника или другого специалиста в учреждение, которое непосредственно обрабатывает или принимает материалы, заведомо содержащие ВИЧ;
3) для иностранных граждан — получение виз для проживания на территории России сроком более 3 месяцев;
4) тестирование лиц, находящихся в местах лишения свободы в случае наличия клинических показаний (и в этом случае обследование может быть проведено только с согласия пациента).

Источник: вич.рф

 

Вестерн-блоттинг и ELISA-тесты на ВИЧ: чего ожидать

Вестерн-блоттинг и ELISA-тесты — это два теста на антитела в крови, которые можно использовать для выявления ВИЧ.

Раньше для подтверждения результатов теста ELISA использовался Вестерн-блоттинг.

Однако технический прогресс означает, что теперь широко используются другие методы. С 2014 года Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC) рекомендуют прекратить проведение Вестерн-блоттинга.

В настоящее время большинство лабораторий используют иммуноанализ на антиген ВИЧp24 и антитела к ВИЧ-1 и 2, за которым следует подтверждающий иммуноанализ для различения ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

Тестирование и диагностика являются важной частью сохранения здоровья с ВИЧ. При ранней диагностике возможно раннее лечение. Тестирование — это первый шаг к поиску эффективных способов управления этим заболеванием. Это ключ как к лечению, так и к профилактике.

Текущее лечение может снизить вирусную нагрузку до неопределяемого уровня. Хотя уровни такие низкие, организм может оставаться здоровым, человек может рассчитывать на нормальную продолжительность жизни, и вирус не может передаваться.

Поделиться на PinterestИФА-тест — это тест на антитела в крови, который проверяет белки, вырабатываемые организмом при наличии ВИЧ.

Лабораторные анализы крови могут использоваться для диагностики ВИЧ путем обнаружения определенных антител или белков, вырабатываемых иммунной системой в ответ на вирус.

ELISA-тест , также называемый EIA для иммуноферментного анализа, используется для обнаружения антител к ВИЧ. Он проверяет наличие определенных белков, которые организм вырабатывает в ответ на ВИЧ.

Образец крови будет добавлен в кассету, содержащую вирусный белок, называемый антигеном.

Если кровь содержит антитела к ВИЧ, она связывается с антигеном и вызывает изменение цвета содержимого кассеты.Этот очень чувствительный тест был первым, широко используемым для проверки на ВИЧ.

Вестерн-блоттинг ранее использовался для подтверждения результатов ELISA, но больше не рекомендуется, так как другие тесты теперь более надежны и позволяют быстрее диагностировать.

При Вестерн-блот-тесте кровь берут таким же образом, но образец отделяется электрическим током и переносится на кусок промокательной бумаги. Здесь добавляется фермент, вызывающий изменение цвета, которое сигнализирует о наличии антител к ВИЧ.

У кого есть тесты?

Большинство взрослых через какое-то время будут проходить обследование. Это обычная процедура во время беременности.

Тем не менее, Вестерн-блоттинг и ИФА рекомендуются только в том случае, если человек мог иметь контакт с ВИЧ.

К людям с высоким риском заражения относятся:

  • те, кто занимается сексом без использования презерватива, особенно с ВИЧ-инфицированными
  • те, кто пользуется общими иглами
  • люди, которым делали переливание крови или инъекции до 1985
  • те, кто с другими заболеваниями, передаваемыми половым путем (ЗППП)

Некоторые люди предпочитают проходить тестирование на ВИЧ довольно регулярно, например, если у них появился новый сексуальный партнер или они работают в сфере здравоохранения.

Специальной подготовки к ИФА нет. Это простой анализ крови.

Любой, кто проходит тестирование на ВИЧ, может захотеть сообщить лаборанту, если он боится игл или анализа крови.

Кроме того, некоторым людям может быть полезно обратиться за помощью к родственникам или другу во время тестирования на ВИЧ.

Риски и соображения

При проведении этих тестов необходимо учитывать очень мало физических рисков.

При использовании теста ELISA для скрининга на ВИЧ важно помнить о временном интервале.Если тест ELISA будет проведен слишком рано после контакта, организм не вырабатывает достаточно антител, чтобы вызвать положительный результат, даже если вирус может присутствовать.

Чего ожидать: до, во время и после тестов

ELISA-тест — это стандартный анализ крови.

Перед тестом лицо, прошедшее тестирование, может подписать форму согласия. Медицинский техник должен объяснить результаты теста и ответить на любые вопросы.

Затем медицинский работник сделает следующее:

  • осмотрит руку, чтобы найти подходящую вену для забора крови из
  • очистить место исследования антисептическим раствором, чтобы уменьшить количество бактерий на поверхности кожи
  • наложить жгут чтобы вены наполнились кровью
  • введите иглу в вену и снимите жгут так, чтобы игла могла заполнить ее
  • снимите иглу и слегка надавите и наложите повязку на место прокола

После теста не нужно отдыхать.Человек может поехать домой и вести свой день как обычно.

Поделиться на PinterestОтрицательный результат Вестерн-блоттинга на ВИЧ может не гарантировать, что у человека нет ВИЧ.

Результаты одного теста не будут просто положительными или отрицательными.

Вот почему необходим второй тест для подтверждения результатов.

Поскольку тест ELISA чрезвычайно чувствителен, некоторые люди могут давать ложноположительный результат.

Другие инфекции, такие как волчанка, болезнь Лайма и другие ЗППП, могут вызывать ложноположительный результат теста ELISA на ВИЧ.

Из-за этого положительные результаты теста ELISA необходимо подтверждать с помощью другого теста.

Однако, если и тест ELISA, и другой тест обнаруживают вирус, вероятно, он присутствует.

Дальнейшие действия зависят от результатов тестов.

Что произойдет, если результат окажется отрицательным?

Результаты обоих тестов отрицательны. : Если контакт произошел в течение последних 3 месяцев, ВИЧ может присутствовать, но еще не обнаружен.В этом случае человек должен повторить тестирование через 3 месяца. Между тем, на всякий случай им следует принять меры для предотвращения передачи вируса.

Меры предосторожности могут включать использование презервативов во время секса, доконтактную профилактику (PrEP) и постконтактную профилактику (PEP).

Результат отрицательный, человек не имел контакта с ВИЧ. : Дальнейшее тестирование может не потребоваться.

Что делать, если результат положительный?

Один или оба теста положительны. : Крайне важно немедленно обратиться за медицинской помощью.Для подтверждения результата может быть рекомендовано дальнейшее обследование, а при необходимости может быть начат лечебный режим.

Сюда могут входить:

  • рецепт на антиретровирусные препараты
  • информация о том, куда обратиться за специализированным лечением
  • совет о местных группах поддержки
  • рекомендации по предотвращению передачи

Анализы и результаты обычно конфиденциальны, а иногда и анонимны. Однако, если результат положительный, важно поговорить об этом с партнером, так как им также может быть рекомендовано обследование.

Предоставляется финансовая помощь для лечения ВИЧ. Страховщики должны покрывать часть расходов, а государственные программы здравоохранения могут помочь тем, у кого нет страховки.

Доступны многие типы тестов на ВИЧ, которые рекомендуются для использования в лабораториях.

Хотя тест ELISA все еще может использоваться при скрининге на ВИЧ, можно также рассмотреть следующие тесты:

  • Другие тесты на антитела : Подобно тестам ELISA и вестерн-блоттинга, эти тесты проверяют наличие антител в крови, слюне , и моча.
  • Тесты на антиген или антитела : Эти тесты проверяют как наличие вируса, так и вирусные антитела, что делает их чрезвычайно точными для раннего обнаружения. Эти тесты доступны только с использованием анализов крови.
  • NAT : Этот тест используется для выявления ВИЧ через 7–28 дней после контакта с высоким риском. Хотя этот тест является наиболее точным для недавнего облучения, он чрезвычайно дорог и используется только в тех случаях, когда облучение имело место.

Кроме того, может быть рекомендован дальнейший скрининг для выявления состояний, которые также могут присутствовать, таких как гепатит или токсоплазмоз.Может быть рекомендован тест на беременность.

Наборы для домашнего тестирования доступны для покупки в Интернете. Важно убедиться, что набор одобрен Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA), и тщательно следовать всем инструкциям.

Текущие анализы

Если результат положительный, человеку потребуется постоянная поддержка. Важно соблюдать все записи на прием и осторожно следовать советам медицинской бригады.

Дальнейшие испытания и мониторинг будут проводиться через определенные промежутки времени или по мере необходимости.

Число CD4 может помочь отслеживать, насколько хорошо работает иммунная система и вероятность заражения оппортунистической инфекцией или заболеванием с течением времени.

Тест на вирусную нагрузку показывает, сколько вируса находится в крови. Когда вирусная нагрузка ниже определенного уровня, ее невозможно обнаружить. Пока вирус остается не обнаруживаемым, человек может рассчитывать на то, что он останется здоровым, и он не передаст вирус другому человеку.

факторов риска для многократно реактивного ИФА на ВИЧ-1 и неопределенного вестерн-блоттинга: популяционное исследование «случай-контроль» | JAMA Internal Medicine

Цель: Причины неопределенных результатов вестерн-блоттинга (IWB) на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) типа 1 включают сероконверсию, перекрестную реактивность ВИЧ-2 и аутоиммунное заболевание, но большинство результатов IWB остаются необъясненными.В этом исследовании «случай-контроль» оценивались факторы риска результатов IWB, включая раннюю ВИЧ-инфекцию, другие ретровирусные инфекции, аутоантитела и другие медицинские состояния.

Дизайн: Проспективное исследование для определения уровня сероконверсии к ВИЧ с дизайном случай-контроль для оценки других факторов риска IWB. Пациенты (люди с одним или несколькими повторно-реактивными иммуноферментными анализами ВИЧ-1 с IWB), их текущие половые партнеры и контрольная группа (лица с отрицательными результатами иммуноферментного анализа и вестерн-блоттингом) были набраны из банков крови, отдела здравоохранения и пренатальных клиник, а также частных провайдеры в Вашингтоне и Орегоне.

Результатов: Из 244 зарегистрированных случаев 206 наблюдались в течение 6 месяцев или дольше, а шесть (3,0%; 95% доверительный интервал [ДИ], 0,7–5,3%) имели сероконверсию недавнего поведения, связанного с риском заражения ВИЧ. Образцы полос Вестерн-блоттинга различались между группами; в случаях обычно имелись полосы p17 или p24, в то время как в контрольной группе и у половых партнеров были полосы полимеразы. Условная логистическая регрессия показала, что независимыми факторами риска IWB среди мужчин и контрольной группы были ревакцинации от столбняка в последние 2 года (отношение шансов, 3.2; 95% ДИ от 1,2 до 8,6) и сексуальный контакт с проституткой (отношение шансов 3,0; 95% ДИ от 1,0 до 9,5). Независимыми факторами риска для женщин были паритет (отношение шансов, 1,2; 95% ДИ, от 1,02 до 1,4) и аутоантитела, либо ревматоидный фактор, либо антинуклеарные антитела (отношение шансов 2,3; 95% ДИ от 1,03 до 5,6). Не было обнаружено перекрестной реактивности с ВИЧ-2, человеческим Т-лимфотрофным вирусом типа 1, иммунодефицитом кошек или лейкозом кошек или вирусами иммунодефицита крупного рогатого скота.

Выводы: Обследование лиц с реактивным иммуноферментным анализом ВИЧ-1 и IWB должно включать оценку риска ВИЧ и других возможных факторов риска, таких как аллоиммунизация (т. Е. Паритетная или недавняя иммунизация) или аутоантитела (т. Е. Антинуклеарные антитела и ревматоидный фактор).Отношения IWB среди мужчин, сообщивших о сексе с проститутками, интригуют и требуют дальнейшего изучения (Arch Intern Med. 1994; 154: 1129-1137)

Схема принятия решений для точного определения времени инфицирования у лиц, впервые диагностированных с ВИЧ-1 | BMC Infectious Diseases

  • 1.

    Рабочая группа ЮНЭЙДС / ВОЗ по глобальному эпиднадзору за ВИЧ / СПИДом и ИППП: когда и как использовать тесты на недавнюю инфекцию для оценки заболеваемости ВИЧ на уровне населения. 2011. http: //www.who.int / Diagnostics_laboratory / hiv_incidence_may13_finalpdf. По состоянию на 8 августа 2017 г.

  • 2.

    Schupbach J, Bisset LR, Gebhardt MD, Regenass S, Burgisser P, Gorgievski M, Klimkait T, Andreutti C, Martinetti G, Niederhauser C, et al. Диагностическая эффективность алгоритмов линейного иммуноанализа для выявления случаев инфицирования ВИЧ-1. BMC Infect Dis. 2012; 12: 88. 10.1186 / 1471-2334-12-88.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 3.

    Доббс Т., Кеннеди С., По С.П., Макдугал Дж.С., Парех Б.С. Рабочие характеристики иммуноглобулина G-захвата иммуноферментного анализа BED, анализа для выявления недавней сероконверсии вируса иммунодефицита человека 1 типа. J Clin Microbiol. 2004. 42 (6): 2623–8. 10.1128 / Jcm.42.6.2623-2628.2004.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 4.

    Suligoi B, Galli C, Massi M, Di Sora F, Sciandra M, Pezzotti P, Recchia O, Montella F, Sinicco A, Rezza G.Точность и точность процедуры выявления недавних инфекций вируса иммунодефицита человека путем расчета индекса авидности антител с помощью автоматического метода иммуноанализа. J Clin Microbiol. 2002. 40 (11): 4015–20. 10.1128 / JCM.40.11.4015-4020.2002.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 5.

    Eshleman SH, Hughes JP, Laeyendecker O, Wang J, Brookmeyer R, Johnson-Lewis L, Mullis CE, Hackett J, Vallari AS, Justman J, et al.Использование многостороннего подхода к анализу заболеваемости ВИЧ в когортном исследовании женщин в США: исследование сети испытаний по профилактике ВИЧ 064. J Infect Dis. 2013. 207 (2): 223–31. 10.1093 / infdis / jis658.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 6.

    Браун Т., Грассли Н.С., Гарнетт Г., Станецки К. Улучшение прогнозов на страновом уровне: пакет оценок и прогнозов ЮНЭЙДС. 2005. Половая инфекция. 2006; 82 (Дополнение 3): Iii34–40.10.1136 / ати.2006.020230.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 7.

    Кассанджи Р., Пилчер С.Д., Китинг С.М., Фасенте С.Н., Маккинни Э., Прайс М.А., Мартин Дж. Н., Литтл С., Хехт Ф.М., Каллас Е.Г. и др. CEPHIA: независимая оценка возможных тестов на заболеваемость ВИЧ на образцах в репозитории CEPHIA. СПИД. 2014; 28: 2439–49. 10.1097 / Qad.0000000000000429.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 8.

    Лайендекер О., Брукмейер Р., Оливер А.Э., Маллис К.Э., Итон К.П., Мюллер А.С., Якобсон Л.П., Марголик Дж. Б., Браун Дж., Ринальдо С. Р. и др. Факторы, связанные с неправильной идентификацией недавней ВИЧ-инфекции с помощью иммуноферментного анализа BED. СПИД Res Hum Retrov. 2012. 28 (8): 816–22. 10.1089 / помощь.2011.0258.

    Артикул Google Scholar

  • 9.

    Маринда Е.Т., Харгроув Дж., Прейзер В., Слабберт Х., ван Зил Дж., Левин Дж., Моултон Л.Х., Велте А., Хамфри Дж.Значительно снижена долговременная специфичность иммуноферментного анализа BED у пациентов с ВИЧ-1 с очень низким числом CD4 и пациентов, получающих антиретровирусную терапию. J Acq Imm Def. 2010. 53 (4): 496–9. 10.1097 / QAI.0b013e3181b61938.

    CAS Статья Google Scholar

  • 10.

    Longosz AF, Mehta SH, Kirk GD, Margolick JB, Brown J, Quinn TC, Eshleman SH, Laeyendecker O. Неправильная идентификация недавней ВИЧ-инфекции у взрослых в США с использованием анализа авидности лимитирующего антигена.СПИД. 2014. 28 (8): 1227–32. 10.1097 / Qad.0000000000000221.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 11.

    Wendel SK, Mullis CE, Eshleman SH, Blankson JN, Moore RD, Keruly JC, Brookmeyer R, Quinn TC, Laeyendecker O. Влияние естественного и ARV-индуцированного подавления вируса и вирусного прорыва на антитела к ВИЧ пропорция и авидность у пациентов с ВИЧ-1 подтипа B инфекции. PLoS One. 2013; 8 (2) 10.1371 / журнал.pone.0055525.

  • 12.

    Huynh D, Laeyendecker O, Brookmeyer R. Подход к классификации болезней на основе серийных оценок риска, учитывающий точность и стоимость. Биометрия. 2014; 70 (4): 1042–51. 10.1111 / biom.12217.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 13.

    Ван Бекховен Д., Буве А., Руэлль Дж., Сейлер Л., Сасс А. Национальная когорта ВИЧ-инфицированных пациентов в Бельгии: дизайн и основные характеристики.Acta Clin Belg. 2012. 67 (5): 333–7. 10.2143 / ACB.67.5.2062686.

    CAS PubMed Google Scholar

  • 14.

    де Оливейра Т., Дефорче К., Кассол С., Салминен М., Параскевис Д., Зеебрегтс С., Снок Дж., Ван Ренсбург Е.Дж., Венсинг А.М., ван де Вийвер Д.А. и др. Автоматическая система генотипирования для анализа ВИЧ-1 и других микробных последовательностей. Биоинформатика. 2005. 21 (19): 3797–800. 10.1093 / биоинформатика / bti607.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 15.

    Струк Д., Юрист Г., Тернес А. М., Шмит Дж. К., Беркофф Д. П.. COMET: адаптивное контекстное моделирование для сверхбыстрой идентификации подтипа ВИЧ-1. Nucleic Acids Res. 2014; 42 (18): e144. 10.1093 / нар / gku739.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 16.

    Brookmeyer R, Quinn TC. Оценка текущего уровня заболеваемости вирусом иммунодефицита человека на основе поперечного исследования с использованием ранних диагностических тестов. Am J Epidemiol.1995. 141 (2): 166–72.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 17.

    Фибиг Э. У., Райт Д. Д., Равал Б. Д., Гаррет П. Е., Шумахер Р. Т., Педдада Л., Хельдебрант С., Смит Р., Конрад А., Кляйнман С. Г. и др. Динамика ВИЧ-виремии и сероконверсии антител у доноров плазмы: значение для диагностики и определения стадии первичной ВИЧ-инфекции. СПИД. 2003. 17 (13): 1871–189. 10.1097 / 01.aids.0000076308.76477.b8.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 18.

    Тейлор Д., Дуригон М., Дэвис Х., Арчибальд С., Конрад Б., Кумбс Д., Гилберт М., Кук Д., Крайден М., Вонг Т. и др. Вероятность ложноотрицательного результата теста на антитела к ВИЧ в период окна: инструмент для до- и послетестового консультирования. Int J ЗППП, СПИД. 2015; 26 (4): 215–24. 10.1177 / 0956462414542987.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 19.

    Хаузер А., Сантос-Ховенер С., Мейксенбергер К., Циммерманн Р., Сомоги С., Фидлер С., Хофманн А., Бартмейер Б., Янсен К., Хамуда О. и др.Улучшенное тестирование недавних инфекций ВИЧ-1 с помощью анализа авидности BioRad по сравнению с анализом авидности ограничивающего антигена и иммуноферментным иммуноанализом BED: оценка с использованием панелей эталонных образцов из немецкой когорты сероконвертеров. PLoS One. 2014; 9 (6) 10.1371 / journal.pone.0098038.

  • 20.

    Парех Б.С., Хэнсон Д.Л., Харгроув Дж., Брэнсон Б., Грин Т., Доббс Т., Константин Н., Овербо Дж., Макдугал Дж. С.. Определение среднего периода новизны для оценки заболеваемости ВИЧ типа 1 с помощью BED-capture EIA у лиц, инфицированных различными подтипами.СПИД Res Hum Retrov. 2011; 27 (3): 265–73. 10.1089 / help.2010.0159.

    Артикул Google Scholar

  • 21.

    Хэнсон Д.Л., Сонг Р., Маскиотра С., Эрнандес А., Доббс Т.Л., Парех Б.С., Оуэн С.М., Грин Т.А. Средний период новизны для оценки заболеваемости ВИЧ-1 с помощью BED-capture EIA и био-Rad авидности у лиц, диагностированных в США с подтипом B. PLoS One. 2016; 11 (4): e0152327. 10.1371 / journal.pone.0152327.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 22.

    Busch MP, Pilcher CD, Mastro TD, Kaldor J, Vercauteren G, Rodriguez W., Rousseau C, Rehle TM, Welte A, Averill MD, et al. Заболеваемость WWGH: без расстройки: 10 лет прогресса и новые проблемы в разработке и применении тестов для оценки заболеваемости ВИЧ. СПИД. 2010. 24 (18): 2763–71. 10.1097 / QAD.0b013e32833f1142.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 23.

    Халлетт ТБ. Оценка уровня заболеваемости ВИЧ: недавние и будущие события.Curr Opin ВИЧ СПИД. 2011; 6 (2): 102–7. 10.1097 / COH.0b013e328343bfdb.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 24.

    Велте А., Маквальтер Т.А., Лейендекер О., Халлетт ТБ. Использование тестов на недавнюю инфекцию для оценки заболеваемости: проблемы и перспективы ВИЧ. Eur Secur. 2010. 15 (24): 18–26.

    Google Scholar

  • 25.

    Кассанджи Р., Пилчер С.Д., Буш М.П., ​​Мерфи Дж., Фасенте С.Н., Китинг С.М., Маккинни Е., Марсон К., Прайс М.А., Мартин Дж. Н. и др.Критерии вирусной нагрузки и оптимизация пороговых значений для улучшения характеристик анализа заболеваемости ВИЧ. СПИД. 2016; 30 (15): 2361–71. 10.1097 / QAD.0000000000001209.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 26.

    Коникофф Дж., Брукмейер Р., Лонгош А.Ф., Казинс М.М., Селум С., Бухбиндер С.П., Сейдж Г.Р., Кирк Г.Д., Мур Р.Д., Мехта С.Х. и др. Проведение иммуноферментного анализа авидности лимитирующего антигена для поперечной оценки заболеваемости ВИЧ в США.PLoS One. 2013; 8 (12) 10.1371 / journal.pone.0082772.

  • 27.

    Хладик В., Олара Д., Мермин Дж., Мур Д., Вир В., Александр Л., Даунинг Р. Влияние количества CD4 (+) Т-клеток и антиретровирусной терапии на два серологических анализа заболеваемости ВИЧ. СПИД Res Hum Retrov. 2012. 28 (1): 95–9. 10.1089 / help.2010.0347.

    CAS Статья Google Scholar

  • 28.

    Хенрард Д.Р., Даар Э., Фарзадеган Х., Кларк С.Дж., Филлипс Дж., Шоу Г.М., Буш М.П.Вирусологическая и иммунологическая характеристика симптоматической и бессимптомной первичной инфекции Hiv-1. J. Синдр иммунодефицита Acquir Ретровирол человека. 1995. 9 (3): 305–10.

    CAS Статья Google Scholar

  • 29.

    Sasse A, Florence E, Pharris A, De Wit S, Lacor P, Van Beckhoven D, Deblonde J, Delforge ML, Fransen K, Goffard JC и др. Позднее обращение к тестированию на ВИЧ переоценивается, если оно основано на консенсусном определении. HIV Med.2016; 17 (3): 231–4. 10.1111 / hiv.12292.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 30.

    Судха Т., Лакшми В., Теджа В.Д. Профиль вестерн-блоттинга при ВИЧ-инфекции. Индийский J Dermatol Venereol Leprol. 2006. 72 (5): 357–60.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 31.

    Yu L, Laeyendecker O, Wendel SK, Liang FX, Liu W, Wang XY, Wang L, Pang XW, Fang ZL.Краткое сообщение: низкий уровень ложных недавних результатов анализа авидности лимитирующего антигена среди длительно инфицированных субъектов из Гуанси, Китай. СПИД Res Hum Retrov. 2015; 31 (12): 1247–9. 10.1089 / aid.2015.0097.

    CAS Статья Google Scholar

  • 32.

    Dauwe K, Mortier V, Schauvliege M, Van den Heuvel A, Fransen K, Servais JY, Bercoff DP, Seguin-Devaux C, Verhofstede C. Подтипы B в двух европейских странах с высоким уровнем миграции.BMC Infect Dis. 2015; 15: 524. 10.1186 / S12879-015-1217-0.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 33.

    Mullis CE, Munshaw S, Grabowski MK, Eshleman SH, Serwadda D, Brookmeyer R, Nalugoda F, Kigozi G, Kagaayi J, Tobian AAR, et al. Дифференциальная специфичность тестов на заболеваемость ВИЧ у лиц, инфицированных подтипами А и D, из Ракаи, Уганда. СПИД Res Hum Retrov. 2013. 29 (8): 1146–50. 10.1089 / aid.2012.0105.

    Артикул Google Scholar

  • 34.

    Longosz AF, Serwadda D, Nalugoda F, Kigozi G, Franco V, Gray RH, Quinn TC, Eshleman SH, Laeyendecker O. Влияние подтипа ВИЧ на эффективность иммуноферментного анализа, ограничивающего авидность антигена, биологические исследования. — Анализ авидности и иммуноферментный анализ BED в Ракаи, Уганда. СПИД Res Hum Retrov. 2014; 30 (4): 339–44. 10.1089 / aid.2013.0169.

    Артикул Google Scholar

  • 35.

    Казинс М.М., Коникофф Дж., Сабин Д., Хаки Л., Лонгош А.Ф., Лейендекер О., Селум С., Бухбиндер С.П., Сейдж Г.Р., Кирк Г.Д. и др. Сравнение двух показателей разнообразия ВИЧ в алгоритмах множественных анализов для оценки заболеваемости ВИЧ. PLoS One. 2014; 9 (6) 10.1371 / journal.pone.0101043.

  • 36.

    Браунштейн С.Л., Нэш Д., Ким А.А., Форд К., Мвамбарангве Л., Ингабайр С.М., Вьянкандондера Дж., Ван де Вейгерт Дж. Х. Алгоритм двойного тестирования, состоящий из тестов индекса авидности BED-CEIA и AxSYM, лучше всего подходит для выявления недавней ВИЧ-инфекции в выборке руандийских секс-работников.PLoS One. 2011; 6 (4): e18402. 10.1371 / journal.pone.0018402.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Многокомпонентный анализ показывает, что ВИЧ-1 изменяет иммунометаболизм CD4 + Т-лимфоцитов, чтобы подпитывать репликацию вируса.

  • 1.

    Гаардбо, Дж. К., Хартлинг, Х. Дж., Герстофт, Дж. И Нильсен, С. Д. Неполное восстановление иммунитета при ВИЧ-инфекции: механизмы, актуальность для клинической помощи и возможные решения. Clin.Dev. Иммунол. 2012 , 670957 (2012).

    Артикул Google Scholar

  • 2.

    Palmer, C. S. et al. Повышенная метаболическая активность глюкозы связана с активацией и истощением Т-лимфоцитов CD4 + во время хронической ВИЧ-инфекции. AIDS 28 , 297–309 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 3.

    Палмер, К.С., Палчаудхури, Р., Албарджи, Х., Абдель-Мохсен, М. и Кроу, С. М. Использование метаболических механизмов иммунных клеток для функционального лечения ВИЧ и предотвращения воспаления. F1000Res 7 , 125 (2018).

    Артикул Google Scholar

  • 4.

    Dagenais-Lussier, X. et al. Актуальные темы патогенеза ВИЧ-1: появление нарушения регуляции иммунного метаболизма у ВИЧ-инфицированных. Cytokine Growth Factor Rev. 26 , 603–613 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 5.

    Герриетс В. А. и Ратмелл Дж. С. Метаболические пути в судьбе и функции Т-клеток. Trends Immunol. 33 , 168–173 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 6.

    Valle-Casuso, J. C. et al. Клеточный метаболизм является основным детерминантом посева резервуара ВИЧ-1 в CD4 + Т-лимфоцитов и дает возможность бороться с инфекцией. Cell Metab. 29 , 611–626 (2019).

  • 7.

    Palmer, C. S. et al. Уровень провоспалительных моноцитов, экспрессирующих переносчик глюкозы 1, повышен у субъектов с ВИЧ + , получавших комбинированную антиретровирусную терапию, и нелеченных. J. Immunol. 193 , 5595–5603 (2014).

  • 8.

    Korencak, M. et al. Влияние ВИЧ-инфекции и антиретровирусной терапии на функции иммунных клеток. JCI Insight 4 , e126675 (2019).

  • 9.

    Xia, X. et al. NLRX1 негативно регулирует TLR-индуцированную передачу сигналов NF-κB путем нацеливания на TRAF6 и IKK. Иммунитет 34 , 843–853 (2011).

    CAS Статья Google Scholar

  • 10.

    Мур, К. Б. и др. NLRX1 — регулятор митохондриального противовирусного иммунитета. Nature 451 , 573–577 (2008).

    CAS Статья Google Scholar

  • 11.

    Allen, I.C. et al. Белок NLRX1 ослабляет воспалительные реакции на инфекцию, вмешиваясь в сигнальные пути RIG-I-MAVS и TRAF6-NF-κB. Иммунитет 34 , 854–865 (2011).

    CAS Статья Google Scholar

  • 12.

    Кобланский А.А. и др. Рецептор врожденного иммунитета NLRX1 действует как опухолевый супрессор, снижая онкогенез толстой кишки и ключевые сигналы, способствующие развитию опухоли. Cell Rep. 14 , 2562–2575 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 13.

    Stokman, G. et al. NLRX1 ослабляет окислительный стресс и апоптоз при повреждении тканей за счет контроля митохондриальной активности. J. Exp. Med. 214 , 2405–2420 (2017).

    CAS Статья Google Scholar

  • 14.

    Guo, H. et al. NLRX1 изолирует STING, чтобы негативно регулировать интерфероновый ответ, тем самым облегчая репликацию ВИЧ-1 и ДНК-вирусов. Cell Host Microbe 19 , 515–528 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 15.

    Barouch, D. H. et al. Быстрая активация инфламмасом после инфицирования SIV слизистой оболочки макак-резусов. Cell 165 , 656–667 (2016).

    CAS Статья Google Scholar

  • 16.

    Chan, E. Y. et al. Динамическая энергия хозяина и протеомы цитоскелета в первичных клетках CD4 человека, инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1: анализ с помощью мультиплексной масс-спектрометрии без меток. J. Virol. 83 , 9283–9295 (2009).

    CAS Статья Google Scholar

  • 17.

    Ringrose, J. H., Jeeninga, R. E., Berkhout, B. & Speijer, D. Протеомные исследования выявляют согласованные изменения в паттернах экспрессии Т-клеток при инфицировании вирусом иммунодефицита человека типа 1. J. Virol. 82 , 4320–4330 (2008).

    CAS Статья Google Scholar

  • 18.

    Стэнли, Т. Л. и Гринспун, С. К. Состав тела и метаболические изменения у ВИЧ-инфицированных пациентов. J. Infect. Дис. 205 , S383 – S390 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 19.

    Valle-Casuso, J. C. et al. Клеточный метаболизм является основным детерминантом посева резервуара ВИЧ-1 в CD4 + Т-лимфоцитов и дает возможность бороться с инфекцией. Cell Metab. https: // doi.org / 10.1016 / j.cmet.2018.11.015 (2019).

  • 20.

    Робб М. Л. и др. Проспективное исследование острой инфекции ВИЧ-1 у взрослых в Восточной Африке и Таиланде. N. Engl. J. Med. 374 , 2120–2130 (2016).

  • 21.

    Mellors, J. W. et al. Прогноз при ВИЧ-1 инфекции определяется количеством вируса в плазме. Science 272 , 1167–1170 (1996).

    CAS Статья Google Scholar

  • 22.

    Келли, К. Ф., Барбур, Дж. Д. и Хехт, Ф. М. Связь между симптомами, вирусной нагрузкой и заданным значением вирусной нагрузки при первичной ВИЧ-инфекции. J. Acquir. Иммунодефицит. Syndr. 45 , 445–448 (2007).

    Артикул Google Scholar

  • 23.

    Wheaton, W. W. et al. Метформин ингибирует митохондриальный комплекс I раковых клеток, снижая онкогенез. El ife 3 , e02242 (2014).

  • 24.

    Ye, C. et al. Заякоренный гликозилфосфатидилинозитолом scFv против ВИЧ эффективно защищает Т-клетки CD4 от инфекции и делеции ВИЧ-1 у мышей hu-PBL. J. Virol. https://doi.org/10.1128/JVI.01389-16 (2017).

  • 25.

    Martin-Montalvo, A. et al. Метформин улучшает продолжительность здоровья и продолжительность жизни мышей. Nat. Commun. 4 , 2192 (2013).

    Артикул Google Scholar

  • 26.

    МакКьюн, Дж. М. Динамика истощения Т-лимфоцитов CD4 + при ВИЧ-инфекции. Nature 410 , 974–979 (2001).

    CAS Статья Google Scholar

  • 27.

    Перникова И. и Корбониц М. Метформин — механизм действия и клинические последствия для диабета и рака. Nat. Rev. Endocrinol. 10 , 143–156 (2014).

  • 28.

    Hegedus, A., Kavanagh Williamson, M.& Huthoff, H. Патогенность ВИЧ-1 и продукция вирионов зависят от метаболического фенотипа активированных CD4 + Т-клеток. Ретровирология 11 , 98 (2014).

    Артикул Google Scholar

  • 29.

    Lagouge, M. et al. Ресвератрол улучшает функцию митохондрий и защищает от метаболических нарушений, активируя SIRT1 и PGC-1α. Cell 127 , 1109–1122 (2006).

    CAS Статья Google Scholar

  • 30.

    Csiszar, A. et al. Ресвератрол индуцирует митохондриальный биогенез в эндотелиальных клетках. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 297 , h23 – h30 (2009 г.).

    CAS Статья Google Scholar

  • 31.

    Lei, Y. et al. Митохондриальные белки NLRX1 и TUFM образуют комплекс, регулирующий интерферон I типа и аутофагию. Иммунитет 36 , 933–946 (2012).

    CAS Статья Google Scholar

  • 32.

    Lei, Y. et al. Терапия с использованием моноклональных антител, нацеленных на EGFR, модулирует аутофагию при плоскоклеточном раке головы и шеи посредством белкового комплекса NLRX1-TUFM. Онкоген 35 , 4698–4707 (2016).

  • 33.

    Vermeire, J. et al. ВИЧ запускает cGAS-зависимый, регулируемый Vpu и Vpr интерфероновый ответ типа I в CD4 + Т-клетках. Cell Rep. 17 , 413–424 (2016).

  • 34.

    Ли, С., Ван, Л., Берман, М., Конг, Ю. Ю. и Дорф, М.E. Картирование динамической сети взаимодействия белков врожденного иммунитета, регулирующей выработку интерферона I типа. Иммунитет 35 , 426–440 (2011).

    CAS Статья Google Scholar

  • 35.

    Jourdain, A. A. et al. Специфическая для митохондрий изоформа FASTK присутствует в гранулах митохондриальной РНК и регулирует экспрессию и функцию генов. Cell Rep. 10 , 1110–1121 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 36.

    Antonicka, H. & Shoubridge, E.A. Гранулы митохондриальной РНК являются центрами посттранскрипционного процессинга РНК и биогенеза рибосом. Cell Rep. 10 , 920–932 (2015).

    CAS Статья Google Scholar

  • 37.

    Tarancon-Diez, L. et al. Иммунометаболизм — ключевой фактор постоянного спонтанного контроля элиты над инфекцией ВИЧ-1. EBioMedicine 42 , 86–96 (2019).

    Артикул Google Scholar

  • 38.

    Зунига, Дж. А., Исли, К. А., Шенви, Н., Нгуен, М. Л. и Холстад, М. Влияние диабета на восстановление CD4 у людей с ВИЧ в городской клинике в США. Int J. STD AIDS 29 , 63–71 (2018).

    Артикул Google Scholar

  • 39.

    Moyo, D. et al. Когортное исследование диабета у ВИЧ-инфицированных взрослых пациентов: оценка влияния сахарного диабета на восстановление иммунитета. Diabetes Res. Clin. Пр. 103 , e34 – e36 (2014).

    CAS Статья Google Scholar

  • 40.

    Карр А. Токсичность антиретровирусной терапии и ее значение для разработки лекарств. Nat. Rev. Drug Discov. 2 , 624–634 (2003).

  • 41.

    Routy, J. P. et al. Влияние метформина на размер резервуара ВИЧ у лиц, не страдающих диабетом, принимающих АРТ: протокол нерандомизированного пилотного исследования Lilac в одной группе. BMJ Open 9 , e028444 (2019).

    Артикул Google Scholar

  • 42.

    Комитет по обновлению Руководства по уходу и использованию лабораторных животных et al. Руководство по уходу и использованию лабораторных животных 8-е изд (National Academies Press, 2011).

  • 43.

    Konig, R. et al. Глобальный анализ взаимодействий хозяин-патоген, регулирующих репликацию ВИЧ-1 на ранней стадии. Cell 135 , 49–60 (2008).

    CAS Статья Google Scholar

  • 44.

    Guo, H., Gao, J., Taxman, D. J., Ting, J. P. & Su, L. Инфекция ВИЧ-1 индуцирует продукцию интерлейкина-1β через TLR8-зависимые белковые механизмы и инфламмасомы NLRP3 в человеческих моноцитах. J. Biol. Chem. 289 , 21716–21726 (2014).

    Артикул Google Scholar

  • 45.

    Livak, K. J. & Schmittgen, T.{- \ Delta \ Delta {\ rm {C}} _ ​​{{\ rm {T}}}} \) метод. Методы 25 , 402–408 (2001).

  • 46.

    Uchimura, T. et al. Сенсор врожденного иммунитета NLRC3 действует как реостат, который точно настраивает ответы Т-клеток при инфекции и аутоиммунитете. Иммунитет 49 , 1049–1061 (2018).

    CAS Статья Google Scholar

  • 47.

    Чен, Х., Смит, Л. М. и Брэдбери, Э. М. Site-specific mass tagging со стабильными изотопами в белках для точной и эффективной идентификации белков. Анал. Chem. 72 , 1134–1143 (2000).

    CAS Статья Google Scholar

  • 48.

    Zecha, J. et al. Маркировка TMT для масс: надежный и экономичный подход к маркировке в растворе. Мол. Cell Proteom. 18 , 1468–1478 (2019).

    CAS Статья Google Scholar

  • 49.

    Smyth, G. K. et al. в Решениях для биоинформатики и вычислительной биологии с использованием R и Bioconductor 1st edn (eds.Джентльмен Р., Кэри В., Хубер В., Иризарри Р. и Дудуа С.) 379–420 (NY Springer, 2005).

  • 50.

    Subramanian, A. et al. Анализ обогащения набора генов: основанный на знаниях подход для интерпретации профилей экспрессии в масштабе всего генома. Proc. Natl Acad. Sci. США 102 , 15545–15550 (2005).

    CAS Статья Google Scholar

  • 51.

    Mostafavi, S., Ray, D., Warde-Farley, D., Grouios, C.И Моррис, Q. GeneMANIA: алгоритм интеграции сети множественных ассоциаций в реальном времени для прогнозирования функции генов. Genome Biol. 9 , S4 (2008).

    Артикул Google Scholar

  • Вестерн-блоттинг и ELISA (иммуноферментный анализ)

    Посмотрите, как исследователи из Университета Ланкастера д-р Лиза Бишоп и Катарина Хартман демонстрируют ELISA (ферментно-связанный иммуносорбентный анализ) и вестерн-блоттинг

    В этом видео показаны два метода, которые очень часто используются в вирусология.Первый — это Вестерн-блоттинг , который обнаруживает вирусные антигены (белки, обычно на поверхности вирусов) с помощью антител против этих белков. Положительный результат вестерн-блоттинга указывает на наличие вирусного антигена — что очень часто означает живой вирус — у нашего пациента. У этого пациента может быть продолжающаяся вирусная инфекция. ELISA (иммуноферментный анализ) — это родственный метод, но вместо использования антител для обнаружения вирусного антигена он использует вирусный антиген для обнаружения антител.Положительный ИФА указывает на наличие антител к вирусу у нашего пациента. У этого пациента могла быть вирусная инфекция, на которую отреагировала его иммунная система. Часто это означает, что у них нет живого вируса, и они выздоровели. Поскольку антитела могут сохраняться в течение некоторого времени после заражения вирусом, ELISA может обнаруживать инфекции, которые произошли некоторое время назад. Сначала это может немного сбивать с толку, поскольку эти два метода в определенной степени являются зеркальным отображением друг друга. Главное помнить, что антиген и — это вирусный белок, который представляет собой мишень для иммунной системы.То, что иммунная система запускает против этого антигена, — это антитело . Антитела прикрепляются к антигенам, чтобы разрушить их, и этот естественный процесс используется в этих двух методах. Очищенные антитела против определенных вирусных антигенов используются в вестерн-блоттинге. Когда образец пациента выходит на гель, очищенное антитело связывается с ним и (после добавления вторичного антитела , которое является антителом к ​​антителу) сигнализирует нам о наличии вирусного антигена.Очищенные антигены некоторых вирусов используются в ELISA. Когда образец пациента добавляется в лунку, антиген в лунке связывает антитела в образце. Снова вторичное антитело используется для усиления сигнала. На этот раз сигнал указывает на то, что у пациента есть антитела против вируса, поэтому, если у пациента есть антиген (вестерн-блоттинг), это, вероятно, означает, что инфекция все еще активна. И если у пациента есть антитела (ELISA), это, вероятно, означает, что у пациента был вирус в довольно недавнее время, но он может больше не иметь активной инфекции.
    • Вестерн-блоттинг спрашивает: «Кто болен?»
    • ELISA спрашивают: «Кто был болен?»
    Ссылки на дополнительные материалы для чтения можно найти ниже.

    вирусов | Бесплатный полнотекстовый | Сборка, процессинг и инфицирование мутанта ВИЧ-1 экспрессирует Pol независимо от Gag

    . Продукция G2AP ассоциированного с вирусом Gag и RT на уровнях намного ниже, чем у wt, отчасти объясняется усиленным расщеплением Gag сверхэкспрессированным Pol, содержащим активный PR. Соответственно, выход вируса может увеличиваться, если уровень экспрессии Pol снижается до нормального соотношения Gag – Pol / Gag.Чтобы подтвердить это предположение, мы использовали вектор, продуцирующий вирус ВИЧ-1 (обозначенный Dp6 * PR), ранее описанный как способный к сборке и процессингу вирусных частиц таким же образом, как и у wt [27]. Dp6 * PR экспрессировал Gag-Pol, содержащий дублированный p6 * -PR, причем первая копия PR была намеренно мутирована для удаления ферментативной активности. Вставка в рамке 2А между PR-инактивированным PR и кодирующей последовательностью pol в Dp6 * PR давала конструкцию, помеченную D2APol (фиг. 4A). Поскольку исходный сигнал сдвига рамки считывания / pol оставался неизменным, уровень 2A-опосредованной экспрессии Pol из D2APol был значительно снижен до 5-10% от Gag.D2APol продуцировал связанный с вирусом Gag на уровне, намного превышающем уровень G2AP (средняя панель на рис. 4B, дорожка 5 и дорожка 3), что подтверждает предположение, что выход вируса G2AP может быть увеличен, когда уровень экспрессии Pol снижается до нормального Gag– Соотношение Pol / Gag. D15E и P22A клонировали в D2APol (обозначенный как D2A / D15EPol и D2A / P22APol), чтобы служить в качестве контроля. Согласно нашим результатам вестерн-блоттинга, Dp6 * PR проявляет фенотип, сходный с фенотипом дикого типа (рис. 4В, дорожка 2 против дорожки 4), что согласуется с предыдущими сообщениями [26,27].Напротив, D2APol имел более высокий уровень Gag, но более низкие уровни RT в образцах супернатанта по сравнению с Dp6 * PR. Это свидетельствует о дефекте включения Pol в вирионы (рис. 4В, дорожка 5). Недостаточный вирус-ассоциированный Pol может не обеспечивать достаточную PR-активность для опосредования обработки вируса, что объясняет, почему значительное количество Gag, ассоциированного с вирусом D2APol, остается необработанным или не полностью обработанным. Недостаточная RT и недостаточное созревание вируса привели к плохой инфекционности D2APol (таблица 1). Подобно G2AP, след Gag-Pol был обнаружен в образце супернатанта трансфектанта D2APol в присутствии ингибитора PR ВИЧ-1 (рис. 4C, верхняя панель, дорожка 5).Поскольку D15E способен блокировать функцию 2A (Figure 3B), мы не были удивлены, обнаружив, что D2A / D15EPol обнаруживает фенотип, сходный с фенотипом Dp6 * PR (Figure 4B, полосы 2-3 и 8-9). Подобно G2AP / P22A, Pol все еще обнаруживался в образцах супернатанта трансфектанта D2A / P22APol, когда активность PR была подавлена ​​(рис. 4C, дорожка 7 верхней панели) из-за неполного ингибирования функции 2A мутацией P22A. Полоса мигрирует медленнее, чем Pr55gag. м. состоять из Gag (MA-CA-NC) -p6 * -PR-2A (Рис. 4B, C верхняя вторая панель), происходящих из 2A-опосредованного расщепления во время трансляции Gag-Pol D2APol.Существует вероятность того, что этот связанный с 2A продукт Gag собирается и высвобождается из клеток в виде VLP. В совокупности эти результаты (а) подтверждают гипотезу о том, что снижение уровня экспрессии Pol улучшает дефект сборки вируса, вызванный сверхэкспрессией Pol, и (б) поддерживают идею о том, что экспрессия Pol в виде слитого белка Gag-Pol необходима для эффективного включения вирусного фермента в вирусные частицы.

    Накопление MxB / Mx2-устойчивых вариантов капсида ВИЧ-1 во время распространения эпидемии ВИЧ-1 в человеческих популяциях

    Основные моменты

    Встречающиеся в природе варианты капсида ВИЧ-1 придают устойчивость ВИЧ-1 к MxB.

    MxB-устойчивый капсид A116 является основным вариантом ВИЧ-1 подтипа C.

    Вариант капсида ВИЧ-1 A116 накапливается во время распространения эпидемии ВИЧ-1 в Китае.

    MxB-устойчивые варианты капсида ВИЧ-1 поддерживают взаимодействие с MxB.

    Интерферон (IFN) является ключевым компонентом врожденного иммунного ответа на экзогенные патогены. MxB человека был идентифицирован как мощный ингибитор ВИЧ-1, индуцированный интерфероном.Как ВИЧ-1 ускользает от ингибирования MxB, неясно. Это исследование демонстрирует, что вариации капсида, обнаруженные в первичных изолятах ВИЧ-1, могут опосредовать устойчивость к MxB. Мутации капсида, устойчивые к MxB, могут накапливаться во время передачи ВИЧ-1 и в основном обогащены кладом C HIV-1, который является наиболее быстро распространяющимся кладом во всем мире. Идентификация критической роли этих мутаций капсида в преодолении фактора ограничения хозяина может предоставить возможности для разработки терапевтических вмешательств.

    Abstract

    Недавние исследования идентифицировали белок 2 устойчивости к миксовирусу человека (MxB или Mx2) как индуцированный интерфероном ингибитор репликации ВИЧ-1. Однако остается неясным, может ли ВИЧ-1 преодолеть ограничение MxB без ущерба для вирусной пригодности. Здесь мы обнаружили, что встречающиеся в природе варианты капсида (CA) могут сделать ВИЧ-1 устойчивым к активности MxB без потери вирусной инфекционности или способности избежать индукции интерферона. Более того, эти устойчивые к MxB варианты ВИЧ-1 не теряют распознавания MxB.Удивительно, но устойчивые к MxB варианты CA чаще всего встречаются в Clade C HIV-1, который является наиболее быстро распространяющимся Clade во всем мире. Накопление мутаций, устойчивых к MxB, также наблюдается при распространении ВИЧ-1 в человеческих популяциях.

    Написать ответ

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *